2020—2021年日喀则市羊痘的血清学调查分析

元振杰，马弘财，王冬经，旦增欧珠，加 央，曾江勇*

（ 1.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所，省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室，西藏 拉萨 850009 ； 2.白朗县农牧综合服务中心，西藏 日喀则 857300 ； 3.拉孜县农牧综合服务中心，西藏 日喀则 858100 ）

羊痘又称羊天花，是一种由羊痘病毒（Capripoxvirus）引起的急性、热性、接触性传染病[1-2]，主要特征是发热、鼻炎、结膜炎、过度流涎、皮肤黏膜发生丘疹和疱疹病变[3-4]，主要感染山羊、绵羊和牛，人也可感染此病毒。羊痘病毒可引起山羊痘、绵羊痘和牛结节性疹块病，上述疾病在血清性型上呈交叉反应，自然条件下不会发生交叉感染[5]。羊痘是最严重、危害最大的痘病[6]，可对养羊业造成巨大的经济损失[7]。2002年，羊痘病被世界动物卫生组织（OIE）列为须申报的动物疾病，我国将其列为一类动物疾病[8]。羊痘主要在非洲北部和中部以及中东地区的部分国家流行[9-10]，在印度、孟加拉国、尼泊尔、巴基斯坦、俄罗斯等国家也有流行[11-12]。羊痘在我国大部分省份均有发生，但其流行呈明显的地域性[9]，除上海、北京、辽宁等少数地区无疫情发生外，其他地区均有不同程度的流行[13]。日喀则市是西藏重要的养羊地区之一，是西藏“两羊”（日喀则市岗巴羊、霍尔巴羊）的主要产地，也是我国重要的牧区之一。为研究日喀则市羊痘的免疫情况和感染风险，本试验对日喀则5个县（区）的主要种羊场进行随机采样和抗体检测，评价羊痘的感染风险，为该地区羊痘的防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

试验使用的羊痘/牛结节病抗体检测试剂盒（Capripox/LSD Antibody ELISA Test Kit）购 自Biostone Animal Health LCC（批号：JS11849）。

1.2 血清样本

2020年10月和2021年4月，在日喀则市桑珠孜区、拉孜县、白朗县、萨嘎县、仲巴县的主要种羊场，以统计学的方法进行抽样，采集绵羊和山羊血清共1 472份。

1.3 检测方法及结果判定

按照羊痘/牛结节病抗体检测试剂盒说明书的操作方法对所有血清样品进行抗体检测。试验均在省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室中进行。

按照试剂盒说明书的判定标准进行结果判定。试验有效性：阴性对照OD值小于0.4，阳性对照OD值大于0.4。

计算样品PP值。样品的PP值小于40%时，结果阴性；样品PP值大于等于40%时，结果阳性。

1.4 数据统计与分析

采用R软件对检测结果进行羊种、年龄、性别进行统计分析，卡方检验进行差异显著分析。P<0.01表示差异极显著，P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

本研究共采集1 472份羊血清样本。通过实验室检测，检出抗体阳性420份，阳性率为28.53%。

2.1 不同品种羊的羊痘血清抗体检测结果（见表1）

表1 不同品种羊的羊痘血清抗体检测结果Tab.1 Detection results of serum antibodies to sheep pox in different breeds of sheep

由表1可知，山羊阳性率为54.15%（95%CI：47.1%~61.1%）,绵羊阳性率为24.39%（95%CI：22.0%~26.9%），两种羊的阳性率在统计学中差异极显著（P<0.01，OR=3.66，95%CI：2.70~4.96）。结果表明，与山羊相比，绵羊的抗体阳性率更低，疫苗免疫效果更差，感染风险更高。

2.2 不同年龄羊的羊痘血清抗体检测结果（见表2）

表2 不同年龄羊的羊痘血清抗体检测结果Tab.2 Detection results of serum antibodies to sheep pox in different age of sheep

