谢文龙 雒秋江 韩守方 潘 榕 张 宸
(新疆农业大学动物科学学院,动物营养实验室,乌鲁木齐 830052)
麝香鼠产麝鼠香,是林麝香的替代品之一,具有抗心衰、抗脑梗、促进心脏血管再生等心脑血管保健作用[1-2],也是高档化妆品的组成部分[3]。麝香鼠原为野生,但为了获得麝鼠香,几十年来,我国多地都进行了麝香鼠的人工饲养。而饲养中饲粮纤维含量的作用始终是麝香鼠营养与消化关注的重点之一。
麝香鼠为草食动物,一般认为,麝鼠对植物具有较强的消化能力[4],然而麝香鼠对纤维素很难进行消化利用[5]。与家兔相似,麝香鼠也是食软粪动物。如果家兔饲粮的粗饲料含量较高,会降低机体获得的营养物质[6],而粗饲料含量较低则会影响家兔的正常消化机能,出现拉稀等症状[7-8]。麝香鼠饲粮的粗纤维含量一般推荐量为15%~16%[9]。但饲粮纤维含量对麝香鼠的采食、消化和软粪产量是否有影响,相关的研究鲜有报道。因此,本试验给麝香鼠饲喂纤维含量不同的饲粮,旨在研究饲粮纤维含量对麝香鼠采食和消化的影响,为麝香鼠饲粮的合理配制和科学饲养提供参考。
选取约12月龄、体重(1 367.7±121.3) g雄性麝香鼠8只,试验分3期,每期饲喂1种纤维含量的饲粮,同时喂给8只。3期试验分别饲喂纤维含量为17.34%(饲粮1)、21.57%(饲粮2)和25.67%(饲粮3)的颗粒饲料,自由采食。每期预试期15 d,收粪期8 d。由于麝香鼠的硬粪较好收集,但软粪量较少且多在夜间排出,不好收集全部软粪,为更加准确地测算出麝香鼠软粪的排粪量,故在各收粪期每天收集麝香鼠的全部硬粪和部分软粪,分别混合后测定其中的营养物质含量;并在饲粮中提前混入聚乙二醇6000(PEG 6000)作为标记物,以推算麝香鼠的每日软粪排粪量。
试验饲粮组成及营养水平见表1。饲粮加工成颗粒后于室温保存。饲粮颗粒直径0.80 cm,平均长1.00 cm。制备颗粒饲粮前,先将PEG按100.00 g/L溶解搅匀,均匀喷洒于100 kg混合饲粮中。制备的3种颗粒饲料PEG含量均为1.00 g/kg饲粮(干物质基础)。
表1 试验饲粮组成及营养水平(干物质基础)
续表1项目 Items饲粮1 Diet 1饲粮2 Diet 2饲粮3 Diet 3磷 Phosphorus0.500.460.42总能 Gross energy/(MJ/kg)14.8813.9713.77
饲养期将麝香鼠饲养于自制的鼠笼中。鼠笼长130 cm、宽70 cm、高90 cm,分3层,上层为休息室,中层为采食区,下层为水池,各层间在角落以开口10 cm×10 cm的孔洞相连。食槽置于第2层铁丝网外,食槽处铁丝网孔为2 cm×2 cm。自由采食,自由饮水。
粪便收集期将麝香鼠饲养在单独的铁笼子里(长50 cm、宽50 cm、高100 cm),采食槽和饮水罐内置固定,每天09:00饲喂1次。为使动物适应试验笼,在预试期不定期地将麝香鼠放置于笼内饲养12~36 h。
1.4.1 饲粮和剩料采集
从每期试验收粪期前1 d起,每天取颗粒饲粮样品10 g,连续8 d,待试验结束后将样品混合、称重记录,粉碎,全部过40目筛,于避光干燥阴凉处密封保存。
从收粪期前1 d开始,每天09:00分别收集各试验麝香鼠的全部剩料,连续8 d,称重后阴干,常温保存。
1.4.2 粪便样品采集
为了收集软粪,需要给动物佩戴项圈以阻止舔食软粪。本试验采用中空的圆形硬质塑料薄片(外径、内径和厚度分别为8、4和0.2 cm,内外径间宽4 cm),将一端切开,并固定粘扣带以调节项圈内径的大小。在颈圈内圈与动物脖子接触部位缠绕1层棉布,以避免伤害动物。麝香鼠佩戴后项圈呈向前的喇叭口状,无法从肛门口处舔食到软粪。每期试验在收粪期前3 d和收粪期每天10:00和22:00分别给麝香鼠佩戴项圈2次,每次1~2 h,连续11 d(前3 d佩戴以使动物适应,后8 d佩戴以收集全部硬粪和部分软粪)。
收粪时将鼠笼用砖架空,将鼠笼架空,在下部1/2处放置纱网,以收集粪便。收粪时如有粪便被尿液污染,则另行收集,只测定其风干重,回算到排粪量内。收粪纱网每日更换1次。
