探究不同免疫检验法对乙肝病毒感染血清标志物检验的效果

郜燕，栾和伟，田园，曹霞

江苏省句容市人民医院检验科，江苏句容 212400

乙型肝炎病毒是嗜肝脱氧核糖核酸（deoxyribo⁃nucleic acid, DNA）病毒组成员之一，简称乙肝病毒，主要传播途为乙肝患者及乙肝病毒携带者的血液传播，可导致肝炎、肝硬化甚至肝癌等严重肝病，威胁患者生命安全[1]。乙肝患者多表现出肝区疼痛、腹胀、厌食及乏力等症状，伴随疾病进一步发展，可出现肝功能异常、脾大等症状[2-4]。既往研究发现，人体免疫系统可与乙肝病毒产生特异性免疫反应，由此，临床可通过检验乙肝病毒感染患者血清标志物，为疾病早期诊治提供参考依据[5]。血清标志物检测常用免疫检验法，包括酶联免疫吸附法、化学发光法等，相比较而言，酶联免疫吸附法虽然可测定血清标志物水平，但无法评估病情，且极易受到客观因素等影响导致检测出现误差，而化学发光法可开展定量分析，具有较高灵敏度[6]。本文选取江苏省句容市人民医院于2020年3月—2022年4月收治的207例乙肝病毒感染患者为研究对象，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院收治的207例乙肝病毒感染者为研究对象，入组患者有男113例、女94例，年龄20~80岁，平均（42.29±1.44）岁。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者均知情同意。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①符合《乙肝病毒携带者就诊指南》中诊断标准，经实验室诊断确诊者；②年龄>18岁；③病历等资料完整。

排除标准：①合并精神或血液系统疾病者；②合并恶性肿瘤或其他传染病者；③其他类型肝炎或肝病者。

1.3 方法

207例感染者均采集5 mL空腹静脉血，经离心处理（转速3 000 r/min，时间10 min）后取血清保存于温度为-20℃环境中待检；对血清标志物检验采用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosor⁃bent assay, ELISA）、化学发光法。

化学发光法：仪器选用雅培化学发光分析仪，配备雅培公司原装进口试剂测定血液样本。酶联免疫吸附法：仪器选用TECAN酶免仪，配备北京万泰生物有限公司试剂对血液样本进行检验。检验指标包括乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）、乙肝表面抗体（hepatitis B surface antibody,HBsAb）、乙肝e抗原（hepatitis eantigen, HBeAg）、乙肝e抗体（hepatitis B eantibody, HBeAb）及乙肝核心抗体（hepatitis B core antibody,HBcAb）。

1.4 观察指标

对比不同免疫检验法对血清标志物检验阳性率，分析不同免疫检验法对乙肝病毒感染诊断准确度、误诊率及漏诊率，并对比不同免疫检验法的检验成本。

阳性标准。①化学发光法：定量测定HBsAg及HBsAb，若HBsAb水平>10 IU/mL即阳性，HBsAg水平>0.05 IU/mL即阳性；以标本吸光度值与临界值的比值（S/CO）确定HBeAg、HBeAb及HBcAb的阴阳性，其中HBeAg及HBcAb比值>1.0即阳性，HBeAb比值<1.0即阳性。②酶联免疫吸附法：测定各血清标志物的吸光度值，和cutoff值进行比较确定各项血清标志物的阴阳性，设定cutoff为0.105，吸光度值>0.105即为阳性，<0.105为阴性。

1.5 统计方法

采用SPSS 23.0统计学软件分析数据，符合正态分布的计量资料以（±s）表示，差异比较进行t检验，计数资料以频数及百分比表示，差异比较进行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同免疫检验法对血清标志物检验阳性率对比

化学发光法的 HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb阳性率高于酶联免疫吸附法，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1 不同免疫检验法对血清标志物检验阳性率比较[n(%)]

2.2 不同免疫检验法的检验成本对比

化学发光法的检验成本更高于酶联免疫吸附法，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 不同免疫检验法的检验成本比较[(±s)，元]

表2 不同免疫检验法的检验成本比较[(±s)，元]

方法化学发光法（n=207）酶联免疫吸附法（n=207）t值P值检验成本113.29±2.98 30.59±2.46 304.367<0.001

2.3 不同免疫检验法对乙肝病毒感染的诊断效能对比

化学发光法的误诊率、漏诊率均低于酶联免疫吸附法，差异有统计学意义（P<0.05）；化学发光法的诊断准确率高于酶联免疫吸附法，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

表3 不同免疫检验法对乙肝病毒感染的诊断效能比较[n(%)]

3 讨论

乙肝为一种乙肝病毒感染所致传染病，临床治疗难度较大。乙肝病毒体积极小，不仅可耐低温及紫外线，还具有耐热特点，一旦感染经潜伏期后可发展为乙型肝炎[7]。既往研究证实，乙肝病毒感染者发病后随着疾病进展可损伤机体肝脏，甚至导致肝硬化、肝癌等发生，病死率极高。血清标志物可准确反映机体免疫反应，而HBsAg、HB⁃sAb、HBeAg、HBeAb及 HBcAb作为乙肝病毒感染的血清标志物，不仅可反映机体感染情况，还可反映乙肝病毒水平[8]。在乙肝病毒中，HBsAg为其结构中的外壳蛋白成分，一旦感染乙肝病毒，可于1~2周内检测出高水平的HBsAg，且随着疾病进展该指标水平可进一步升高。HBeAb为机体受到HBeAg刺激后产生的一种抗体，可准确反映乙肝病毒复制情况，可用于评估疾病转归、治疗效果等。化学发光法、酶联免疫吸附法均为血清标志物常用免疫检验方法，其中化学发光法通过仪器对发光强度进行测定，以确定待测物含量，具有操作简便、灵敏度高等优势，而酶联免疫吸附法是通过底物与酶产生一定反应开展半定量检测，虽然检测成本较低，但灵敏度不高，临床应用具有一定局限性[9]。

本研究中入组者均采用化学发光法、酶联免疫吸附法测定血清标志物，结果显示，化学发光法的HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb检验阳性率高于酶联免疫吸附法，化学发光法的误诊率、漏诊率低于酶联免疫吸附法，化学发光法的诊断准确率（97.58%）高于酶联免疫吸附法（84.06%）（P<0.05）；提示化学发光法用于测定血清标志物，可降低漏诊、误诊率，提高检出阳性率。林丽[10]选取96例乙肝病毒感染患者开展研究，经化学发光法测定的诊断准确率为96.9%，高于酶联免疫吸附法检测88.50%（P<0.05），与本研究结果一致。分析原因，酶联免疫吸附法用于血清标志物检测，虽然检测成本较低，但检测步骤较多，且极易受到多种因素影响导致检测结果误差，影响其临床应用价值[11-13]。化学发光法是一种自动化操作过程，原理在于电磁铁对顺磁性微粒的控制作用，无需人工操作，有利于减少或避免因人为操作而导致的失误情况，此外，该种方法还可开展精确定量分析。化学发光法不仅操作简便，且操作时间短，不易受到其他因素影响，可于短时间内获得准确检测结果[14-17]。本研究还发现，与酶联免疫吸附法比较，化学发光法的检验成本更高（P<0.05），分析原因，可能是由于化学发光法的操作步骤多，在一定程度上增加成本[18]。

综上所述，化学发光法用于乙肝病毒感染血清标志物检验，可促进诊断准确率提高，为临床诊治提供可靠依据。