南阳师范学院生命科学与农业工程学院 杨莉萍 张乃群
新疆军区保障部物资采购站 张驰
野生大豆属于蝶形花科,一年生草本植物。野生大豆虽然在形态、生长习性等方面和栽培大豆有明显差别,但野生大豆与栽培大豆之间不存在物种隔离。野生大豆的许多优良基因是栽培大豆所不具备的,野生大豆的营养物质含量高、结实率高、适应性广、抗逆性强、抗病害能力强等生产潜力,是现代农业中重要的大豆种质资源。
耕地土壤中盐分浓度过高,会阻滞植物生长、降低结实率,甚至造成植株死亡,这已成为农业生产面临的普遍难题。鉴于野生大豆先天具备丰富的变异类型和抗盐的特性,而萌发阶段又是野生大豆生长发育的基础环节,因此,对盐胁迫下野生大豆种子的萌发及幼苗生长特性进行研究,将为野生大豆强耐盐性植株的筛选、新品种耐盐杂交大豆的培育和改良提供理论基础。
试验材料:野生大豆种子,2021 年采摘自南阳市郊区,于0~4 ℃冰箱中保存。
本试验采用培养皿滤纸法,对经过处理的野生大豆种子进行一定时间的恒温培养,在设定不同的盐浓度条件下检验其萌发情况,以探索野生大豆种子在盐胁迫条件下的萌发特性。
1.野生大豆种子的处理。取一定数量籽粒完整的野生大豆种子,置于98%的浓硫酸溶液中浸泡10 min,并用玻璃棒搅拌,使种子表皮与浓硫酸溶液充分接触,破坏其坚硬种皮,解除野生大豆种子的休眠状态。处理后的种子用蒸馏水冲洗干净,分别装入底部铺有一层滤纸的培养皿中,每个培养皿中均随机放入30 粒野生大豆种子,并均匀摆放,以利于计数和观察幼苗的生长状况。
2.野生大豆种子的萌发管理及数据采集。配置浓度分别为25 mmol·L-1、50 mmol·L-1、100 mmol·L-1、200 mmol·L-1、400 mmol·L-1的NaCl 溶液,并以蒸馏水,自来水分别作对照,对野生大豆种子进行萌发试验,每个处理组均做1 次重复,并做好标记。向每个培养皿中分别加入5 mL 的蒸馏水、自来水和以上不同浓度的盐溶液,使液面刚好没过滤纸。将培养皿放置在25 ℃恒温培养室中培养8 d,每天光照时间设为12 h,及时滴加适量蒸馏水,以保持培养皿中滤纸一直处于湿润状态,逐日观测并统计记录野生大豆种子的发芽情况。
待萌发结束后,分组取出培养皿中的野生大豆幼苗,用吸水纸除去表面水分,用刻度尺测量每株幼苗长度,用电子天平称鲜质量,并计算发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数等生理指标(见表1)。
由表1 可知,用不同浓度盐溶液培养野生大豆种子,各组的发芽速率存在差异。25 mmol·L-1盐溶液处理组的发芽率最高且与两个对照组的发芽率十分接近,各组野生大豆种子的发芽率随着盐浓度的升高而快速降低,说明盐浓度越高对野生大豆种子萌发的抑制作用越显著。
表1 不同处理野生大豆种子生理指标
由表1 可知,浓度为25 mmol·L-1的NaCl 溶液处理组的发芽势最大,略高于自来水和蒸馏水2 个对照组,但随着盐溶液浓度的增大,野生大豆种子的发芽势逐渐下降。由此可知,野生大豆种子发芽势与溶液盐浓度总体上呈负相关关系。发芽势近似反映出苗率,低浓度盐溶液能提高野生大豆种子出苗率。
发芽指数是种子活力的高低的间接反映,由表1 可知,浓度为25 mmol·L-1的NaCl 溶液处理组种子的发芽指数最高,其次是自来水对照组、蒸馏水对照组,随着盐溶液浓度的逐渐增大,野生大豆种子的发芽指数迅速下降。由此可知,低浓度的盐溶液可促进种子的萌发,而高浓度的盐溶液会延缓种子的萌发。
活力指数可综合反映种子的发芽率和生长量,由表1 可知,浓度为25 mmol·L-1的NaCl 溶液处理组的活力指数接近自来水对照组,并且高于蒸馏水对照组,但其他盐溶液浓度下野生大豆种子的活力指数迅速下降。由此可知,无机离子的存在利于活力指数的提高,而高浓度的盐溶液会明显降低野生大豆种子的发芽率和生长量。
幼苗鲜质量直接反映种子萌发后的生长情况,由表1 可知,自来水对照组种子的平均鲜质量最大,浓度为25 mmol·L-1的NaCl 溶液处理组的平均鲜质量高于蒸馏水对照组,但随着盐溶液浓度的升高,野生大豆种子的平均鲜质量逐渐下降。与活力指数的表现情况一致。
幼苗株高可直接反映种子萌发后的生长情况,由表1 可知,与对照相比,浓度为25 mmol·L-1的NaCl 溶液处理的次之,随着盐溶液浓度的升高,野生大豆种子幼苗株高迅速下降,由此可知,盐溶液浓度与野生大豆种子幼苗株高总体上呈负相关关系。
依据试验可以发现,野生大豆种子对不同浓度NaCl溶液的胁迫会表现出不同的反应。低浓度对野生大豆种子的各项生理指标的影响并不明显,随着NaCl 溶液浓度的增大,野生大豆种子的各项生理指标也随之呈现迅速降低的趋势,对野生大豆种子的萌发有明显的抑制作用。可见,在一定浓度内,随着盐溶液浓度的增加,野生大豆种子萌发的生理进程遭受到的抑制作用总是不断加剧的。
在植物生长的整个周期中,植物根系所在土壤中的盐分含量是主要的非生物影响因素之一。研究认为,植物细胞吸收过量的钠离子会影响部分酶的构造与功能,使其受到抑制或失活,进而干扰植物的代谢进程。本试验中,通过对野生大豆种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、鲜质量等生理指标的测量与分析,可以客观反映不同盐浓度对野生大豆种子萌发的影响程度及差异。种子萌发阶段是野生大豆生长发育的关键时期,相比较于生长阶段,野生大豆在种子萌发阶段更容易遭受盐分胁迫的干扰,合适的盐浓度可以有效促进种子的萌发,盐浓度过高反而会起到毒害作用。盐胁迫的危害不仅体现在种子萌发率降低,还表现在初始发芽时间推迟、生长量降低等方面。
本试验中培养在浓度为25 mmol·L-1的NaCl 溶液中的野生大豆种子的发芽率、发芽势和发芽指数却高于自来水和蒸馏水2 个对照组,即对于野生大豆种子,低浓度盐溶液处理可以在一定程度上促进其萌发,说明盐分胁迫可能并非只对种子萌发表现抑制作用。据此可推测,盐胁迫会因植物种类的差异而呈现不同的结果。培养在浓度高于浓度为200 mmol·L-1的NaCl 溶液中的部分野生大豆种子仍然可以萌发,说明野生大豆种子具备较强的抵制盐分干扰的生理机制,是理想的耐盐杂交大豆种质资源与基因库。
保障农作物正常生长,除治理表层土壤盐渍化外,开展耐盐性经济作物的培育与推广也是一项重要举措。野生大豆为适应多变的环境,进化出了诸多突变类型,其中包括耐盐性类型。作为大豆种子的繁殖体,研究野生大豆种子的耐盐机理,将有助于筛选出有较强耐盐性的植株,扩大栽培大豆基因的多样性,是培育新的杂交耐盐性大豆品种的有效途径之一。