张慧玲,范雅婷,刘浃怡,沈景林*,房恒通,张 晶
1.吉林省五星动物保健有限公司,吉林农安 130000;2.吉林大学动物科学学院,吉林长春 130062
动物健康状况取决于动物品种良种化、环境生态标准化、饲养管理科学化和疫病防控程序化等因素的执行力度,以往的疫病防控,一是按畜禽防疫程序进行免疫,二是利用抗生素防治畜禽常见病和易感病[1]。2019 年中国农业农村部宣布2020 年饲料全面禁抗限抗,并发布第194 号公告,自2020年7 月1 日起,饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料,由此,疫病防控和动物保健已成为维持动物健康的研究热点[2]。微生态制剂是利用动物体内提取的有益微生物调整人类或畜禽宿主体内的微生态失调,保持微生态平衡的益生菌及其代谢物和促生长物的一种新兴的绿色添加剂[3、4],具有促进动物生长发育,维持体内微生态平衡,增强动物免疫力等多方面的作用[5、6]。通过日粮中添加微生金肽素饲喂獭兔试验,研究其对獭兔生产性能及疫病防控方面的影响,以其在畜禽疫病防控和动物保健方面成为替代抗生素的饲料添加剂,在畜禽养殖业中得到广泛应用。
实验兔选用吉林大学吉戎兔繁育中心(原解放军军需大学吉戎兔原种兔场)培育的獭兔新品种-吉戎兔,选取发育状况良好,体重相近的50 日龄断奶仔兔60 只,标记耳号,按平均体重(p<0.05)分为4 组,其中1 个对照组ck,3 个试验组(Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组),每组3 个重复,每个重复4 只实验兔,每组3 只后备,预试期7 d,在吉林大学吉戎兔繁育中心兔舍三层重叠式金属笼内饲养。
微生金肽素,河北省京科动物药业有限公司生产,主要组分有:腊状芽孢杆菌、酵母菌、乳酸杆菌及其有益代谢产物、低聚糖、红酒酵母多糖、氨基酸、维生素、微量元素、未知生长因子,有效微生物含量≥30 亿/g,按0.5‰、1.0‰、1.5‰的梯度分别添加于3 个试验组的日粮中。
分析天平,电子称,剪毛剪刀,耳号钳,饲料粉碎机,饲料颗粒机。
实验期间对照组ck 饲喂獭兔正常颗粒饲料,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别饲喂添加0.5‰、1‰、1.5‰微生金肽素的试验日粮,不加喂任何青绿饲料,每天定时定量饲喂,每日2 次(8:00、16:00),记录数据,自由饮水,保持兔舍安静并采取驱虫保健,疫苗接种等必要的疫病防疫措施,饲喂期间需注意实验用兔的生长发育情况,在其体重接近1.3 kg 时应分为单笼,以免吉戎兔之间撕咬或抢食。戎兔基础日粮水平见表1。随实验兔体重的增加,实验兔采食量也相应的 增加。对照组和试验组的饲喂量见表2。
表1 基础日粮配方及营养水平
表2 不同处理饲料饲喂量
1.5.1 体重测量
实验开始前预饲3 d,空腹称取初始体重,饲喂期间每10 天空腹称重1 次,记录数据,饲养试验2 个月后,每组选取9 只实验兔进行取样分析。
1.5.2 皮张面积与被毛密度
饲喂结束后剪掉选取的9 只獭兔颈后部1 cm2兔毛,称重,计数500 根兔毛称重,计算被毛密度;测量实验兔体长及胸围,计算皮张面积。
1.5.3 发病率和死亡率
试验期间观察实验兔的生长发育状况、采食情况、运动和精神状态,统计实验兔的发病和死亡数量,计算发病率和死亡率。
1.5.4 免疫指标
测得的指标主要有体液免疫和非特异性免疫指标,包括体液免疫参数的免疫球蛋白IgA、IgG、IgM,非特异性免疫参数的C3、C4 补体蛋白,超氧化物歧化酶活性以及溶菌酶的活性。
测定方法:免疫球蛋白以及补体蛋白采用全自动生化分析仪ACA 迪瑞CS-600 进行测定;超氧化物歧化酶SOD 的活性、溶菌酶活性采用试剂盒测定,是由南京建成生物公司的总SOD 酶活力测定试剂盒和溶菌酶活力测定试剂盒进行测定。测定试剂盒等相关试剂必须严格按照实验要求及说明书进行规范操作与保存。
对所得数据进行计算再通过SPSS 软件进行单因素方差分析处理,并用LSD 法进行平均数间的差异显著性检验。
科学合理和安全有效的饲料才能保证动物健康,进而影响动物的正常生长发育,在饲料中添加不同水平微生金肽素,通过饲喂吉戎兔试验,研究微生金肽素对吉戎兔生长发育的影响,微生金肽素对吉戎兔增重影响见表3。
表3 微生金肽素对吉戎兔增重的影响 单位:kg
