陈芹
(福建省福清市畜牧兽医中心 福州 350300)
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染导致猪的一种急性、高度接触性、高传染性、高致死性的传染病,可感染各年龄段的猪,死亡率可高达100%。世界动物卫生组织(WOAH)将其列为必须及时申报的动物传染病。2018 年我国农业农村部也将其列为一类动物疫病。自2018 年8 月传入我国以来,非洲猪瘟给全国养猪业造成了严重的冲击和损失,同时也给我国畜牧业健康稳步发展敲响了警钟,促使养殖场在落实生物安全措施等方面加以改进和完善。目前,ASF 尚无特效药物,也无安全有效的疫苗可用,在养殖大环境和运输等环节上加强生物安全措施,阻断病毒的传播和扩散是当前非洲猪瘟防控的重要举措。
非洲猪瘟起源于非洲,由于野猪带毒,也导致在非洲流行最为广泛。1914 年在东非的坦桑尼亚共和国首次发现非洲猪瘟;1921年东非肯尼亚也发现了非洲猪瘟,随后在撒哈拉以南的地区流行;1957 年葡萄牙发现了非洲猪瘟,此时表明非洲猪瘟已从非洲蔓延到了欧洲,之后西班牙、法国、意大利也陆续发现非洲猪瘟;1971 年在部分拉美国家,如古巴、巴西、多米尼加等地也开始暴发非洲猪瘟;1985—2007 年间只有比利时、荷兰发现非洲猪瘟,疫情相对稳定。在此之后少数东欧地区有报道,然而在2017 年俄罗斯远东地区暴发非洲猪瘟,2018 年8 月非洲猪瘟传入中国并迅速蔓延。
ASF 最初出现在非洲的野猪和疣猪上,在传播给家猪后导致疫情大范围扩散。国外学者已经证实ASFV 可感染节肢动物,软蜱是主要储存宿主,通过叮咬野猪自身带毒后再感染家猪。但在我国某些猪场发现,场内即使没有发现蜱虫,也可能暴发ASF,故老鼠、蚊虫、鸟类、蟑螂等也可能机械带毒感染家猪,部分储存宿主因体表带毒导致ASFV 的扩散。
非洲猪瘟的流行主要在家猪上,带毒家猪和发病家猪是目前主要的传染源,带毒猪和发病猪的唾液、血液、体液、粪便等是重要的病毒载体。
据报道,ASF 的主要传播途径是软蜱的叮咬。但从我国非洲猪瘟的临床情况及场内环境来看,蜱的叮咬只是一个方面,猪场周围动物(老鼠、蟑螂、鸟类、蛇)及场内外环境(转运车、饲料车、出猪车、外来人员)也是很重要的传播途径。ASFV 在环境中可存在较长时间,被污染的水源、土壤等环境因素也是可能的传播途径。
ASFV 是一种二十面对称的双链DNA 病毒,分子量为170~190kb,中间的保守区为125kb,两端的可变区分别为35 和15kb,其中ORFs 区域有150~167 个,可编码200 多种蛋白,包含了致病、免疫逃逸等基因,由其中的P72 基因的部分序列推导,已发现23 种基因型。P72(pB646L)蛋白和P49(pB438L)是病毒粒子核衣壳的主要蛋白,其中P72 占病毒总质量的35%,是一种较保守的保护性抗原蛋白,所以将其作为血清学检测的主要抗原。ASFV 囊膜外蛋白包括CD2V(EP402R)、p22(pKP177R)、p12(O61R)蛋白,囊膜内蛋白主要包括p17(pD117L)、p54(pE183L)。ASFV 复制主要通过网格蛋白和肌动蛋白依赖性受体的介导,以内吞方式侵入细胞,并通过与微管动力轻链蛋白相互作用,到达核周区,在此过程中多种病毒蛋白如p12、p30、p54、p72 参与其中。ASFV 耐受性强,在-70~37℃和pH(4~10)下仍可存活,部分消毒剂如烧碱、次氯酸对病毒有灭杀作用。
