潘忠文,潘忠斌
(1.舒城县畜牧兽医发展中心,安徽 舒城 231300;2.舒城县水产发展中心,安徽 舒城 231300)
近些年,中草药提取物的研究比较广泛。黄芪是一种多年生草本中草药,味甘、性温,可以起到固表止汗、补气、托毒排脓等作用。而黄芪多糖是从黄芪植物中提取的一种生物活性成分,具有多种生物学功能,如调节机体免疫、增强抗氧化性能、抗菌等[1-3]。目前,黄芪多糖在畜禽养殖生产中的研究应用主要集中于猪、家禽、反刍动物等。崔玉革等[4]研究发现,在断奶仔猪生产中使用黄芪多糖可以提高断奶仔猪的生长性能,增强机体免疫功能,并能改善部分血清生化指标。杨泓涛等[5]研究发现,在黔北麻羊生产中使用适量的黄芪多糖,可以提高羔羊的生产性能,调节机体的免疫力。庞青松等[6]在断奶肉兔的养殖中使用适量的黄芪多糖,可以有效促进幼兔的生长性能,降低其腹泻率,提高机体免疫力。刘春花等[9]在草鱼生产中使用一定剂量的黄芪多糖可以提高草鱼机体的非特异性免疫功能,并能对嗜水气单胞菌具有很好的抑制作用,且黄芪多糖在草鱼养殖中的最适添加水平为10~30 mg/kg 。目前,黄芪多糖在鲫鱼生产中的研究应用相对较少。因此,本研究以鲫鱼为研究对象,探讨不同水平的黄芪多糖对其机体免疫功能的影响,并确定黄芪多糖在鲫鱼养殖中的最适添加水平,为黄芪多糖在鲫鱼养殖中的合理应用提供理论数据支持。
本试验中使用的黄芪多糖由北京某生物公司生产,其有效含量大于60%。试验所用的鲫鱼来自舒城县柏林乡老徐家庭农场,该农场以生产大规格的鱼种为主,选取的鲫鱼体重约40 g,健康、无病。
试验选取500尾体重差异不显著、健康无病的鲫鱼按照单因子试验设计,将其均分为5个处理组,每组5个重复,每个重复20尾鲫鱼。对照组试验鲫鱼饲喂基础饵料,试验1组鲫鱼饲喂含有5 mg/kg的黄芪多糖的基础饵料,试验2组鲫鱼饲喂含有10 mg/kg的黄芪多糖的基础饵料,试验3组鲫鱼饲喂含有20 mg/kg的黄芪多糖的基础饵料,试验4组鲫鱼饲喂含有40 mg/kg的黄芪多糖的基础饵料。试验周期分为预试验7天和正式试验30天,试验结束后采集鲫鱼血液,检测鲫鱼血清中免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、超氧化物歧化酶及丙二醛等免疫指标。试验设计见表1。试验鲫鱼的基础饵料配方见表2。
表1 试验设计及处理
表2 试验鲫鱼的基础饵料配方
试验所有鲫鱼饲养于25个水族箱中,试验开始前驯化7天,期间投喂基础饵料。每日鲫鱼分别于6:00、12:00、17:00饲喂。每日饵料的投喂量约为鲫鱼体质量的3.5%~4.5%。每日使用虹吸管收集水族箱中的残饵。水温约为23.5℃~25.5℃,溶解氧含量大于5.2 mg/L。每7天换水2次,每次的换水量约为1/3。
试验第30天时,停止投喂饵料24小时后,每个重复选择2尾鲫鱼进行麻醉后,采集尾静脉的血液,静置2~4小时后,4000 r/min离心5 min,取上层血清用于检测免疫指标。主要检测免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、超氧化物歧化酶、丙二醛等免疫指标。以上指标的检测方法参考试剂盒说明书进行(南京建成生物工程研究所)。
试验结束后检测的鲫鱼血清免疫指标数据使用SPSS 26统计学软件进行单因子方差分析,此组指标数据具有差异显著性后,再使用LSD方法对组间数据进行多重比较,结果以平均值表示,P<0.05表示此组数据具有差异性。
不同水平的黄芪多糖对鲫鱼血清免疫指标的影响见表3。由表3可见,在鲫鱼养殖中使用适量的黄芪多糖可以增强鲫鱼机体的免疫力。其中,试验3组鲫鱼血清中免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量显著高于对照组(P<0.05),而试验2组和试验4组鲫鱼血清中的免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量有比对照组提高的趋势,但差异不显著(P>0.05)。试验3组和试验4组鲫鱼血清中超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(P<0.05),试验2组鲫鱼血清超氧化物歧化酶活性有提高的趋势(P>0.05)。试验3组鲫鱼血清中丙二醛含量显著低于对照组(P<0.05),其他试验组鲫鱼血清中丙二醛含量有降低趋势(P>0.05)。
表3 不同水平的黄芪多糖对鲫鱼血清免疫指标的影响
本试验中,在鲫鱼养殖使用20 mg/kg的黄芪多糖对鲫鱼机体的免疫功能的效果最好,表明鲫鱼机体对黄芪多糖具有一定耐受能力,不是添加量越高效果越好。曹婷婷等[10]研究表明,在鲫鱼养殖中使用黄芪复方可以提高鲫鱼血清中NBT细胞数量,增强机体的抗病力。周智愚等[11]研究表明,黄芪多糖可以提高草鱼机体的免疫力,且能通过母本传递给子代。以上研究表明,在水生动物养殖使用适量的黄芪多糖可以有效提高机体的免疫力,与黄芪多糖的调节免疫力的生物学功能相关。在实际生产中,每种鱼对黄芪多糖的耐受力不同,根据实际需要确定后其独特的添加量。
本试验研究表明,在鲫鱼养殖中使用适量的黄芪多糖可以提高其机体的免疫球蛋白含量,增强超氧化物歧化酶活性,降低丙二醛含量,显著改善了机体的免疫力,且黄芪多糖的最适添加量为20 mg/kg。