鸡新城疫的诊断与防控技术

谢 旖，宁静媛

（ 益阳职业技术学院，湖南 益阳 413055 ）

鸡新城疫又名亚洲鸡瘟、伪鸡瘟，是由新城疫病毒引起的一种急性、烈性传染病，发病率和病死率可高达90%[1]。鸡新城疫一年四季均可发生，春秋两季较多，在易感鸡群中传播迅速，传播途径主要是呼吸道，其次是消化道感染。鸡感染新城疫后24 h，口、鼻分泌物和粪便中开始排出病毒。自1927年，新城疫病毒首次在家禽中分离得到后一直是国内外学者研究和关注的重点内容。新城疫对家禽养殖的危害十分严重，《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020）》将其列为重点防范的一类动物疫病。因此，提升新城疫的检测技术和加大新城疫的防治力度尤为关键。本文介绍了鸡新城疫的流行特点、临床症状、病理变化及实验室检测方法，提出加强日常管理以及采取科学疫苗免疫、中西医结合防治等综合防治措施，以期为鸡新城疫的防控提供参考。

1 鸡新城疫流行特点

新城疫病毒属于副黏病毒科、正禽腮腺炎病毒属的禽副黏病毒Ⅰ型（APMV-1），病毒粒子呈圆形，核衣壳呈螺旋对称，大小为120～300 nm，多数在180 nm 左右，基因组为不分节段的单股负链RNA[1]。新城疫病毒基因总长度约为15 kb，由可编码核衣壳蛋白、血凝素-神经氨酸酶蛋白、基质蛋白、融合蛋白、磷蛋白、大分子蛋白的6个基因组组成[2]。新城疫因致病毒株不同，所引起的症状和病变等也存在很大差异，目前新城疫流行株优势基因型大部分是Ⅶ型病毒[3]。

近年来，养鸡场已经开始重视鸡新城疫的预防措施，也加大了鸡新城疫疫苗在鸡群中的普及率，鸡体内新城疫抗体水平有所加强[4]。对武汉市部分鸡场进行新城疫定点流行病学调查，检测新城疫4个季度免疫抗体水平，免疫抗体合格率在76.4%～98.8%，达到农业农村部规定的免疫抗体合格率70%的标准[5]。但也有个别鸡场因常用疫苗与基因Ⅶ型新城疫病毒基因型和抗原型不匹配，导致其清除病毒的能力弱，鸡群新城疫抗体水平不高且不均匀，免疫效果差，免疫后受强毒感染，鸡群仍然可能会发生非典型性新城疫[6-7]。鸡非典型新城疫无太大的季节性，一年四季均可病发，发病鸡与带毒鸡是传染源。由北京密云地区新城疫流行病学调查结果可知，夏季发病相对较多，发病鸡群多数为免疫鸡群，病情比较温和[8]。40～70 d鸡龄发病率最高，成年鸡在进行疫苗免疫后的4～15 d 易感，低于一定抗体效价的成年鸡群最容易染病；产蛋鸡大多在产蛋前后感染，特别是产蛋高峰期之前易感。

2 鸡新城疫临床症状

鸡新城疫的临床症状差异较大，严重程度主要取决于感染毒株的毒力、免疫状态、感染途径、品种日龄、其他病原混合感染情况及环境因素等。典型的新城疫根据临床表现不同可分为嗜神经速发型、嗜内脏速发型、中发型、缓发型、无症状肠道型。

非典型新城疫以低发病率、低死亡率、高淘汰率为特征，同时存在持续感染、隐形感染、免疫耐受等现象，发病率和死亡率通常在10%～35%之间，但因为其病程延续时间较长，经常与一些呼吸系统疾病交叉感染。鸡群表现食欲不振、精神萎靡，呼吸不畅，声音异常，有些患病鸡伴随神经性症状，粪便绿色或者黄色，产蛋数量和质量下降明显。由于非典型鸡新城疫患病鸡不常表现出鸡新城疫感染的典型症状，易被误认为是温和型禽流感，因而导致养鸡场不能及时采取措施进行补救，对养鸡场造成了严重的经济损失[7]。