结果表明,微生金肽素对吉戎兔生长发育有影响,无显著差异(p>0.05)。试验1 ~10 d 时对照组、Ⅱ组和Ⅲ组实验兔体重略有下降,这主要是预饲期结束后实验兔还有应激反应,试验1 ~40 d 时Ⅰ组和Ⅲ组吉戎兔平均增重均低于对照组(p>0.05),试验1 ~50、1 ~60 d 时Ⅰ组和Ⅲ组吉戎兔平均增重均高于对照组(p>0.05);Ⅱ组在1 ~10 d时略有减重外,11 ~60 d 时吉戎兔平均增重均高于对照组(p>0.05),1 ~20 d 时吉戎兔平均增重低于Ⅰ组(p>0.05),21 ~60 d 时吉戎兔平均增重均高于Ⅰ组(p>0.05);Ⅱ组和Ⅲ组在1 ~10 d时均略有减重外,Ⅱ组在11 ~60 d 时吉戎兔平均增重均高于Ⅲ组(p>0.05)。微生金肽素中大量的有益微生物在动物体肠道和饲料中生长繁殖,代谢产出许多对其生长发育有益的生物活性物质,特别是酶类、维生素和氨基酸的大量产生[7、8],对消化系统有增强营养物质的吸收和促进消化的作用,其中光合细菌能利用体温进行糖和淀粉的合成,乳酸菌能将糖和淀粉生成有机酸并能分解粗纤维,这样就提高了动物对饲料的蛋白质、脂肪和碳水化合物等营养素的利用率[9、10],促进了其生长,但增重效果不明显。
吉戎兔是以皮用为主的新品种兔,影响毛皮品质的因素有被毛密度、被毛整齐度、被毛亮度、毛纤维长度、皮张面积和皮板厚度等,其中被毛密度和皮张面积是是影响毛皮品质的两个主要指标。结果显示,微生金肽素影响吉戎兔被毛密度,且差异显著(p<0.05)。Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组3 个试验组的被毛密度均高于对照组,Ⅰ组和对照组相比差异不显著(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组均高于Ⅰ组和对照组(p<0.05),Ⅱ组高于Ⅲ组(p>0.05),由此,Ⅱ组微生金肽素的添加量明显增加了吉戎兔的被毛密度,优于对照组、Ⅰ组和Ⅲ组。微生金肽素内的芽孢杆菌在獭兔小肠中下部生长,减少了小肠中的有机胺和硝态氮的含量,有利于诱导肠道胰蛋白酶的分泌,提高蛋白消化率,保证了营养供给和动物正常生长发育,促进了毛囊发育和皮毛生长,增强吉戎兔皮毛的光泽,改善毛皮品质[11],因此微生金肽素对吉戎兔的被毛密度有显著影响。
胸围和体长是影响皮张面积的主要指标,结果显示,微生金肽素对吉戎兔胸围、体长无显著影响(p>0.05),但略高于对照组。微生金肽素能提高吉戎兔肠道内饲料利用率和蛋白消化率,保证了营养供给和动物正常生长发育,促进动物体架的增大和改善皮张的大小,增强吉戎兔皮毛的光泽,改善毛皮品质,对吉戎兔的被毛密度有显著影响外,但对吉戎兔的皮张面积无显著影响。
微生金肽素改善动物肠道菌群结构,增强动物的免疫力,提高动物的健康指数,微生金肽素对吉戎兔健康指数的影响见表4。
表4 微生金肽素对吉戎兔健康指数的影响
添加微生金肽素的试验组吉戎兔粪便光滑细腻,无明显臭味,且没有饲料残留。试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的吉戎兔死亡率显著低于对照组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组吉戎兔死亡率显著低于Ⅰ组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组吉戎兔死亡率无显著差异(p>0.05);试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的吉戎兔成活率显著高于对照组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组吉戎兔成活率显著高于Ⅰ组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组吉戎兔成活率无显著差异(p>0.05)。Ⅰ组发病率13.33%虽低于对照组33.33%,Ⅰ组成活率93.33%高于对照组80.00%,但发病的实验兔有死亡。这主要是Ⅰ组的微生金肽素的添加量中活性较强的有益菌不能完全在动物肠道内占位并生长,抑制有害菌的侵入和繁殖,维持动物肠道菌群微生态平衡,提升实验兔的群体抗病免疫力,防止消化道疾病的发生,因而有实验兔发病后死亡。Ⅱ组发病率6.67%显著低于对照组33.33%,Ⅱ组成活率100.00%高于对照组80.00%,但发病的实验兔无死亡;Ⅲ组发病率0%显著低于对照组33.33%,Ⅲ组成活率100.00%高于对照组80.00%。这主要是Ⅱ组和Ⅲ组的微生金肽素的添加量中活性较强的有益菌在动物肠道内占位并迅速生长,消耗大量的氧,造成肠道内厌氧环境,产生某些抗菌物质,抑制了有害菌的侵入和繁殖,促进有益菌的生长,维持动物肠道菌群微生态平衡[12]。同时,微生金肽素与肠道内有益菌群可竞争性抑制病原菌附着于肠壁上,并在消化道内形成致密的膜菌群,防止病原菌吸附在肠壁上,促使其随粪便排出体外,提升了动物群体抗病免疫力,防止消化道疾病的发生,减少疫病对动物的危害,从而降低了动物的发病率和死亡率[13]。从微生金肽素对实验兔的发病率和成活率影响结果来看,以及添加微生金肽素的成本考虑,Ⅱ组微生金肽素的添加剂量可满足实验动物的需要。
微生金肽素改善动物肠道菌群结构,增强动物的免疫力,提高动物的血液生化指标,微生金肽素对吉戎兔血液生化指标的影响见表5。
表5 微生金肽素对吉戎兔血液生化指标的影响