可根据鲜粪的外形区分硬粪和软粪,即软粪呈葡萄球状,表面覆盖黏液;硬粪则呈长条状。每期用镊子分别收集全部新鲜硬粪(约262 g)和部分软粪(约82 g)。
将各期每只鼠的新鲜硬粪和软粪分别混合后各取50和70 g,于阴凉通风干燥处风干,风干后分别重约30和26 g,用研钵磨碎,全部过40目筛,编号并装袋密封后于4 ℃冰箱保存。
饲粮、剩料、粪样的干物质、有机物、粗蛋白质和磷含量的测定方法参照AOAC(2005)[10];钙含量测定采用邻甲酚酞比色法[11],纤维素、半纤维素、木质素含量测定采用Van Soest法[12],能量测定方法参照AOAC(2005)[10],PEG含量测定方法参照侯先志等[13],氨基酸含量测定方法参照袁缨[14]。每个测定(双样)样品用量共12 g,其中干物质、有机物、磷和钙含量测定用量2 g;粗蛋白质含量测定用量2 g;粪便氨基酸含量测定用量2 g;纤维素、半纤维素、木质素含量测定用量2 g;能量测定用量2 g;PEG含量测定用量2 g。
1.6.1 结果计算
自由采食量=饲喂量-剩料量;
营养物质表观消化率(%)=100×
(采食量-粪量)/采食量。
软粪量和消化量:本研究通过在饲粮中定量添加外源指示剂PEG,和通过给麝香鼠佩戴项圈取得硬粪和部分软粪样品,利用硬粪和软粪PEG含量的比例关系,计算麝香鼠的软粪量。
每天产生的软粪量=(每天排出的硬粪量×
软粪PEG含量)/硬粪PEG含量。
软粪中含有纤维素和半纤维素,其可能只被部分消化,故本试验将软粪纤维素和半纤维素的消化率假定为麝香鼠整体的消化率,而软粪中其他营养物质的消化率则假设为100%,以估算软粪的消化量。讨论中计算能量时纤维素和半纤维素的能值分别取4.7和1.5 MJ/kg[15]。
1.6.2 统计分析
数据以平均值±标准差表示,采用SPSS 26.0统计软件one-way ANOVA程序进行单因素方差分析,Duncan氏法进行多重比较,以P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著。
如表2所示,饲喂饲粮纤维含量分别为17.34%、21.57%和25.67%的饲粮,对麝香鼠的干物质、有机物、粗蛋白质和能量的自由采食量均没有显著影响(P>0.05),但与饲喂饲粮1相比,饲喂饲粮2的麝香鼠对纤维素、半纤维素、钙的自由采食量分别显著或极显著增加41.19%(P<0.01)、9.16%(P<0.05)、7.32%(P<0.05),对磷的自由采食量显著减少7.69%(P<0.05);饲喂饲粮3的麝香鼠对纤维素、半纤维素、钙的自由采食量分别极显著增加82.69%(P<0.01)、17.11%(P<0.01)、14.63%(P<0.01),对磷的自由采食量极显著减少15.38%(P<0.01)。
表2 饲粮纤维含量对麝香鼠自由采食量的影响
如表3所示,饲粮纤维含量对麝香鼠干物质、有机物、纤维素、半纤维素、磷和能量的表观消化率没有显著影响(P>0.05)。与饲喂饲粮1相比,饲喂饲粮2和饲粮3的麝香鼠粗蛋白质表观消化率分别显著降低5.66%和9.03%(P<0.05),钙表观消化率分别显著降低5.29%和3.10%(P<0.05),表明饲粮纤维含量对除粗蛋白质和钙以外的营养物质的表观消化率影响较小。
如表3所示,饲粮纤维含量对麝香鼠干物质和有机物的消化量没有显著影响(P>0.05)。与饲喂饲粮1相比,饲喂饲粮2的麝香鼠粗蛋白质、能量和磷的消化量分别极显著减少8.13%(P<0.01)、8.68%(P<0.01)和13.33%(P<0.01);饲喂饲粮3的麝香鼠粗蛋白质、能量和磷的消化量分别极显著减少12.92%(P<0.01)、11.13%(P<0.01)和20.00%(P<0.01),这可能与饲粮中的粗蛋白质、磷含量和可消化能量降低有一定关系。然而,与饲喂饲粮1相比,饲喂饲粮2的麝香鼠纤维素和半纤维素消化量却分别极显著增加31.06%(P<0.01)和7.25%(P<0.01);饲喂饲粮3的麝香鼠纤维素和半纤维素消化量分别极显著增加60.61%(P<0.01)和9.84%(P<0.01),表明麝香鼠对饲粮中的纤维具有较强的消化能力。