3 鸡新城疫病理变化

剖检典型新城疫的患病鸡可见全身黏膜和浆膜出血，以消化道和呼吸道最为严重；腺胃、盲肠扁桃体出血水肿，十二指肠和直肠黏膜出血，脑膜充血和出血，气管黏膜充血、出血。

非典型新城疫的病理变化以腺胃乳头有少数出血点，直肠黏膜和盲肠扁桃体出血为主。对病死鸡进行解剖可更直观地看到病理变化比较轻微，气管和咽喉处有充血和水肿等现象，气管壁较为脆弱，气囊混沌；脑膜出血和充血，腺胃变化不明显，乳头有小范围出血点；扁桃体膨胀充血，肌胃角质层下有出血斑，输卵管有发炎、红肿、松弛等现象[7]。

4 实验室检测

随着科技不断进步，关于新城疫的实验室诊断技术也日趋精准高效，血清学检测方法主要有胶体金免疫层析技术、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验、免疫组化技术、免疫荧光技术及血凝和血凝抑制试验，分子生物学检测主要有逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光RT-PCR、环介导等温核酸扩增技术、微阵列杂交技术、高通量测序技术等[9-14]。

（1）病毒分离与鉴定。新城疫病毒的分离鉴定包括鸡胚接种培养与细胞接种培养，但该方法对实验室条件提出了一定要求，操作烦琐，耗时较长，适用于有科研条件的科研院所，不适于养殖场的快速检测。

（2）血凝和血凝抑制试验。新城疫病毒的血凝素可以使鸡红细胞发生凝集，而具有新城疫特异性抗体的血清可以抑制新城疫病毒凝集红细胞。血凝试验和血凝抑制试验是目前基础实验室和养殖场用于检测新城疫抗体水平最常见的方法。由于频繁采血会对鸡产生应激反应，也有研究表明，可采用卵黄抗体代替血清抗体检测[15]。

（3）RT-PCR。单独新城疫RT-PCR 检测和多重RTPCR 检测均可快速、灵敏、准确、特异性地检测新城疫病毒，针对新城疫病毒F基因设计引物[14]，对于病毒含量较低的样品不适宜选择RT-PCR方法。

（4）实时荧光RT-PCR。其原理是荧光探针与目标片段结合，从而根据荧光信号强度的变化给目标产物定量，《新城疫诊断技术》（GB/T 16550—2020）根据我国流行的所有基因型新城疫强毒F基因序列设计了引物和探针[14]。

（5）环介导等温核酸扩增技术。该方法由Pham 等在2005年建立，主要针对新城疫靶基因的6个区间进行核酸扩增，特异性强，可实现对新城疫进行准确快速的检测。

（6）微阵列杂交技术。该技术是生物芯片的一种，如鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒的基因芯片和试剂盒可以准确、有效地检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

（7）高通量测序技术。该技术能够一次并行对大量核酸分子进行平行序列测定，表达量极少的转录本均能够被精准地定量。高通量测序技术在未来可能成为新城疫检测的常规手段。

5 防控措施

5.1 加强饲养管理

目前为止尚无针对治疗新城疫的有效药物，日常饲养中保证鸡群各阶段的营养需求，保证饲料饮水安全，严格控制饲养密度，做好温湿度、通风等环境因素控制，减少环境应激，降低呼吸道疾病并发新城疫的可能性[16-17]。建立养殖场生物安全体系，实行全进全出，对鸡舍定期消毒，可交替使用聚维酮碘、葵甲溴铵溶液、新洁尔灭、烧碱等消毒剂，如空栏期可使用2%烧碱水溶液或0.2%次氯酸钠溶液喷洒消毒对鸡舍消毒，用0.2%次氯酸钠溶液消毒料线和水线，车辆、用具进场前进行严格消毒处理[18]。建立鸡新城疫预警、诊断和防治信息化体系，当发现鸡群内出现病例时，可及时采取紧急接种措施，同时做好病鸡淘汰和死鸡无害化处理[19]。

5.2 科学疫苗免疫

我国对新城疫实施全面免疫政策，要达到科学的免疫效果，需根据本场的实际情况选择疫苗种类，优化免疫程序，制定合理免疫方案[20]。新城疫疫苗目前主要有活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗和基因疫苗，同时还有新流二联苗、新支流三联苗、新城疫基因Ⅶ型多联灭活疫苗等联苗[7,21-23]。A-NDV-Ⅶ和A-NDV-LX/I4 分别是我国针对新城疫基因Ⅶ型的灭活疫苗株和弱毒活疫苗株，解决了原有疫苗株与流行株不匹配的问题[6]。