结果表明,试验Ⅰ组溶菌酶活性低于对照组(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组溶菌酶活性高于对照组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组间溶菌酶活性差异不显著(p>0.05);试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的SOD 低于对照组(p>0.05);试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的C3 均高于对照组,Ⅰ组和对照组间差异不显著(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的C3 均高于对照组和Ⅰ组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组间差异不显著(p>0.05);试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的C4 均高于对照组,Ⅰ组和对照组间差异不显著(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的C4 均高于对照组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的C4均高于Ⅰ组(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组间差异不显著(p>0.05);试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的IgA 均高于对照组(p<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组间的IgA 差异不显著(p>0.05);试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的IgG均高于对照组(p>0.05),Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组与对照组间的IgG 差异不显著(p>0.05);试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的IgM 均高于对照组,Ⅰ组和对照组间差异不显著(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的IgM 均高于对照组(p<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的IgM 均高于Ⅰ组(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组间差异不显著(p>0.05)。微生金肽素中活性较强的有益菌在动物肠道内占位并生长,促进肠道内的有益菌增殖,抑制了有害菌的侵入和繁殖,维持动物肠道菌群微生态平衡,刺激动物主动免疫系统的较早建立,增强动物防病抗病免疫力[14]。血清中免疫球蛋白IgG 指标升高激活机体防御系统中动物体液免疫应答,发挥免疫功能;参与机体免疫防御系统的防御反应及免疫调节的补体,补体C3 通过激活补体,补体C4 通过活化补体来发挥其生物功能,血清中补体C3 和C4 的水平升高提高了机体免疫力[15]。肠道黏膜免疫指标分泌型免疫球蛋白A(sIgA),有益菌在肠道中发挥了免疫佐剂作用,提高免疫识别力,同时活化肠系膜淋巴结、黏膜内和黏膜固有层等肠道相关淋巴组织,使sIgA 抗体分泌增多,防止消化道疾病发生,减少疫病对动物的危害[16]。因此微生金肽素对维护动物健康及血液生化指标的影响效果明显。
通过微生金肽素饲喂试验研究,微生金肽素可提高獭兔日增重,增加被毛密度与皮张面积,改善被毛品质。活性较强的有益菌在獭兔肠道内占位并生长,抑制了有害菌的侵入和繁殖,促进肠道健康,提高免疫力。有益微生物在獭兔肠道和饲料中生长繁殖,代谢产生的维生素和酶等生物活性物质,增强了消化系统对营养物质的吸收和消化。其中,光合细菌能进行糖和淀粉的合成,乳酸菌将糖和淀粉生成有机酸并分解粗纤维,提高了饲料利用率;芽孢杆菌在獭兔小肠中下部生长,减少了小肠中的有机胺和硝态氮的含量,诱导肠道胰蛋白酶的分泌,提高蛋白消化率,促进动物体架的增大和皮张面积的改善,增强獭兔毛皮的光泽,改善毛皮品质。
4.1 微生金肽素能提高吉戎兔饲料的利用率,促进吉戎兔生长,但增重效果不显著。
4.2 微生金肽素能增强吉戎兔皮毛光泽和被毛密度,改善毛皮品质,但皮张面积无显著差异。
4.3 微生金肽素能维持动物肠道菌群微生态平衡,增强动物免疫力,降低了动物发病率和病死率,对动物血液生化指标有显著影响。
4.4 微生金肽素的适宜添加量为1.0‰。