衡水地区宫颈病变筛查人群HPV 感染基因型、阴道清洁度与宫颈病变程度的关系

吕春亮，夏金多，闫萍，王娓娓，王丽丽，康文艳，于晨芳

1 衡水市第四人民医院妇科，河北衡水 053000；2 衡水市第四人民医院手术科；3 衡水市第四人民医院医务处

人乳头瘤病毒（HPV）为宫颈癌发生的常见危险因素，长期持续高危HPV 感染可诱发癌前病变、宫颈癌等疾病。然而，HPV 基因型多达上百种，其致病力及致癌危险性存在一定差异［1］。如何评估不同类型HPV 感染对不同程度宫颈病变的影响仍然是临床研究的热点问题。相关研究指出，阴道微生态的失衡与HPV 感染密切相关［2］，不同人群及地域中HPV 分型存在一定的差异［3］，了解不同地域感染人群HPV 分型对拟定当地宫颈癌防治策略有重要意义。为此，本文对衡水地区宫颈病变筛查人群HPV感染基因型、阴道清洁度、宫颈病变程度的相关性进行了研究。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019 年1 月—2020 年8 月接受宫颈病变筛查人群500 例。纳入标准：①均为衡水地区妇女；②年龄34～65岁；③均有性生活史。排除标准：①既往有宫颈手术者；②哺乳期或妊娠期妇女；③存在认知障碍或精神疾病无法沟通者。本研究获得衡水市第四人民医院医学伦理委员会批准（2019014062Z），接受宫颈病变筛查人群对该研究内容知情同意。

1.2 宫颈HPV 检测及分型 检测前擦拭接受筛查者宫颈表面的分泌物，随后将HPV 专用宫颈刷放置在宫颈口，顺时针转动宫颈刷4～5 圈。随后将宫颈刷缓慢取出，于管口位置将多余的刷柄折断，将刷头放置在样本管中（装有细胞保存液），旋紧管盖，并做好标记。通过PCR-反向点杂交法（PCR-RDB）对宫颈HPV 感染情况进行检测，试剂盒购自北京义翘神州科技股份有限公司。除膜条含内照质控点（IC）呈现显色信号外，其余位点均没有显色出现，记为HPV 阴性；除IC 外，相应HPV 基因型位点出现显色信号，记为HPV 阳性［4］。通过基因芯片分型法对上述HPV 阳性者进行HPV 基因分型，包括9 种低危型HPV（HPV6、11、42、43、44、81、53、73、82）和14 种高危型HPV（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68）。

1.3 宫颈细胞TBS 分级 采用液基薄层细胞学方法检查宫颈细胞并进行TBS 分级，包括无上皮内病变和恶性病变（NILM）、上皮细胞异常。上皮细胞异常又分为无明确诊断意义的非典型鳞状细胞（ASCUS）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL）、高级别鳞状上皮内病变（HSIL）、鳞状细胞癌（SCC）。将NILM记为宫颈正常，将ASCUS、 LSIL、 HSIL 及SCC 记为宫颈病变。

1.4 阴道清洁度的检测 取膀胱截石位，于阴道上1/3 侧壁位置采用干棉签刮取分泌物并均匀涂抹在清洁载玻片上，加生理盐水1 滴，涂片后高倍镜观察。根据所见上皮细胞、白细胞（或脓细胞）、阴道杆菌与杂菌的数量进行判断，并划分清洁度。清洁度Ⅰ～Ⅱ度为正常，Ⅲ～Ⅳ度为异常。Ⅰ度：镜下以阴道杆菌为主，并可见大量上皮细胞；Ⅱ度：有部分阴道杆菌，上皮细胞亦可见，也有部分脓细胞和杂菌；Ⅲ度：只见少量阴道杆菌和上皮细胞，但有大量脓细胞和其他杂菌；Ⅳ度：镜下无阴道杆菌，几乎全是脓细胞和大量杂菌。

1.5 统计学方法 采用SPSS20.0 统计软件。计数资料采用例数或百分比表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 宫颈HPV 阳性感染及基因型 500 例接受宫颈病变筛查人群中，HPV 阳性47 例，HPV 阳性感染率 为9.40%（47/500），其 中HPV 单 一 感 染 占74.47%（35/47），多重感染占25.53%（12/47）。47例HPV 阳性者中，高危基因型感染42 例，前4 种HPV52、HPV58、HPV16、HPV18 感染分别为10 例（占21.28%）、6 例（占12.77%）、5 例（占10.64%）、4例（占8.51%），其余10种合计为17例（占36.16%）；低危基因型感染5 例，分别为HPV6、HPV11 感染3例（占6.38%）、2例（占4.26%）。