表3 饲粮纤维含量对麝香鼠营养物质表观消化率和消化量的影响
如表4所示,PEG法测定结果表明,饲粮纤维含量对麝香鼠软粪量(干物质基础)没有显著影响(P>0.05)。3种饲粮条件下麝香鼠软粪的含水量分别为67.65%、65.87%和63.11%,虽然含水量随饲粮纤维含量提高趋于降低,但差异不显著(P>0.05)。麝香鼠的软粪量约为硬粪量的54.18%(干物质基础)。全收粪法测定结果中,饲粮纤维含量对麝香鼠的硬粪量(干物质基础)的影响也不显著(P>0.05)。用全收粪法和PEG法分别所获得的硬粪数据几乎相同。
表4 饲粮纤维含量对麝香鼠硬粪量和软粪产量的影响
续表4项目 Items饲粮1 Diet 1饲粮2 Diet 2 饲粮3 Diet 3PEG含量(鲜重基础) PEG content (fresh basis)/(mg/g)1.04±0.051.06±0.051.09±0.01PEG含量(干物质基础) PEG content/(DM basis)/(mg/g)2.82±0.092.83±0.032.82±0.03硬粪量(干物质基础)Feces amount(DM basis)/[g/(d·只)]14.19±1.33c15.14±0.98b15.36±0.39a软粪(PEG法)Caecotrophy (PEG method)含水量 Water content/%67.65±1.1465.87±1.1263.11±1.23PEG含量(鲜重基础) PEG content (fresh basis)/(mg/g)0.52±0.00Bb0.53±0.00Bb0.57±0.00AaPEG含量(干物质基础)PEG content (DM basis)/(mg/g)1.60±0.001.55±0.001.53±0.00软粪量/硬粪量 Caecotrophy amount/feces amount0.57±0.020.55±0.010.54±0.01软粪量(干物质基础)Caecotrophy amount (DM basis)/[g/(d·只)]8.05±0.738.29±0.558.36±0.44
如表5所示,饲喂纤维含量分别为17.34%、21.57%和25.67%的饲粮,麝香鼠软粪量(干物质基础)分别为8.05、8.29和8.36 g/(d·只),即为每日饲粮自由采食量的15.65%、16.01%和16.06%。根据计算,软粪可提供的干物质分别为7.38、7.34和7.20 g/(d·只),即为干物质总消化量的25.28%、25.90%和25.43%。同样,麝香鼠软粪可提供的粗蛋白质分别为2.16、2.12和2.03 g/(d·只),即为粗蛋白质总消化量的31.39%、33.44%和32.88%。与饲喂饲粮1相比,饲喂饲粮2和3的麝香鼠软粪可提供总氨基酸分别极显著降低10.64%(P<0.01)和23.33%(P<0.01),可提供赖氨酸分别极显著降低9.53%(P<0.01)和17.74%(P<0.01),可提供蛋氨酸分别极显著降低25.59%(P<0.01)和39.44%(P<0.01)。麝香鼠软粪可提供消化能在3种饲粮中分别为433.14、395.54和384.93 J/(d·只),即为总消化能量的24.95%、26.38%和27.05%。以上结果表明,饲粮纤维含量对麝香鼠软粪量(干物质基础)没有显著影响,对软粪的干物质和能量消化量也没有显著影响,但对软粪中粗蛋白质、钙、磷、总氨基酸、赖氨酸和蛋氨酸可消化量均有显著影响。
表5 饲粮纤维含量对麝香鼠软粪的影响
