APN、OX-LDL 和TBIL 水平与冠心病患者发生冠状动脉病变的关系研究

寇 天，郝振伟，陈 曦

（佳木斯市中医医院检验科1，神经内科2，黑龙江 佳木斯 154002）

冠心病（coronary heart disease）具有较高的发病率和致残率[1]。据相关数据统计[2]，该病发病率可达（293～594）/1 万人左右[2]。冠心病的发生会增加恶性心血管不良结局风险，甚至出现多器官功能衰竭，严重威胁患者的健康安全。研究显示[3]，冠心病病情进展与氧化应激损伤相关，可通过影响氧化应激性损伤，加剧冠状动脉血管内皮细胞的凋亡，进而促进冠心病病情的进展。脂联素（APN）是脂肪细胞相关因子，其表达浓度的上升能够保护血管内皮细胞，抑制血管内皮细胞的凋亡，降低血管平滑肌细胞的痉挛程度[4]。氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）的表达上升能够通过诱导脂质的沉积，促进泡沫细胞对于血管内皮细胞的损伤，进而促进粥样斑块的形成[5]。总胆红素（TBIL）是衰老红细胞释放的相关因子，近年来相关研究认为TBIL 能够保护心血管，降低氧化应激反应的激活程度[6]。为了揭示APN、OX-LDL 和TBIL 的表达与冠心病的病情关系，从而为临床上冠心病患者的病情评估提供参考，本次研究选取2017 年2 月-2018 年2 月在我院接受治疗的冠心病患者为研究对象，探讨APN、OX-LDL 和TBIL 的表达及其与冠心病患者的病情关系，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017 年2 月-2018 年2 月在佳木斯市中医医院接受治疗的60 例冠心病患者为研究对象，定义为冠心病组，同时选取同期在我院接受体检的60 例健康成年人作为对照组。冠心病组男32 例，女28 例；年龄52～78 岁，平均年龄（64.35±2.98）岁；对照组男30 例，女30 例；年龄55～76 岁，平均年龄（64.32±3.14）岁。根据冠状动脉病变支数，冠心病组患者又分为单支血管病变患者40 例，双支及以上血管病变患者20 例。本研究经医院伦理委员会通过，且患者均知情同意，并签署知情同意书。

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：①均为成年患者；②均经心脏超声或冠脉造影确诊为冠心病者[7]；③无其他系统严重疾病者[8]；④对照组均未体检健康成年者，无严重基础疾病。排除标准：①临床资料不全者；②合并肥胖症等影响血脂的原发性疾病者。

1.3 方法 患者入院后采集晨起空腹静脉血6 ml，分为2 个试管，第1 个试管，以1000 r/min 转速离心5 min，离心半径10 cm。离心后取上清液，采用CA-1600 全自动生化分析仪（北京生物科技有效公司）及配套试剂盒均由南京碧云天生物检测公司提供，检测TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平。HDL-C 和TC、TG 测定采用酶法，LDL-C 测定采用清除法，TBIL 采用重氮盐法检测，APN、OX-LDL 采用酶联免疫吸附法。应用科华ST-360 酶标仪（Abbott Laboratories 公司提供）进行检测。具体方法：取第2 个试管静脉血3 ml，加入APN、OX-LDL 单抗，标本和标准品中的APN、OX-LDL 会与单抗结合，PBS 液体洗涤5 min。按照1∶500 的比例加入羊标志的一抗5 ml，4 ℃放置过夜，PBS 缓冲液洗涤3 次，5 min/次，加入鼠来源的二抗（1∶1000）2 ml，室温放置2 h，PBS液体洗涤5 min。加入显色底物，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄，在每孔中迅速加入100 μl 终止液，终止反应，在反应终止的10 min 内，用450 nm 检测波长读值。

1.4 观察指标 比较两组血脂指标（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、APN、OX-LDL 和TBIL 水平，以及不同冠状动脉病变支数和不同狭窄程度患者患者以上各指标水平，并分析APN、OX-LDL 和TBIL 水平与冠心病患者血脂指标的相关性。根据动脉造影计算Gensini积分分为轻度狭窄：≤50%；中度狭窄：51%～75%；重度狭窄：76%～90%；极重度狭窄：91%～100%。

1.5 统计学处理 采用统计软件包SPSS 21.0 进行处理，用（）表示符合正态分布的计量资料，组间比较分析采用t检验；计数资料用[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验；冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL水平与血脂水平的相关性分析采用Pearson 相关分析，P＜0.05 说明差异有统计学意义。

2 结果

2.1 冠心病组和对照组血脂、APN、OX-LDL 和TBIL水平的比较 冠心病组TC、TG、LDL-C、OX-LDL 水平高于对照组，HDL-C、APN、TBIL 水平低于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 冠心病组和对照组APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较（n=60，）

表1 冠心病组和对照组APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较（n=60，）

2.2 不同冠状动脉病变支数患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较 双支及以上病变患者APN 和TBIL 水平低于单支病变患者，OX-LDL 水平高于单支病变患者（P＜0.05），见表2。