2.2 宫颈细胞TBS 分级情况 500 例接受宫颈筛查人群中，NILM 466例，宫颈病变34例（占6.80%），其中ASCUS 14例、LSIL 12例、HSIL 6例、SCC2 例。

2.3 宫颈细胞TBS 分级与高危HPV 基因型感染的关系 500 例接受宫颈筛查人群中，发现高危HPV基因型感染42 例，其中宫颈细胞TBS 分级NILM 19例、ASCUS 7 例、LSIL 9 例、HSIL 5 例、SCC 2 例，NILM、ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 人群高危HPV 基因型感染率分别为4.08%（19/466）、50.00%（7/14）、75.00%（9/12）、83.33%（5/6）、100.00%（2/2），随着TBS 分级升高，高危HPV 感染率呈上升趋势，NILM人群高危HPV 基因型感染率低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC，差异有统计学意义（P 均＜0.05），ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 人群高危HPV 基因型感染率比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。

2.4 阴道清洁度与宫颈HPV 感染基因型的关系 500 例接受宫颈筛查人群中，阴道清洁度Ⅰ～Ⅱ度463 例，Ⅲ～Ⅳ度37 例。其中低危HPV 感染5 例，阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度1 例；高危HPV 感染42例，阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度36例。高危HPV感染者阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比（85.71%）高于低危HPV 感染者（20.00%），差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.5 阴道清洁度与宫颈细胞TBS 分级的关系 接受宫颈筛查人群阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度37 例中，宫颈细胞TBS 分级NILM 16 例、ASCUS 6 例、LSIL 8 例、HSIL 5 例、SCC 2 例，NILM、ASCUS、LSIL、HSIL、SCC人群阴道清洁度3～4 度占比分别为3.23%（16/466）、42.68%（6/14）、66.67%（8/12）、83.33%（5/6）、100.00%（2/2）。随着TBS 分级的升高，阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比呈上升趋势，NILM 人群阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC（P 均＜0.05），ASCUS、LSIL、HSIL、SCC阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。

3 讨论

宫颈癌是一种常见的女性恶性肿瘤，特别在发展中国家，发病率较高［5］。HPV 是一种具有双链闭合环状结构的DNA 病毒，根据其致病力、结构、功能不同将其分为低危型与高危型两种［6］。目前研究认为，HPV 是癌前病变及宫颈癌发生的危险因素，HPV 感染持续时间及基因型与宫颈癌的发生、发展以及预后密切相关。有研究指出，HPV 感染与阴道微生态改变显著相关［7］，地域不同、种族不同，HPV感染情况也存在显著差异［8］。因此，探讨衡水地区宫颈病变筛查患者HPV 感染基因型、阴道清洁度与宫颈病变程度的相关性具有重要意义。

本研究显示，500 例接受宫颈病变筛查人群中，HPV 阳性感染率为9.40%，此与李乐等［9］研究结果类似。本研究47例HPV阳性感染中，高危基因型前四位分别为HPV52、HPV58、HPV16、HPV18，此与佛山地区15 867例女性HPV 感染情况［10］类似，未显示出不同地域HPV感染率存在一定差异［11］。随着TBS分级的升高，本研究显示高危HPV 感染率呈上升趋势。既往研究同样证实，宫颈病变与高危型HPV 感染率密切相关［12］。在宫颈癌的发生发展过程中，多重感染的危险度明显高于HPV 单一感染，另外多重感染患者HPV 持续感染的发生风险相对较高［13］。张旭梅等［14］研究证实，阴道清洁度与pH值存在显著相关性。正常生育期的妇女的阴道清洁度多为Ⅰ～Ⅱ度，pH 值为3.8～4.4。阴道微生态的菌群构成与HPV 感染密切相关，乳酸杆菌在维持阴道正常酸性环境及清洁度方面起重要作用。当阴道微生态菌群失衡时，可导致阴道清洁度、pH 值异常，诱发宫颈部位感染HPV，从而引起宫颈病变［15］，以至于发展为宫颈癌［16-17］。本研究显示，高危HPV 感染者阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比显著高于低危HPV 感染者，且随着TBS分级的升高，阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比呈上升趋势，提示阴道清洁度与HPV 致病性及宫颈细胞TBS 分级密切相关，阴道清洁度分级较高人群更易导致高危HPV 感染及宫颈病变。但本研究中，NILM 人群高危HPV 基因型感染率低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC，NILM 人群阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比低于ASCUS、LSIL、HSIL、SCC ，但ASCUS、LSIL、HSIL、SCC 人群阴道清洁度Ⅲ～Ⅳ度占比、高危HPV感染率比较差异无统计学意义，可能与本研究选取样本较小有关。因此，宫颈病变筛查人群不同宫颈病变程度与HPV 感染基因型、阴道清洁度的相关性仍需要扩大样本量继续研究。