续表5项目 Items总消化量 Total digestibility amount软粪提供Caecotrophy supply占比 Proportion/%蛋氨酸 Methionine/(mg/d)26.65±1.52Aa饲粮2 Diet 2干物质 DM/[g/(d·只)]28.36±1.977.34±0.4725.90±0.34有机物 OM/[g/(d·只)]26.72±1.856.75±0.7825.25±0.23粗蛋白质 CP/[g/(d·只)]6.33±0.56ABb2.12±0.27ABb33.44±1.56能量 Energy/[J/(d·只)]395.54±28.46Bb104.36±2.3226.38±0.33Bb钙 Calcium/(mg/d)240.51±18.81b33.05±0.73Bb13.74±0.72磷 Phosphorus/(mg/d)130.79±13.21ABb49.94±1.95Aa38.18±1.34总氨基酸 Total amino acid/(mg/d)346.49±5.98Bb赖氨酸 Lysine/(mg/d)19.17±1.34Bb蛋氨酸 Methionine/(mg/d)19.83±1.92Bb饲粮3 Diet 3干物质 DM/[g/(d·只)]28.33±1.387.20±0.3925.43±0.22有机物 OM/[g/(d·只)]26.74±1.306.52±0.8724.40±0.13粗蛋白质 CP/[g/(d·只)]6.00±0.39Bb2.03±0.76Bb33.82±1.62能量 Energy/[J/(d·只)]384.93±20.29Cc104.12±1.9927.05±0.97Aa钙 Calcium/(mg/d)264.68±10.31a36.02±0.32Aa13.61±0.02磷 Phosphorus/(mg/d)121.58±5.89Bb43.94±3.87Aa36.14±1.10总氨基酸 Total amino acid/(mg/d)297.30±3.60Cc赖氨酸 Lysine/(mg/d)17.43±1.86Cc蛋氨酸 Methionine/(mg/d)16.14±1.37Cc平均值 Average value干物质 DM/[g/(d·只)]28.63±0.507.31±0.0925.53±0.32有机物 OM/[g/(d·只)]27.10±0.646.72±0.1524.78±0.43粗蛋白质 CP/[g/(d·只)]6.41±0.452.10±0.0632.88±1.31能量 Energy/[J/(d·只)]404.54±25.33105.52±2.2126.13±1.07钙 Calcium/(mg/d)247.60±23.2833.85±1.9013.67±0.07磷 Phosphorus/(mg/d)132.65±15.6449.26±5.0137.12±1.02总氨基酸 Total amino acid/(mg/d)343.85±45.28赖氨酸 Lysine/(mg/d)19.26±1.88蛋氨酸 Methionine/(mg/d)20.87±4.36
使用配合饲粮可以更好地提高麝香产量,并且品质好,个体差异小[16]。本试验分别以苜蓿干草含量为20.00%、35.00%和50.00%的饲粮饲喂麝香鼠,其纤维含量(纤维素+半纤维素+木质素)分别为17.34%、21.57%和25.67%,3种饲粮间干物质自由采食量没有显著差异,表明饲粮苜蓿干草或纤维含量并不影响麝香鼠的干物质自由采食量。然而,由于饲粮纤维含量的提高,麝香鼠对纤维的自由采食量仍有提高,但对能量的自由采食量并无显著影响。但是,由于饲粮成分的差异,麝香鼠对纤维素、半纤维素、钙和磷的自由采食量仍有显著增加。
野生条件下麝香鼠的干物质消化率分别为77.3%(春季)、66.4%(夏季)、54.5%(冬季)[9];采食颗粒饲料时为54.1%[17]。饲粮中纤维含量对麝香鼠的干物质表观消化率并没有显著影响[18]。在本试验中,麝香鼠对3种饲粮的干物质表观消化率分别为56.75%、54.76%和54.44%,饲粮纤维含量对饲粮的干物质表观消化率没有显著影响,与文献报道结果相似。而家兔的饲粮中粗纤维含量越高,干物质消化率越低[19],影响较大。然而,3种饲粮的粗蛋白质表观消化率分别为59.67%、56.29%和54.28%,即对饲粮2和3粗蛋白质表观消化率分别降低了5.66%和9.03%。并且,当饲粮中纤维含量为17.34%时,麝香鼠干物质自由采食量较低,且干物质表观消化率较高,说明在本试验条件下,饲粮纤维含量17.34%对麝香鼠具有较好的营养作用,而家兔饲粮的纤维适宜含量为16%[20],差异不大。
