仔猪猪流行性腹泻病毒与大肠杆菌混合感染的诊治

陈亮，张蕾，沈思思，兰世捷，苗艳，冯万宇，李丹，钟鹏，刘博超，吴宪，于辰龙

（黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院 黑龙江齐齐哈尔 161005)

引起仔猪腹泻的传染性因素有很多，主要分为病毒性病原和细菌性病原两类。常见的病毒性病原主要包括猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PRoV）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病毒（PRV）等，尤其肠道病毒感染仔猪后，临床症状表现相似、病理变化差别不大，容易引起误诊，耽误疾病的及时防治[1]。在这些肠道病毒中，PEDV 对哺乳仔猪的危害最重，发病率可达100%，病死率30%～80%[2]。患病猪是PEDV 的主要传染源，此外，携带PEDV 的野猪是病毒的储存宿主，对该病的流行和传播具有重要作用[3]。2010 年起，我国的许多猪场大规模暴发PED，初生仔猪死亡率达90%以上[4]，原来的免疫方式和疫苗不能控制PED 发生，原因在于PEDV 发生了重要变异[5]。2013 年5 月，美国首次发现PED，传播力强，致使美国31 个州的商品猪存栏量在18 个月内损失10%[6]。

细菌性病原主要为大肠杆菌（E.coli），随着养猪业规模迅速扩大，仔猪黄痢和仔猪白痢在临床上最常发生，其发病率和死亡率在仔猪疾病中占据首位[7]，极大阻碍了养猪业的健康发展[8]。由于E.coli 血清型复杂，易产生耐药菌株，如何有效地防治该病正面临着巨大的挑战[9]。

PEDV 与E.coli 是目前引起仔猪腹泻最主要的病原，当仔猪同时感染PEDV 与E.coli 时，会给养猪场造成严重的经济损失。现将一例仔猪PEDV 与E.coli 混合感染的情况报道如下。

1 发病情况

齐齐哈尔市泰来县某一体化养猪场共养殖生猪1300 多头，2022 年4 月下旬，母猪与新生仔猪陆续发病，母猪主要表现为呕吐、喷射状水样腹泻，精神状态良好，食欲正常，持续1 周后康复；哺乳仔猪出生后第2 天，开始持续水样腹泻，后变为白色稀便，精神沉郁，食欲减退，3～5d 后陆续出现死亡。畜主前期用过头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星及补液盐等药物，效果不佳，至来就诊咨询时，仔猪已陆续死亡25 头。

2 剖检变化

对刚死亡的2 头小猪进行剖检，肝脏局部坏死（见图1）；肾脏有密密麻麻点状出血（见图2）；脾脏边缘出血、梗死（见图3）；小肠壁变薄，肠系膜出血，肠内充满黄色液体（见图4）。

3 实验室诊断

3.1 病毒检测

1）病料处理取脾脏、肾脏、脑、淋巴结等组织及肠内容物约2.0g，放于研磨中，剪碎，加入1mL 生理盐水研磨，磨碎后放入EP 管中，6000rpm 离心3min。

2）RNA 提取取上清液按照相关说明进行DNA 和RNA 的提取，获得模板DNA 和模板RNA。

3）PCR 扩增设计好程序，在PCR 扩增仪上进行TGEV、PEDV、PRoV、CSFV、PRRSV、PRV 的扩增。

4）电泳取PCR 或RT-PCR 产物点样于琼脂糖凝胶孔中，以110V电压于TAE 电泳缓冲液中进行16min 的电泳，在凝胶成像系统上观察结果。第2 泳道，在508bP 左右处出现亮带，说明猪流行性腹泻病毒阳性，其余病毒阴性（见图5）。

3.2 细菌检测

无菌取仔猪的肝脏、脾脏组织接种于琼脂培养基，通过麦康凯和伊红美蓝鉴别培养基、革兰氏染色及菌体形态，确定从仔猪体内分离的菌体为大肠杆菌。

4 药敏试验

将分离的菌均匀涂抹到营养琼脂平板上，选择6 种常用抗菌药（头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星、多西环素、磺胺间甲氧嘧啶、卡那霉素）均匀放置于平板上，培养过夜。结果显示，该菌对卡那霉素中度敏感，对其它抗生素不敏感。

5 防治

5.1 消毒与隔离

将病猪转至隔离间，猪舍全面消毒，可选择次氯酸成分的消毒水（84）或者是3%的氢氧化钠溶液，对分娩舍清扫干净，用百毒杀进行彻底消毒后将临产母猪赶入待分娩。禁止工作人员来回窜舍，防止交叉传播病菌。

5.2 加强饲养管理

不同阶段的猪要进行分开饲养，哺乳仔猪和妊娠母猪更要进行单独饲养，避免PEDV 的传播和交叉感染，饲喂全价料保障猪的生长发育，补给微量元素和维生素。

5.3 药物治疗

丁胺卡那霉素肌注，发病仔猪按10mg/kg 体重给药，1 次/d；白细胞干扰素2000～3000IU，皮下注射，1 次/d，同时口服补液盐，饲喂乳酸杆菌，连用5d；全群用活性炭拌料，每100kg 饲料加0.5kg 活性炭，连喂3～5d。选用以黄连、黄芩为主药的多种中药方剂水煎服用。

5.4 血清治疗

用康复仔猪的血清给发病仔猪注射，1mL/头，连用4d。

6 讨论

PEDV 主要侵染初生仔猪并致病，目前针对仔猪发病无有效的免疫治疗方法，必须依赖母猪初乳获得被动免疫进行疫病防控。因此，需要做好母猪的PED 免疫。灭活疫苗免疫母猪可以产生较好的免疫效果，但肌肉或后海穴免疫途径主要产生执行体液免疫功能的IgG，执行肠道黏膜保护的IgA 产生有限[10]，因此保护不了仔猪感染PEDV，经典毒株和经典毒株CV777 重组容易产生新型变异株[11]，且存在生物安全风险；弱毒疫苗相对于灭活苗具有接种量少、抗体产生速度快等优势，但筛选疫苗毒株的周期过长；基因工程疫苗中的重组病毒可能存在过度致弱的问题。因此需要对包括母猪孕期免疫机理和PEDV 免疫防控的诸多方面加强研究，为更加完善的PEDV 免疫防控提供理论技术支撑。

由于一些猪场滥用抗生素，使得大肠杆菌耐药质粒转移扩散产生了耐药性[12]，对抗生素的敏感性不断下降，因此，合理选用抗生素是非常有必要的；在饲料禁抗的大背景下，使用一些益生菌或中药添加剂可以降低仔猪腹泻发病率。饲料中添加益生菌可有效地调节肠道菌群[13]。有试验证明，在仔猪出生后未吮吸母乳前饲喂乳酸杆菌能大幅降低腹泻死亡率[14]。在生产中，可选择“小柴胡散+阿莫西林”和“双黄连+阿莫西林”来驱除寒湿和热湿。

7d 后，笔者电话回访，主诉猪群基本恢复正常。随着集约化养殖业的不断发展，仔猪腹泻现象时常发生，需要高度重视，及时查明病因，精准治疗，除上面提到的方案外，还可以采取返饲的方式，将妊娠母猪暴露于病毒污染的粪便或者肠内容物，激发母猪产生乳汁免疫力；给新生仔猪灌服抗PED 卵黄抗体等。预防仔猪腹泻，最重要的是要做好妊娠母猪的疫苗免疫，尤其是PEDV 和E.coli 疫苗的合理接种，它直接关系到初乳中的抗体水平，间接影响猪场的经济效益。■