ASFV 感染猪只后潜伏期短,急性感染1~3d 后,病毒主要存在猪的唾液中,临床主要表现为低烧、不食、精神沉郁、呕吐、流产等症状。随着病程的发展5~9d 内ASFV 进入到血液,患猪主要表现为高热、呼吸困难、极度虚弱、血痢等,此阶段的患猪发病急死亡快,死亡率达100%,传染性极强。亚急性和慢性感染主要存在已经暴发ASF 的猪群中,亚急性感染的猪偶有呕吐、不食、流产等症状,但整体来看临床症状均不明显,一般3~4 周后康复或者死亡。慢性感染的猪主要临床症状是消瘦、关节肿大、跛行等。
病变表现为耳、鼻、四肢、下腹、会阴、肛周、尾、脚等无毛部位发红,中心呈暗红色周边分散性出血,边缘色淡,双耳常出现肿胀性紫斑。剖检可见内脏器官广泛性出血,脾脏肿大,可肿大到正常脾脏的5~10 倍,占据腹腔大部分空间,呈暗黑色,质脆易碎,有的被膜下可见大小不一的散在出血点。淋巴结广泛性出血肿大、质地易碎,切面呈大理石样花纹,肠系膜淋巴结出血点最多,其次是腹股沟淋巴结有不同程度的出血点,下颌淋巴结和咽淋巴结等体表淋巴结出血点相对较少。胃、肾脏、肝脏表面及皮质有少量出血点。心脏浆膜和内膜有分散的点状出血,心包膜内有大量的深红色积液。十二指肠、空肠、结肠、回肠均有出血和水肿,腹腔内可见大量淡红色积液。
脾肿大并伴有出血,呈黑色或暗红色,质脆。淋巴结肿大并伴有广泛性出血,切面呈大理石样。心包膜水肿,膜内可见淡红色积液。消化道偶见水肿,腹腔内有少量红色或无色积液。有呼吸困难症状的病猪肺部呈现水肿或间质性肺炎。
可见皮肤表面多灶性坏死,肺脏有间质性肺炎,十二指肠、空肠、结肠、回肠均有充血、水肿。脾脏肿大出血点不明显,肾脏、肝脏未见明显变化。
生猪在感染ASFV 后,发病急,死亡率高,需及时发现,妥善处理,否则将面临整场扑杀,造成严重的经济损失。现今市场上还没有研发出安全有效的ASFV 疫苗,一旦发现疑似病例,尽早拔牙和消毒处理是最重要的防控手段。2021 年4 月农业农村部印发了《非洲猪瘟疫情应急实施方案》第五版,从宏观层面指导控制非洲猪瘟疫情扩散,但养殖场在第一时间采取科学、有序、有效的应对措施,是控制疫情扩散、减少经济损失最直接最高效的手段。
根据病毒的发展情况,潜伏期时病毒主要存在于唾液中,此阶段的病毒传染性不高,无明显的临床症状,部分猪会出现食欲不振或体温略微升高等,仅靠临床症状不能进行准确的判断。通过检测手段,可较好地解决这个问题。随着PCR 技术在兽医上的成熟运用,可以利用q-PCR 检测技术来判定猪是否有感染ASFV。抗原检测结果要达到较高的准确性,规范操作是关键。
1)样品采集:采样时最好采集猪的咽拭子,由本栋舍的工人负责采集,其他兽医或工人不能进入猪舍内;采集的样品用自封袋装好之后需要更换手套再进行操作,避免样品间的相互污染和人为将病毒带进猪舍内;
2)样品保存:唾液中的病毒含量低,核酸容易降解,在样品收集后需要加入唾液保存液,并及时置于冷藏的环境下,防止唾液内的ASFV 降解,若不谨慎处理就不能将检测结果作为一个有效的判定依据;
3)ASFV 检测试剂的选择:2019 年6 月农业农村部公布了一批非洲猪瘟现场快速检测试剂名单,采购时需从正规途径购买合格的检测试剂盒,以确保检测结果的准确性。在进行Q-PCR 检测ASFV 抗原实验时,需要注意气溶胶污染而影响检测结果的准确性,这一点对于自建实验室的养殖场一定要更加注意,避免误判,关键时期最好送样到正规检测公司复核。
通常,临床症状结合检测手段,可有效地筛选出感染病毒后处于潜伏期的猪,然后将阳性猪扑杀。如果是定位栏的猪则将该定位栏的相邻两头猪一同扑杀;若同一条料线上头端的猪感染,则该料线上所有猪只扑杀;若活动栏的猪只发现处于感染的潜伏期,则扑杀整个活动栏的猪只。
在扑杀完成后,需要对猪栏进行全面细致地清洗消毒,若所有的猪只都清空,可选择用烧碱加石灰水进行全场消毒,半年后可复养;若只处理部分猪只,则在相应的栏舍进行带猪消毒,市场上销售的成分为过硫酸氢钾的消毒药都可使用,注意不使用戊二醛或烧碱这类强腐蚀性的消毒剂。
