血清检验和细菌检验在检查布氏菌感染应用价值

王利平 刘阳子

(1.渭南市妇幼保健院检验科,陕西 渭南 714000;2.榆林市第一医院检验科,陕西 榆林 719000)

布鲁氏菌病(Brucellosis)又称为布氏杆菌病、布病、地中海热、马耳他热等,是动物感染布鲁氏菌后在传染给人的一种疾病是严重危险人类健康的一类人畜共患性疾病。临床对于布氏杆菌病的治疗方法较为明确,予以敏感的抗生素即可有效控制感染,取得较好预后。但难点在于准确、快速的诊断疾病[1]。目前临床对于病原体感染性疾病的诊断方法的金标准均为病原体培养阳性,及临床常说的细菌检验培养并分离鉴别出准确的感染病原菌。但病原菌培养具有时间长、环节众多、病原菌分离鉴别难度大的特点,使得检出率低、漏检率高[2]。目前我国2007年制定的《布鲁氏杆菌病诊断标准》中的诊断方法为以病史、实验室检查、体格检查相结合进行综合诊断的方法[3]。本方案分析血清检验、细菌检验方法对布鲁氏菌病的诊断效能,以期为临床此类患者的诊断提供更为客观的标准,促进该病防治水平。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取我院2018年4月至2021年10收治的疑似布氏菌感染患者80例,其中男43例,女37例,年龄24～71岁,平均年龄(61.5±4.8)岁。纳入标准:所有患者均经初诊医师根据流行病学史、临床症状等初诊为疑似布氏杆菌病;年龄≥18周岁;认知功能正常,能理解研究方案内容,知情同意。排除标准:入组前1个月内有抗生素应用史者;既往有布氏杆菌病史者;合并全身或其他部位感染性疾病者;合并有严重心、肝、肾、造血系统、代谢等疾病或精神病者;有结核、肿瘤、伤寒、风湿热等病史者;(6)临床资料收集不完整者。

1.2方法 所有患者均收集完整的流行病学史(如发病前是否有与家畜或污染动物制品、布鲁菌培养物等有密切接触史,居住地是否为布鲁菌病流行区等)、临床症状(是否出现发热、多汗、乏力、肌肉痛、关节痛、头痛、厌食、消瘦、和(或)伴心脏、神经、骨关节、泌尿等系统并发症)等资料,对所有入组患者均行血清检验及血液、骨髓、其他体液及排泄物的细菌微生物培养分离试验。所有患者完善上述信息收集及检查结果后,由两位资深感染科医师根据上述信息参照《布鲁氏菌病诊断标准》对患者是否感染布鲁氏菌病做出综合诊断结论。

1.3观察标准 (1)血清检验检验:采集入组患者空腹静脉血于采血管中,采用2 000转/min的转速离心10 min,分离得上层血清,取其中的0.03 mL作为检测标本,将0.03 mL布鲁氏杆菌病抗原与0.03 mL血清混合,室温放置4 min,观察是否出现抗原凝聚反应,若4 min后出现凝聚则为阳性。取6支试管凝集,分别加入0.5 mL0.9%氯化钠溶液,再加入0.5 mL布氏杆菌病抗原,将第1支混合液添加到第2支中,依次进行至第5支,倒出混合液,取5份每份0.5 mL布氏菌抗体分别加入第1～5支试管中,分别对六只试管于37℃温控箱中培养12 h。检查试管持否出现“++”,若出现则判为血清凝集。 (2)细菌学检验:由资深护士遵医嘱采集患者咽拭子、粪便、小便、血液、骨髓等疑似感染部位标本,按照《全国临床检验操作规范(第四版)》[4]中的微生物培养规程,对标本进行接种、培养,培养出的病原菌进行分离鉴别。 (3)布鲁氏菌感染病诊断金标准:由两位资深的感染科医师参照布鲁氏菌病诊断标准中,对所有患者的临床信息及实验室信息综合判断疑似患者是否为确诊患者。具体诊断标准为:(流行病学接触史(发病前患者曾有家畜、畜产品、布鲁氏菌培养物等有密切接触史,或生活在疫区,或与疫苗生产、使用和研究相关人员、环境、设施、设备、以期等有密接关系)、(临床症状(出现持续数日乃至数周发热(包括低热),多汗,乏力,肌肉和关节疼痛等。多数患者淋巴结、肝、脾和睾丸肿大,少数患者可出现各种各样的充血性皮疹和黄疸;慢性期患者多表现为骨关节系统损害)、(SAT滴度为(++)及以上,三项均满足则诊断为布氏杆菌病患者。(4)质量控制:两位医师若做出的诊断结论一致则以此结论出具诊断报告,若若两者诊断结论不一致,则应针对结论不一致的项目进行重新检查,主要是体格检查方面的不一致,则两位医师共同检查,取得一致则出具诊断结论。以两位医师出具的诊断结论作为金标准,分别计算血清检验和细菌检验及二者联合诊断布鲁氏菌病的诊断效能指标:灵敏度、特异度、准确度、误诊率、漏诊率。

2 结 果

2.1综合诊断、血清实验、细菌实验诊断布氏杆菌病结果 80例疑似布氏菌感染患者中经综合诊断确诊者为56例,细菌检验确诊43例,血清检验确诊51例,血清检验联合细菌检验确诊53例。见表1。

表1 综合诊断、血清实验、细菌实验诊断布氏杆菌病结果

2.2综合诊断、血清实验、细菌实验诊断布氏杆菌病诊断效能指标分析 血清检验联合细菌检验诊断布氏菌感染灵敏度、特异度、准确度高于单纯血清检验和细菌检验,而误诊率、漏诊率低于单纯血清检验和细菌检验。见表2。

表2 综合诊断、血清实验、细菌实验诊断布氏杆菌病诊断效能指标

3 讨 论

随着分子生物技术不断进展,临床对多项新型快速诊断技术在布鲁菌病诊断中的价值进行了研究,常用的方法有试管凝集试验、抗人球蛋白试验、琥红平板凝集试验、酶联免疫吸附试验、补体结合试验、胶体金免疫层析法等等[6]。但是上述诊断方法都存在不同的局限性,如血清凝集实验对于其他类型的急性感染性疾病存在假阳性,临床需要最终确诊细菌检验仍然占据主导地位[6]。因此,通过联合诊断的方式提升现有检查方法在诊断布鲁菌病中的诊断效能成为临床布鲁菌病诊断的新思路[7]。

本文结果显示,细菌检验的方法的诊断灵敏度较低仅达到73.21%,而血清检验的诊断灵敏度则可达到83.93%,但其假阳性率应该比较高。采用血清检验联合细菌检验诊断布氏菌感染的诊断灵敏度、特异度、准确度、误诊率、漏诊率分别为:91.07%、91.67%、91.25%、9.09%、9.80%,均达到了较高的诊断效能。两种检查方法联合诊断布鲁菌病,有效降低了血清检验方法的地特异性和误诊率,同时补充了细菌检验诊断中的灵敏度低及漏诊率高的的问题,两种方法联合应用互相补充不足,达到了更好的诊断效能。

综上,血清检验联合细菌检验诊断布氏菌感染相较于单一的血清检验和细菌检验具有更高的诊断灵敏度、准确度,及更低的误诊率和漏诊率,具有更高的临床价值。