饲粮纤维含量对麝香鼠营养物质消化量影响的报道较少,但高纤维饲粮对麝香鼠营养物质消化量会有负面影响[21-22],已知饲粮中纤维含量的增加会降低麝香鼠粗蛋白质的消化量[23],且饲粮中的粗纤维含量增大会抑制钙和磷的消化吸收。研究表明,饲粮营养显著影响麝香产量和品质[16],这种影响取决于饲粮蛋白质含量、能量和微量元素等因子合理搭配,饲粮中蛋白质对泌香具有直接影响[24-25],饲粮较高水平的能量、粗蛋白质和可利用氨基酸可以提高泌香量[26]。在本试验中,与饲喂饲粮1相比,饲喂饲粮2、3麝香鼠有机物消化量分别减少了4.02%和3.95%;粗蛋白质消化量分别减少了8.13%和12.92%;能量消化量分别减少了8.68%和11.13%;磷消化量分别减少了13.33%和20.00%;而饲喂饲粮3麝香鼠钙的消化量则增加了8.33%,表明随着饲粮纤维含量的增加,有机物、粗蛋白质、能量和磷的消化量均趋于减少,而钙的消化量增加(可能是因为苜蓿干草比例增加,使饲粮钙含量增加)。本试验表明可以通过调整饲粮苜蓿干草或纤维含量来调整麝香鼠饲粮营养物质的供应量。
文献报道软粪能提供麝香鼠40%的饲粮干物质需要量[27]或每日蛋白质摄入量的15%~22%[28],而在本试验中,麝香鼠每日从软粪提供的可消化干物质、粗蛋白质和能量分别为总消化量的25.53%、32.88%和26.13%,表明软粪是麝香鼠营养供应的重要来源,而家兔软粪能为机体每日提供蛋白质摄入量的40%[29],提示麝香鼠和家兔的软粪中营养含量可能存在区别。因此有必要研究在生产中添加抗生素对软粪的作用和调控肠道微生物区系对麝香鼠营养的作用等问题。
软粪是麝香鼠的重要营养来源,但测定麝香鼠的软粪量比较困难。本研究通过在饲粮中定量添加外源指示剂PEG,和通过给麝香鼠佩戴项圈取得硬粪和部分软粪样,计算麝香鼠的软粪量。本研究设定了以下假定:
1)相同饲粮和采食量条件下,麝香鼠每天排出的硬粪量(Y)和软粪量(R)的比例是基本稳定的(即Y/R=C)。2)PEG在硬粪、软粪中都是与食糜同步运动的,且均匀分布,获得的软粪、硬粪样品中各自的PEG含量也是均匀一致的(多样品混合)。3)在采食的饲粮中定量加入PEG,则:每日硬粪中PEG含量=Y×硬粪PEG含量;每日软粪中PEG含量=R×软粪PEG含量。4)假定每日排出的硬粪和软粪中的PEG含量都是恒定的,且假定它们的比值也为C(因为每日排出硬粪和软粪量的比例恒定)。5)那么,硬粪和软粪中PEG含量的比值也为C,即:C=硬粪PEG含量/软粪PEG含量;根据C=Y/R,即Y/R=硬粪PEG含量/软粪PEG含量,所以:
软粪量(R)=(Y×软粪PEG含量)/
硬粪PEG含量。
公式右边指标都可通过试验测得。
根据本试验方法,麝香鼠的软粪量(干物质基础)为8.05~8.36 g/(d·只),约占采食量的15.91%,从数据上看具有一定的可信度。
饲喂纤维含量分别为17.34%、21.57%和25.67%(即苜蓿干草分别占20.00%、35.00%和50.00%)的饲粮给成年麝香鼠,在本试验条件下可得出以下结论:
① 饲粮纤维含量对麝香鼠的干物质自由采食量和其他营养物质的表观消化率均没有显著影响,但会降低饲粮的粗蛋白质表观消化率。
② 成年麝香鼠平均每天产软粪8.23 g(干物质基础)。提高饲粮的纤维含量对软粪量、干物质、有机物、能量消化量无显著影响,但会降低软粪粗蛋白质、磷、总氨基酸、赖氨酸和蛋氨酸的消化量。
③ 麝香鼠对纤维素和半纤维素的表观消化率分别约为36.91%和45.33%,饲粮纤维含量的增加有降低以上二者消化率的趋势。在本试验中,纤维水平为17.34%的饲粮更有利于麝香鼠的营养。