非洲猪瘟病毒在环境中耐受性很强,可存活较长时间,猪场选址以及周围环境消毒是防控非洲猪瘟十分重要的环节。猪场的选址要远离公路主干道、屠宰场及农贸市场。场内应分生活隔离区、生活区、生产区和隔离区,工人在生活隔离区居住并消毒后可进入猪场生活区;从猪场生活区进入生产区需要严格消毒,此阶段需要沐浴更衣换鞋。在进入猪舍时还需更换鞋,防止将高危猪舍的病毒或者细菌带到其他猪舍。工人尽量避免外出,食物由生活隔离区的人员通过窗口传递。生产区内赶猪道、出猪台、污水处理区需要严格区分,区域与区域之间的空地用烧碱或石灰消毒,水井应根据实际情况建立在猪场附近,水井的深度要穿透岩层,防止地表水的污染。
养猪场在进猪时需保证购买的猪ASFV 抗原阴性,赶猪道需要提前消毒,将猪只赶进隔离区饲养;购买的猪只在隔离舍隔离观察21d,在确认猪群健康无发病后,转入生产区正式饲养,并对隔离舍进行彻底消毒;隔离期间若猪群出现疫情,以发病隔离舍为疫点,及时无害化处理,更换场内饲料,强化对环境物品消毒,严防疫情扩散。出猪后及时对栏舍、用具、赶猪道进行彻底清洗消毒。
消毒是传染病防控的重要环节,在应对非洲猪瘟这个还未有疫苗、高度接触性的传染病的防御战中尤其重要。
车辆消毒:进猪车和出猪车最好是自购或只服务本场的车辆。有条件的养殖场可自建洗烘一体的生猪运输车辆洗消中心,车辆来装猪或接驳饲料前,要对车辆全方位立体挂泡、清洗、消毒,最好能使用70℃水,并在70℃烘干房中烘干45min 以上,方可来场。运料车司机来场后全程不得离开驾驶室。
人员消毒:除了饲养员及兽医员外,其他人员一律禁止进入猪场生产区。进场人员需洗浴、消毒、换隔离服进入生活隔离区,隔离3~5d 后,洗澡更换入场服装进入场内。入场人员禁止携带个人物品进入生产区,各区人员不可到其他区域活动;进入相应的工作区后,需要更换特定的工作鞋和手套,在该区域门口消毒后进行工作,避免ASFV 在不同生产区之间的循环传播,降低疫病传播风险。
物料消毒:进入场内的所有物品、食物、饲料需不定期检测ASFV 抗原,根据不同物料属性,采取熏蒸、臭氧、紫外线消毒,如药品和疫苗需除去外包装,并于消毒室内用紫外照射和次氯酸消毒后方可入场;或尽量延长备货期后再使用。饲料重点检测鱼粉中是否存在ASFV,选择多个点进行样品采集。人员食物上尽量避免猪肉,其他肉类在煮熟后入场。
猪舍消毒:进猪前舍内充分消毒,猪入场后选择合适消毒剂定期带猪消毒,出猪后定位栏舍消毒,舍内消毒注意天花板、漏粪地板死角、墙角以及排污口的消毒。
猪场周围消毒:安排专人负责猪场外围以及出猪台外围的消毒,出猪台的污水不能流向猪场内。定期喷洒除草剂,方便消毒的进行,可用烧碱加上石灰水进行消毒,可以直观看到是否消毒到位。
猪场采用封闭式围墙,排水口内衬铁丝网,猪舍门口设置挡鼠板,专人负责把关,车辆经过后随时关闭;饲料库、猪舍、出风口等悬挂防鸟网;猪舍靠门处挂灭蝇灯,夏天猪舍内点蚊香和灭蝇香,场内定期喷洒杀虫剂,以灭蜱为主。定期做好检查,防止外界生物进入场内,避免ASFV 侵入。
非洲猪瘟发生至今已上百年,当前全球尚无有效的药物和疫苗可用来防控该病。目前,我国非洲猪瘟防控形势依然严峻,需进一步加强对非洲猪瘟疫苗的研究和防控措施的探索。在尚无有效药品和疫苗控制疫情的大环境下,养殖场自身的饲养管理和生物安全水平尤为重要。建立健全养殖场内的生物安全体系,提升场区和周边环境的生物安全水平,可有效防止非洲猪瘟病毒的传播和扩散。要提升畜牧兽医人员的生物安全意识,定期对相关人员开展生物安全防控知识培训,增强应急处置能力,一旦发现可疑病例,及时上报,积极处理,避免疫情扩散。有条件的养殖场可以积极创建非洲猪瘟无疫小区或非洲猪瘟净化场,并加以维持。