SCC-Ag2在口腔鳞状细胞癌中的表达与其临床病理参数的关系

陈蔚冰，陈蔚华，叶婷婷

(南昌大学附属口腔医院病理科,南昌 330006)

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)约占头颈部恶性肿瘤的95%，且在近十年有逐渐增长的趋势。根据组织病理表现不同，OSCC分为普通类型和特殊类型，其中特殊类型包括疣状癌、乳头状鳞癌、基底细胞样鳞癌、梭形细胞样鳞癌、腺样鳞状细胞癌和腺鳞癌；因OSCC早期易发生浸润和转移，整体预后较差[1]，5年生存率仅为45%～50%，且复发率较高，因此找到一个与预测OSCC复发和预后相关的敏感标志物至关重要。有文献[2]指出，血清中鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCC-Ag)水平高低与OSCC患者的病情复发和预后有关。SCC-Ag是一种为鳞癌标记的糖蛋白，其特异性好而敏感性低，癌细胞不仅分泌中性成分SCC-Ag1，也分泌酸性成分SCC-Ag2[3]。因此本文将通过检测OSCC患者血清中SCC-Ag2水平高低，探讨血清中SCC-Ag2水平与OSCC预后相关病理参数的关系，以期为OSCC患者的预后提供可靠的血清标志物。

1 材料与方法

1.1 病例选择及分组

选取2019年11月至2021年11月南昌大学附属口腔医院就诊的54例OSCC患者为OSCC组(17例收集到术后血清的患者中普通类型11例，特殊类型6例)。以同期入院非OSCC患者为对照组(n=15)。排除标准：小于18岁和大于80岁者；妊娠期及哺乳期女性；患有其他恶性肿瘤者；术前行放疗/化疗者；血清样本溶血严重者。2组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 SCC-Ag2的检测

采集1.5 mL血清于EP管中置-20 ℃储存，采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血清SCC-Ag2的水平；SCC-Ag2购自CUSABIO公司——人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCC-Ag2)酶联免疫试剂盒(产品编号CSB-E04776h)、生物安全柜、高速离心机、振荡器、37 ℃温育箱、干净的移液器和枪头、无菌的量筒和试管、去离子水。

1.3 观察指标

比较对照组和OSCC组(术前术后)血清SCC-Ag2的水平。

1.4 统计学方法

采用SPSS25.0软件统计分析数据，非正态分布的数据以中位数(四分位数)表示；采用χ2检验或曼惠特尼-U检验等对数据进行分析，采用线性回归方程分析临床病理参数与血清中SCC-Ag2水平相关性及ROC曲线分析算出SCC-Ag2的cut-off值。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 OSCC患者临床病理参数

54例OSCC患者中，男37例，女17 例，年龄37～79岁，其中舌癌23例，牙龈癌14例，颊癌8例，口底癌4例，上腭癌3例；磨牙后区癌1例，下唇癌1例。相关临床病理参数比较，结果显示性别、部位、分化程度差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 54例OSCC患者性别、年龄及临床病理参数

2.2 OSCC组和对照组SCC-Ag2水平

OSCC组和对照组SCC-Ag2水平分别为0.59、0.45 μg·L-1，OSCC组SCC-Ag2水平高于对照组(P<0.05)。

2.3 OSCC患者临床病理参数与血清中SCC-Ag2水平的关系

以血清SCC-Ag2水平为因变量做线性回归分析，结果显示肿瘤体积和分化程度与SCC-Ag2水平有关，且肿瘤体积和分化程度均与血清水平呈负相关(β=-0.324、β=-0.202，P<0.05)。 见表2。

表2 OSCC患者临床病理相关参数与血清中SCC-Ag2水平的关系

2.4 不同类型OSCC患者术前术后血清SCC-Ag2之间的关系

术前术后,普通类型患者血清SCC-Ag2水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；特殊类型鳞癌术前血清SCC-Ag2水平高于术后，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 术前术后不同类型OSCC患者血清中SCC-Ag2水平比较 M(Q1，Q2)，μg·L-1

2.5 OSCC患者血清SCC-Ag2水平ROC曲线分析

OSCC患者血清SCC-Ag2水平为0.481 μg·L-1时，敏感度较高(77.78%)，但特异度仅为63.33%，诊断意义不大。见图1、表4。

图1 血清中SCC-Ag2水平诊断OSCC的ROC曲线

表4 血清中SCC-Ag2水平对OSCC的诊断价值

3 讨论

SCC-Ag是1977年由Kato从宫颈癌组织中提取的一种分子量为48 000的糖蛋白，是T4-A的一个亚片段，基因位于18q21.3上，包括SCC1和SCC2 两个基因，分别编码SCC-Ag1和 SCC-Ag2糖蛋白，二者有高度的同源性[3-4]。许多研究表明血清中SCC-Ag水平可用作食管癌、头颈癌和宫颈癌等恶性肿瘤的生物标记物，可作为一种非创伤性手段进行疾病的早期诊断、预测病情进展、是否复发及治疗效果[5-9]，其中癌细胞分泌的SCC-Ag2可以在血清中检测到。为此，本文重点对OSCC患者血清中SCC-Ag2水平进行研究。结果发现，54例OSCC患者血清SCC-Ag2水平为0.207～2.111 μg·L-1，非OSCC患者血清中SCC-Ag2水平为0.111～0.925 μg·L-1，2组血清SCC-Ag2水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。