我国农业农村部制定的免疫方案是商品肉鸡在7～10 日龄进行初免，2 周后二免；种鸡、商品蛋鸡在3～7 日龄初免，10～14日龄二免，12周、17～18周强化免疫，开产后根据免疫抗体水平进行补免[24]。针对基因Ⅶ型新城疫的预防，目前国外主流使用种鸡和蛋鸡2+1 免疫程序，即分别在4周龄、8周龄使用基因Ⅶ型活疫苗气雾免疫，16周龄用基因Ⅶ型灭活疫苗进行免疫[6]。有文献指出，在体内母源抗体接近消失或刚消失时进行首次免疫，可以取得良好的效果。因此，在对雏鸡进行初免前，大型鸡场以抽样率不低于0.1%，小型鸡场抽样率不低于2%的抽样标准，对出壳后1 d的雏鸡采血检测HI效价，再根据公式确定雏鸡初次免疫的日龄。土鸡和仿土鸡品种每次免疫间隔25～30 d，笼养鸡每次免疫间隔40 d。湖南某蛋鸡场一般在18 周龄称重，在20周、30周、36周和43周分别抽血检测以密切关注新城疫的免疫情况，免疫抗体滴度大于70%，抗体效价在5 log2及以上，表明群体免疫合格；若抗体滴度下降或无效，应及时进行二次免疫接种[25]。

5.3 中西医防治

全场鸡群紧急免疫新城疫Ⅳ系疫苗4 羽份，发病鸡用高免血清和卵黄抗体新城疫核酸制剂和白细胞介素-2（IL-2）进行治疗，同时在饮水中添加多维，提高机体免疫力[26]。若出现新城疫和大肠杆菌混合感染，饮水中还需添加抗菌药物如头孢噻肟钠、氟苯尼考，头孢噻肟钠按5 g/50 kg 的比例添加，每日2 次；70%水溶性氟苯尼考粉100 g/500 kg，每日1 次，连用3 d；或采用磺胺二甲嘧啶混合连用3 d[27]。对还未发病的鸡群可用抗菌药物和中药组方，如环丙沙星、恩诺沙星等进行预防。

中药防治畜禽疾病在长期的临床实践中显示了天然、低毒、刺激小、残留少等天然优势。中药通过调节免疫系统发挥免疫功能，进而提升鸡的免疫功能与生长能力，加强疫苗对鸡新城疫的预防效果，最终起到预防鸡新城疫的作用。目前中药应用于防治新城疫的研究方向主要集中于提取中药有效成分作为疫苗免疫佐剂，增强鸡新城疫疫苗的免疫效果[28]。国内外研究结果表明，刺五加、黄芪等多种中药提取物及其化学成分和5%的核桃青皮均可加强疫苗免疫效果，达到显著提升新城疫抗体水平的目的[3]。中药煎剂如黄芪、绞股蓝、蒲公英、苦参、秦皮作为组方研制的口服液，以及华荠苧、珍珠草两味中药配成中药口服液，或以板蓝根、鱼腥草、大青叶、百部、虎杖等几类中草药根据一定配比制成中药口服液，均可实现防治鸡新城疫的目的。复方多糖如蝉花虫草粗多糖是主要源自植物的天然有效成分，可有效增加鸡新城疫抗体含量，提升鸡血清免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）的含量，促进鸡T淋巴细胞转化，持续作用时间长，效果确切，在养殖业发展中具有良好前景[28-30]。此外，微生态制剂如热灭活草分枝杆菌科作为口服非特异性免疫调节剂也可增强新城疫疫苗的免疫作用[31]。

6 结论

目前，高发病率、高死亡率的鸡新城疫已鲜有报道，但仍然存在由于疫苗使用不当、免疫程序不合理等问题导致非典型性新城疫发生。养殖人员应保证禽养殖场内环境卫生，坚持科学饲喂，建立生物安全体系，及时监测本场鸡群免疫情况，使鸡群始终处于较好的免疫水平，同时充分了解鸡新城疫的病原特点、临床症状和病理特点，熟悉实验室检测流程，能够对疫情进行及时的早期诊断，做到有效防控。