由表2可知，2岁及以下的阳性率为21.21%（95%CI：17.7%~25.1%），3~6岁阳性率为33.09%（95%CI：29.9%~36.4%），6岁及以上的阳性率为28.14%（95%CI：21.5%~35.6%），不同的年龄其阳性率统计学差异极显著（P<0.01，OR=4.05，95%CI：2.07~7.94）。结果表明，与3~6岁的羊相比，其他年龄阶段的羊抗体阳性率更低，免疫效果更差，感染风险更高。

2.3 不同性别羊的羊痘血清抗体检测结果（见表3）

表3 不同性别羊的羊痘血清抗体检测结果Tab.3 Detection results of serum antibodies to sheep pox in different genders of sheep

由表3可知，母羊阳性率为29.53%（95%CI：26.2%~33.0%），公羊的阳性率为27.55%（95%CI：24.4%~30.9%），性别之间阳性率在统计学差异不显著（P>0.05，OR=1.10，95%CI：0.88~1.38）。结果表明，与母羊相比，公羊的抗体阳性率及疫苗免疫效果差异不显著，感染风险均较高。

3 讨论

日喀则市是西藏养殖羊的重要区域之一，而养羊也是西藏农牧民重要的收入来源之一。羊痘不仅影响羊肉、羊毛、羊绒等产品的产量和质量，还可导致羔羊死亡和母羊流产[6,14]，是严重影响我区养羊业发展的重要疫病之一。据调查，羊痘为西藏自治区绵羊和山羊强制性免疫的动物疫病之一，每年接种免疫一次。日喀则市采用羊痘灭活疫苗进行接种免疫，一般免疫时间为每年6~7月。本研究采样时间为2020年10月和2021年4月，根据检测结果，抗体总体阳性率为28.53%，感染风险较高。马晓涓[15]曾对青海省海北州免疫羊群进行了抗体检测，结果显示，海北四县的抗体阳性率分别为87.8%、96.7%、81.1%、27.8%。蔡峰山等[16]曾对甘肃省武威市凉州区500份免疫接种的羊群进行了血清抗体检测，结果显示抗体阳性率为79.0%。上述数据表明，即使接种羊痘疫苗，不同的地区其免疫效果仍存在一定的差异。

分析日喀则市羊痘抗体水平较低的原因可能为：日喀则市面积较大，疫苗送至各个地区路途遥远，可能为避免疫苗在运输时间和运输条件等方面而影响免疫效果选择使用灭活疫苗，与其他省份接种弱毒疫苗相比，免疫效果存在一定的差异。而且由于特殊的高原恶劣气候，对疫苗免疫效果也具有一定影响。此外，由于本研究采样检测时间为4月和10月，此时正值牧草短缺季节，羊群营养水平较低，可能也会对抗体水平产生一定影响。

因此，建议进一步采取措施，及时查明免疫抗体水平较低的原因，从根源上解决此问题。应严格按照羊痘疫苗免疫注射规程做好免疫接种工作，加强疫苗运输、保管安全，并确保免疫剂量、免疫方法、接种部位正确。同时，虽然进行了疫苗免疫接种，但仍须高度重视羊痘疫病的防控，特别要重点注意免疫效果较差、易感性更高的群体，如绵羊、3岁及以下和6岁及以上的羊。定期进行免疫检测，掌握疫苗免疫后抗体变化情况，并采取必要的措施，使羊处于良好的免疫保护状态。制定综合的防控措施，注意圈舍的清洁卫生，冬、春季节进行适当的补饲，做好防寒保暖工作，提高羊的抵抗力[15]。此外，禁止从羊痘的疫区引进羊[17]。

4 结论

本研究结果表明，日喀则市的5个县（区）在进行羊痘免疫后抗体阳性率较低，感染风险较高，绵羊、老弱（3~6岁以外）免疫效果较差，应重点防范；应进一步开展调查，查明免疫抗体水平较低的原因，及时采取必要措施。