LIN等[10研究发现术前血清SCC-Ag>2.0 μg·L-1与OSCC的病理状态、淋巴结囊外扩散及肿瘤浸润深度显著相关，且晚期远处转移率高，因此推测术前血清SCC-Ag水平的升高与OSCC患者的无病生存率及总生存率可能有关，但该结论需要更长的随访数据和病例数证实。而本研究结果显示，OSCC患者的肿瘤分化程度、肿瘤体积与SCC-Ag2水平呈负相关，这一点与LIN等[10]的观点不一致，其原因可能是两者纳入的SCC-Ag类型不同有关。本研究中OSCC组有6例为特殊类型鳞状细胞癌，其中1例为腺样鳞状细胞癌，其血清中SCC-Ag2水平最高为2.111 μg·L-1，而腺样鳞状细胞癌预后较差，并且非OSCC患者与特殊类型鳞癌血清中SCC-Ag2水平相比较差异有统计学意义。同时，本研究发现15例患者术后血清中SCC-Ag2水平较术前明显降低，但有2例患者血清术后血清SCC-Ag2略微升高，推测这可能与患者术后机体的应激反应和个体差异有关；但特殊类型鳞癌患者的术后血清均降低，且与术前相比，差异有统计学意义(P<0.05)。李海如等[2]发现术前和术后血清SCC-Ag>1.5 μg·L-1的普通鳞癌患者具有明显的复发和转移倾向。这提示，SCC-Ag参与普通鳞癌的发生发展，其结果可以用来判断病情的复发及是否转移。

另外ROC曲线分析显示，当血清中SCC-Ag2水平为0.481 μg·L-1时，特异度较高，但是无诊断价值。YASUMATSU等[11]研究结果显示，96例头颈部(包括鼻旁窦、口腔、口咽部、喉咽部和喉部)鳞癌患者的血清SCC-Ag2水平显著高于健康组(P<0.05)，但在口腔鳞状细胞癌中，却无显著升高(P>0.05)。这一点与本文研究结果类似，虽然本研究中2组SCC-Ag2水平差异有统计学意义，但其中有23例OSCC患者的血清SCC-Ag2水平与对照组保持相近范围，而这一点与已知理论基础——SCC-Ag2主要由癌细胞分泌存在于细胞中相反，推测可能与试剂类型不同有关，仍需进一步实验加以佐证。

根据现有的文献报道，SCC-Ag可联合其他血清标志物如长链非编码RNA AC007271.3[12]、Cyfra21-1[13]等作为OSCC的早期诊断。而NAKASHIMA等[3]指出，SCC-Ag1的过表达可以抑制头颈部鳞癌细胞系的侵袭潜能，可作为预后标记物，这提示SCC-Ag1参与口腔鳞状细胞癌的发生发展，其结果可以用来判断病情的复发及是否转移。但肾功能不全、肝功能障碍或患其他免疫性疾病者血清中也会出现SCC-Ag水平的升高，呈现假阳性的结果，因此要结合其他检测方法联合应用。

关于SCC-Ag2在OSCC中的血清水平变化的研究较少。SCC-Ag的测定多采用血清和组织样本，VAN SCHAIK等[14]认为采用细针吸取活检技术从头颈部鳞癌的转移淋巴结获得样本，从而测定SCC-Ag水平，也是一种比较可靠的技术。但这一点仍需要更科学的实验设计和更大的样本量来验证。目前大多数研究采用ELISA法或放射免疫测定法[15]对SCC-Ag进行测定，且每一位研究者所选取的截断值不同，因而结论不一。因此，这3种检测方法的一致性也可作为未来研究的方向。

5 结论

本研究中通过检测OSCC患者血清中SCC-Ag2的水平，分析了口腔鳞癌相关组织病理学特征如肿瘤体积、分化程度和淋巴结转移等，结果显示肿瘤体积和组织分化程度与血清中SCC-Ag2的水平呈负相关，且OSCC患者血清中SCC-Ag2水平高于非OSCC患者血清中SCC-Ag2水平，但是血清中SCC-Ag2水平为0.481 μg·L-1时敏感度较高，但特异度较低，无诊断价值。因此，血清中SCC-Ag2水平可以作为预测OSCC患者预后的相关血清标志物，但不能作为诊断的血清标志物。