外周血淋巴细胞的VCS 参数与系统性红斑狼疮疾病活动性的相关性

马潇驰，张金彪（通信作者）

河北省沧州中西医结合医院实验诊断科 （河北沧州 061001）

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种临床常见的自身免疫性疾病。淋巴细胞参与的细胞免疫功能紊乱及细胞凋亡异常是SLE发病的重要原因，尤其是T 淋巴细胞凋亡增多，其产生的大量DNA、核小体等均可能成为自身抗原，刺激B 淋巴细胞活化[1]。在SLE 的发生、发展过程中常伴随着淋巴细胞数量、形态及内部结构的变化，原因可能与SLE 的疾病活动性相关[2]。血细胞分析仪的淋巴细胞VCS 参数[包括淋巴细胞体积（lymphocyte volume，LV）、淋巴细胞电导率（lymphocyte conductivity，LC）、淋巴细胞光散射性（lymphocyte scatter，LS）]能对各类淋巴细胞的形态变化进行充分的表达和描述[3]。本研究通过观察不同活动期SLE 患者及健康对照组的外周血淋巴细胞VCS 参数，旨在探讨不同疾病状态下的淋巴细胞形态及内部结构的变化情况，寻找对疾病诊断和活动性判断有价值的参数，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年1 月至2021 年3 月河北省沧州中西医结合医院风湿免疫科收治的134 例SLE 患者作为研究对象，根据系统性红斑狼疮疾病活动指数（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）评分将患者分为活动组（83 例，SLEDAI评 分≥10 分）和 缓 解 组（51 例，SLEDAI 评 分<10 分），另选取同期的健康体检者60 名作为对照组。活动组男16 例，女67 例；年龄21～68 岁，平均（36.53±13.56）岁；平均病程（7.23±3.78）年。缓解组男10 例，女41 例；年龄22～66 岁，平均（37.18±13.11）岁；平均病程（8.23±4.14）年。对照组男11名，女49 名；年龄 22～67 岁，平均（36.78±13.31）岁。3 组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准。

纳入标准：SLE 患者的临床资料完整，符合1997 年美国风湿病协会推荐的SLE 诊断标准[4]，自愿参加本研究且已签署知情同意书。排除标准：合并其他自身免疫性疾病和炎症疾病的患者；合并严重心血管疾病的患者；合并恶性肿瘤的患者；合并其他严重的原发性疾病的患者；近期有输血史的患者。

1.2 方法

采集3 组清晨空腹静脉血2 ml，采用EDTAK2 抗凝，利用Beckman-Coulter LH750 全自动血细胞分析仪检测淋巴细胞VCS 参数，记录LV、LC、LS 及各参数的平均分布宽度（standard deviation，SD），试剂为仪器原装配套试剂。

1.3 观察指标

比较3 组的LV、LC、LS 及各参数的SD。

1.4 统计学处理

采用SPSS 24.0 统计软件进行数据分析，计量资料以±s表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用LSD检验；相关性分析采用Pearson检验；绘制ROC 曲线，分析LV 诊断SLE 活动期的价值，并确定最佳截断值；P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组外周血淋巴细胞VCS 参数及各参数的SD 比较

活动组的LV 高于缓解组和对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；活动组的LC 低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；活动组的LVSD、LC-SD、LS-SD 和缓解组的LV-SD、LS-SD均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1 3组外周血淋巴细胞VCS 参数及各参数的SD 比较

2.2 外周血淋巴细胞VCS 参数与SLE 疾病活动性的相关性

Pearson检验结果显示，活动组的LV 与SLE疾病活动性成正相关（r=0.586，P<0.05），见图1；其余参数与SLE 疾病活动性均无相关性，见表2。

图1 活动组LV 与SLE 疾病活动性的相关性

表2 外周血淋巴细胞VCS 参数与SLEDAI 的相关性

2.3 LV 诊断活动期SLE 的ROC 分析

根据活动组和对照组的LV 数据绘制ROC 曲线。ROC 分析结果显示，LV 诊断活动期SLE 的曲线下面积为0.848（95%CI为0.780～0.915），最佳截断值为85.29 fl，此时约登指数为0.688，诊断灵敏度为77.1%，特异度为91.7%，见图2。

图2 LV 诊断活动期SLE 的ROC 曲线

3 讨论

VCS 技术是在白细胞检测通道，保持白细胞与体内相同的状态下，应用电阻抗原理对淋巴细胞VCS 参数进行检测。VCS 参数包括LV（反映细胞体积大小）、LC（反映细胞内部结构，如细胞核质比例、细胞内化学成分等）、LS（提供细胞形态及胞核结构等信息）[5]。淋巴细胞VCS 参数在细菌、病毒等感染性疾病中的应用已有广泛报道[6-7]。

SLE 是一种慢性迁延性、反复发作的自身免疫性疾病，疾病可分为活动期与缓解期。处于不同疾病时期的患者，其治疗方案的选择亦有差别，因而寻求与SLE 疾病活动性相关的指标尤为重要[8]。目前，SLE 疾病活动性的判断主要依据SLEDAI 评分[9]。SLEDAI 评分是将各系统的复杂表现及实验室检查结合起来，根据患者的病情逐条进行评分[10]，此方法受评估者主观因素的影响较大，且操作比较复杂，影响其推广应用。SLE 疾病的活动性与淋巴细胞大小、形态及内部结构的变化相关，这种变化比较微小，很难通过显微镜观察，但却可以通过VCS 参数发现，加之VCS 参数为定量检测参数，受人为因素影响小，结果更加准确，且参数的检测可通过全自动血细胞分析仪自动化进行，操作较为简单。

本研究结果显示，活动组的LV、LV-SD、LCSD、LS-SD 较高，而LC 较低，说明SLE 活动期患者淋巴细胞的体积大小、形态及细胞内部结构均发生了明显改变，原因可能与T 淋巴细胞凋亡增多及B 淋巴细胞异常活化有关。凋亡细胞主要表现为细胞形态改变，胞膜气泡化、细胞核固缩、染色体DNA 分解成有规律的片段；活化的B 淋巴细胞常表现为细胞体积增大，胞浆量增多，副染色质增多[11]，故反映细胞体积的LV 明显增大；细胞核固缩、胞浆量增多，故反映细胞核质比例的LC 明显降低。3个参数的离散程度均明显增大，说明SLE 活动期患者的细胞形态变化差异较大。此外，Pearson检验结果显示，活动组的LV 与SLE 疾病活动性成正相关（r=0.586，P<0.05）；ROC 分析结果显示，LV 诊断活动期SLE 的曲线下面积为0.848（95%CI为0.780～0.915），最佳截断值为85.29 fl，此时约登指数为0.688，诊断灵敏度为77.1%，特异度为91.7%，表明以85.29 fl 为临界值诊断活动期SLE 的价值最高。

综上所述，外周血淋巴细胞的VCS 参数可以反映SLE 患者体内淋巴细胞的形态及内部结构的变化，LV 与疾病活动性密切相关，对判断SLE 患者是否处于活动期具有较好的参考价值；加之VCS参数来源于血常规分析，具有客观、快速、结果准确等优点，对判断SLE 患者疾病活动性具有较好的应用前景。