三种常见猪肺炎支原体疫苗的免疫效果对比试验

胡 晓，韦学凤

（1.四川省内江市畜牧业发展中心，四川 内江 641007；2.西南大学动物科学学院，重庆 荣昌 402460）

猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引发的一种慢性肺炎，俗称喘气病［1］。疫苗免疫是猪支原体肺炎的主要防控手段之一，目前市场上的商品化疫苗主要有灭活苗和弱毒苗，但不同厂家疫苗免疫后的抗体水平及对仔猪生长性能的影响存在差异。为筛选出适合内江猪保种场的最佳猪肺炎支原体疫苗，笔者选用市场上最常见的三种猪肺炎支原体疫苗进行了比较试验。

1 材料与方法

1.1 试验动物 生长情况相当、刚出生的健康哺乳仔猪60头，由内江猪保种场提供。

1.2 疫苗 疫苗A（美国某动物保健品有限公司），批准文号：兽药生字（2014080071090），批号：20 170623；疫苗B（南京某生物科技有限公司），批准文号：兽药生字（2012）100991062，批号：20 180113；疫苗C（西班牙某生物药厂），进口号：（2015）外兽药证字28号，批号：17032509。以上三种疫苗均为市场所购。

1.3 主要试剂 猪肺炎支原体抗体检测试剂盒（批号：2017071120），购于上海酶联生物科技有限公司。

1.4 主要仪器 高速冷冻离心机，酶标仪，37 ℃恒温培养箱。

1.5 方法

1.5.1 试验分组 将试验仔猪随机分成三组，每组各20 头，7 日龄接种疫苗。A 组用疫苗A 免疫，B 组用疫苗B 免疫，C 组用疫苗C 免疫。免疫后所有试验仔猪按照内江猪保种场的饲养管理规程饲喂，仔猪于30 日龄断奶，60 日龄转入育肥舍。

1.5.2 生长性能观察 称取并记录各试验组仔猪的7日龄体重、30日龄体重、60日龄体重，统计并记录各组试验仔猪断奶后的饲料消耗、呼吸道发病率、死亡率等情况。

1.5.3 被检血清的采集 各组随机选择试验仔猪10头，分别在7、30、60日龄采血，分离血清，冷冻保存备用。

1.5.4 猪肺炎支原体ELISA抗体的检测

（1）样品准备：将待检血清从－20 ℃冰箱中拿出静置30 min，用试剂盒样本稀释液作5 倍稀释。对照血清不稀释。洗涤缓冲液准备：用蒸馏水作20倍稀释。

（2）操作步骤：严格按猪肺炎支原体抗体检测试剂盒说明书进行。

（3）结果判断：严格按猪肺炎支原体抗体检测试剂盒说明书进行。

1.5.5 统计学分析 应用SPSS 20.0 统计软件对试验数据进行分析。

2 试验结果

2.1 各组仔猪的生长性能 三组试验仔猪分别在7日龄、30日龄、60日龄进行空腹称重，统计仔猪的饲料消耗量、呼吸道发病率（表1）。7日龄和30 日龄时，三组仔猪的体重差异不显著（P＞0.05）；60日龄时，B组仔猪体重显著高于A组和C组（P＜0.05），A 组和C 组间的体重差异不显著（P＞0.05）。30～60 日龄时，B 组料肉比最低，呼吸道发病率最低，C组次之，A组最高。

表1 各组仔猪的生长性能统计 头、kg

2.2 免疫后各组仔猪的ELISA 抗体OD 值 7日龄时，A、B、C三组产生的抗体水平差异不显著（P＞0.05）；30 日龄时，A 组和C 组的抗体水平显著高于B 组（P＜0.05），A组和C组之间差异不显著（P＞0.05）；60 日龄时，C 组的抗体水平显著高于A 组（P＜0.05），A 组抗体水平显著高于B 组（P＜0.05），A 组和C 组的抗体水平极显著高于B组（P＜0.01）。详见表2。

表2 免疫后各组仔猪的抗体OD值

2.3 各组仔猪的ELISA 抗体阳性率 7 日龄时，A、B、C 三组的抗体阳性率均为0；30 日龄时，A、B、C 三组的抗体阳性率分别为80%、20%、90%；60 日龄时，A、B、C 三组的抗体阳性率分别为90%、20%、100%。详见表3。

表3 免疫后各组仔猪的抗体阳性率

3 讨论

3.1 抗体水平分析 目前，防治猪肺炎支原体的主要手段是接种疫苗，虽然不能净化猪场的猪肺炎支原体，但是一般情况下能使猪场的生产效能提高，呼吸道疾病发病率降低。但因不同厂家疫苗的菌株、佐剂和接种方式等不同，导致疫苗的免疫效果也不一样。为了筛选出适合内江猪保种场使用的性价比最高的猪肺炎支原体疫苗，本试验选用了市场上出售的三种猪肺炎支原体疫苗进行效果对比，其中A、C组为猪肺炎支原体灭活苗，B 组为猪肺炎支原体弱毒疫苗。结果在30日龄时，A组和C组的抗体水平差异不明显，但均显著高于B 组（P＜0.05）；60 日龄时，C 组的抗体水平显著高于A 组（P＜0.05），A 组和C 组的抗体水平极显著高于B组（P＜0.01），表明C组抗体水平最好，B 组抗体水平最差。陈财［2］用猪支原体肺炎活疫苗（168 株）和四种灭活苗免疫仔猪，结果灭活苗免疫组的抗体阳性率、抗体水平均高于弱毒苗免疫组。与本试验结果相符。A组和C组在60 日龄时抗体水平差异显著，可能与苗的质量、个体差异有关。B 组弱毒苗与A、C 组灭活疫苗的抗体水平差异极显著，究其原因可能是灭活苗通过肌肉注射产生的抗体主要为IgG，弱毒苗肺内注射产生的抗体主要为IgA，而血清中ELISA检测的抗体为IgG，故检测显示A、C 组的抗体水平显著高于B组。

3.2 生长性能分析 免疫后60 日龄观测到B 组增重显著高于A 组和C 组（P＜0.05），B 组的料肉比、呼吸道发病率均低于A组和C组，但A、C灭活疫苗组的抗体水平均高于B 弱毒疫苗组，表明免疫弱毒苗的仔猪在增重、料肉比、呼吸道发病率、肺部病变等方面优于灭活苗。从另一方面反映了抗体水平只能作为评价疫苗整体免疫效果的参考指标之一。由于弱毒苗的免疫为肺内注射，要求操作熟练，否则容易导致免疫失败，这加大了免疫注射的难度，因此，猪场应根据自身的专业素质水平和实际情况进行选择。

4 结论

本试验选用市售常见的三种猪肺炎支原体疫苗进行免疫效果对比，结果显示：30日龄时，A、C组ELISA抗体阳性率明显比B组高；60日龄时，C 组ELISA 抗体阳性率高于A 组，表明用C 厂家灭活疫苗免疫后的抗体水平最高。

在疫苗免疫后的30～60日龄，B组体重明显高于A、C两组，料肉比和呼吸道发病率也低于A、C 两组，表明用B 组弱毒疫苗免疫后仔猪的生长性能最好。