表2 不同冠状动脉病变支数患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较（）

表2 不同冠状动脉病变支数患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较（）

2.3 不同狭窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较 双支及以上病变患者APN 和TBIL 水平低于单支病变患者，OX-LDL 水平高于单支病变患者（P＜0.05）；91%～100%患者APN 和TBIL 水平均低于≤50%患者、51%～75%患者，OX-LDL 水平高于≤50%患者、51%～75%患者（P＜0.05），且APN 和TBIL水平随患者狭窄程度严重逐渐降低，OX-LDL 水平逐渐升高，见表3。

表3 不同狭窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较（）

表3 不同狭窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比较（）

注：与91%～100%患者比较，*P＜0.05

2.4 冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平与血脂水平的相关性 冠心病患者的APN、TBIL 水平与TC、TG、LDL-C 水平负相关，与HDL-C 正相关，OXLDL 水平与TC、TG、LDL-C 水平正相关，与HDL-C负相关（P＜0.05），见表4。

表4 冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL水平与血脂水平的相关性

3 讨论

基础性高血压、高血脂症或者体内过度激活的氧化应激性反应，均可促进冠状动脉粥样硬化，造成血管内皮细胞的损伤，进一步造成冠状动脉狭窄[9]。冠心病肺栓塞、脑损伤患者多器官功能衰竭的发生风险会显著提高，影响患者的预后效果[10]。目前临床缺乏对于冠心病患者病情评估的有效指标。虽然可通过冠状动脉介入造影评估冠心病的病情严重程度，但冠造影检查属于有创检查，且对于操纵者专业技术要求较高，在临床应用具有一定的局限性，难以普及。此外，造影检查费用较高，部分患者难以接受[11]。血清学指标检测在心血管疾病患者病情评估中具有重要的作用。APN 是脂肪细胞分泌的相关因子，其能够通过抑制脂肪酸的过度氧化，降低氧化自由基的激活程度，进而保护冠状动脉血管内皮细胞，降低血管粥样硬化性病变的发生风险[12]。APN 的表达上升还能够抑制血管内皮细胞的线粒体损伤，降低内皮细胞的凋亡程度[13]。OX-LDL 是心血管系统的危险性因子，其表达浓度的上升能够促进泡沫细胞的沉积，提高脂质在内皮下的富集，进而促进粥样斑块的形成和血管的狭窄[14]。研究显示[15]，OX-LDL 的表达上升还能够导致单核细胞和巨噬细胞富集程度的增加，进一步促进心血管系统的病情进展。TBIL 是反映胆红素代谢的相关指标，且近年来相关研究已证实，TBIL对降低心血管不良临床结局的发生风险具有一定的预测价值[16，17]。因此，研究冠心病患者机体APN、OXLDL 和TBIL 的表达情况，可一定程度提升冠心病患者的病情进展情况。但是目前，关于APN、OXLDL 和TBIL 水平与冠心病患者发生冠状动脉病变的关系方面的研究存在争议，无明确定论。

本研究结果显示，冠心病组患者的TC、TG、LDL-C、OX-LDL 水平高于对照组，HDL-C、APN、TBIL 水平低于对照组（P＜0.05），该结论表明冠心病患者中不仅存在明显的高血脂症，同时APN、TBIL的表达明显下降，而OX-LDL 的表达明显上升，进一步提示了APN、TBIL、OX-LDL 的异常表达与冠心病患者的病情关系。分析原因主要与相关细胞因子的下列病理性作用有关[18]：①APN 的表达下降，失去了其对于氧化应激性反应的稳定作用，导致还原性谷胱甘肽芳基转移酶的显著下降，降低了还原型化合物对于心血管的保护性作用；②TBIL 的下降影响到共轭双键及过氧化基团中和，进而促进相关游离自由基对于冠状动脉的损伤；③OX-LDL 对于心血管的损伤作用，主要由于其能够加剧心血管的粥样斑块的形成。宋莹等[19]研究也认为，在冠心病患者中，APN 的表达浓度可平均下降40%以上，与贾国伟等[20]的研究结果相似。同时在合并有急性冠脉综合症的患者中，APN 的表达浓度可进一步的下降。在探讨相关指标与冠心病患者血管病变数量的关系过程中发现，双支或者多支病变的患者APN、TBIL 明显下降，而OX-LDL 明显上升，提示了相关细胞因子与冠状动脉血管病变数量的关系，这主要由于APN、TBIL、OX-LDL 的表达波动，能够影响到冠状动脉血管分支的脂质沉积和斑块面积的扩大，进而促进血管病变数量的增加。在不同的血管狭窄程度的患者中，可以发现血管狭窄程度越高，APN、TBIL的表达浓度越低，而OX-LDL 的表达浓度越高，提示不同指标与血管狭窄程度的关系。对于介入手术困难或者无法开展的患者，可以选择检测APN、TBIL、OX-LDL 水平，进而评估血管的病变程度。最后，本次研究还探讨了APN、TBIL、OX-LDL 的表达与血脂的关系，发现相关指标与血脂水平密切相关，进一步提示了相关指标与冠心病患者综合性病情的关系。

综上所述，在冠心病患者中，APN、TBIL 的表达下降，而OX-LDL 的表达上升，同时相关指标的表达与冠心病患者的血管病变数量、血管狭窄程度或者血脂水平密切相关。本研究的局限性在于未能探讨APN、TBIL、OX-LDL 的表达与冠状动脉斑块特征的关系，有待进一步研究。