宜宾烟区烟草根黑腐病发病条件及品种抗性评价

鄢 敏，杨 洋，杨懿德，周本国，李林秋，许大凤*

(1.四川省烟草公司宜宾市公司,四川宜宾 644600；2.安徽省农业科学院烟草研究所,安徽合肥 230031)

烟草根黑腐病是由基生根串株霉菌[(Berk.et br.)Fer.]引起的一种烟草生产重要根茎部病害，主要使根呈特异性黑色坏死从而导致烟苗死亡或地上部分生长不良。烟草根茎部是烟叶获取营养物质的源头和通道，根黑腐病害的发生将严重影响烟叶的产量和质量。研究表明，烟草根茎部病害的发生是土壤微生物造成的，土壤中病原菌的含量直接影响烟草根腐病的发生。土壤内部环境对烟草根黑腐病的发生也有一定的影响，土壤pH是影响病原菌存活的重要因子，根茎类病害的发生与土壤pH密切相关。如果大田管理不到位，土壤肥力不够，烟苗瘦弱，田间排水不畅，雨后积水严重，土壤湿度较大，且气温合适，会导致根黑腐病害发生。因此，笔者从土壤pH人手，同时结合土壤的湿度、肥力和接种体浓度来明确烟草根黑腐病的发生条件及影响因素，从而有效控制烟草根黑腐病的发生；结合选育抗病品种，明确不同烟草品种之间的抗病性差异，依据各地种植条件，合理选择抗病品种，从而减少病害的发生，以期为宜宾烟区烟草根黑腐病的可持续、绿色防控奠定理论基础。

1 材料与方法

烟草根黑腐病菌[(Berk.et br.)Fer.],由安徽农业大学植物保护学院病理研究室分离纯化获得。

供试烟草品种由安徽省农业科学院烟草所提供，品种分别为K326、云烟87、云烟85、云烟97、中烟100。

供试烟草采用灭菌土育苗，待长到4片真叶时移栽于口径9 cm营养钵中，每钵1株，25 ℃恒温培养至5～7片真叶，准备接种。

用1 mol/L KOH和1 mol/L HCl溶液及灭菌水对营养钵中的土壤进行pH调节，使土壤pH分别为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0和9.0，每处理15株，设3次重复，移栽烟苗(云烟87，6～7片真叶)。用灭菌水制备烟草根黑腐孢子悬液，孢子浓度为10～10个/mL，用灭菌的剪刀斜切烟草根部造成伤口，取2 mL孢子悬浮液灌根进行接种。每7 d测定一次土壤pH，保持土壤pH不变，25 ℃恒温培养。接种后第20天检查发病情况, 并参照烟草行业标准YC/T 39—1996进行分级，计算病情指数。

将烘干的土样分别加水称重，将其土壤含水量分别调为20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%，每天称重补水。移栽烟苗(云烟87，6～7片真叶)。用灭菌水制备烟草根黑腐孢子悬液，孢子浓度为10～10个/mL，对烟苗进行接种(方法同“.”)，每处理15株，3次重复，25 ℃恒温培养。接种后第20天检查发病情况, 并参照烟草行业标准YC/T 39—1996进行分级，计算病情指数。

用灭菌水制备烟草根黑腐病原菌孢子悬液，孢子浓度分别为10、10、10、10、10个/mL。移栽烟苗(云烟87，6～7片真叶)，对烟苗进行接种(方法同“.”)，每处理15株，重复3次，25 ℃恒温培养。接种后第20天检查发病情况, 并参照烟草行业标准YC/T 39—1996进行分级，计算病情指数。

烟苗(云烟87)移栽前，在营养钵土中加入尿素，设置5个不同处理，分别为10、15、20、25、30 g/m，移栽烟苗，每处理15株，重复3次。用灭菌水制备烟草根黑腐孢子悬液，孢子浓度为10～10个/mL，对烟苗进行接种(方法同“.”)，25 ℃恒温培养。接种后第20天检查发病情况, 并参照烟草行业标准YC/T 39—1996进行分级，计算病情指数。

供试烟草K326、云烟87、云烟85、云烟97、中烟100，采用灭菌土育苗，待长至4片真叶时移栽于口径为9 cm营养钵中，每钵1株，25 ℃恒温培养至6～7片真叶，准备接种。用灭菌水制备烟草根黑腐孢子悬液，孢子浓度为10～10个/mL，用灭菌的剪刀斜切烟草根部造成伤口，取2 mL孢子悬浮液灌根进行接种，对照株接清水，每个处理15株，3次重复。25 ℃恒温培养，保持土壤湿润。接种后第20天检查发病情况, 并参照烟草行业标准YC/T 39—1996进行分级，计算病情指数，进行不同品种室内抗性差异测定。

采用DPS数据处理软件对试验数据进行统计分析，差异显著性采用单因素方差分析及LSD法检验，以病情指数衡量烟草品种发病严重度，并划分抗性类型。

2 结果与分析

土壤pH对烟草根黑腐病发生有一定的影响(表1)。土壤pH为 4时，不适合烟草根黑腐病的发生，病株率为0；当土壤pH 为5时，病株率及病情指数最高，分别为85.10%和52.70，与其他pH条件下病株率和病情指数达显著差异水平(<0.05),但当土壤pH为5和9时，其病株率无极显著差异(>0.01)；随着土壤pH的增大，烟株的病株率和病情指数逐渐减小，当pH为7时，烟株的病株率和病情指数达到最小，分别为40.73%和15.73；随着pH的增加，烟株的病株率和病情指数逐渐增大，当pH为9时，烟株的病株率和病情指数分别为70.36%和34.14，仅次于土壤pH 5。因此，烟草根黑腐病的发生与土壤pH有一定的关系，弱酸、碱性的土壤条件有利于病害的发生。

土壤含水量影响烟草根黑腐病发生(表2)。当土壤含水量为20%、30%时，不利于烟株发病，病株率为0；当土壤含水量≥40%时，随着含水量的增加，病株率越大，病情指数越高，烟草根黑腐病发生越严重；当土壤含水量达到80%时，病株率达到最大，为88.9%，病情指数达到最高，为60.2；但土壤含水量为70%时，病株率为77.8%，其病株率与含水量80%差异不显著。因此，烟草根黑腐病的发生与土壤含水量密切相关，土壤含水量越大，烟草根黑腐病发生越严重。

表1 pH对植株发病的影响

表2 不同土壤含水量对植株发病的影响

由表3可知，接种体浓度为10个孢子/mL时病株率为0，当接种体浓度≥10个孢子/mL，植株开始发病，且随着接种体浓度的增大，烟株病株率逐渐增大。接种体浓度为10个孢子/mL时，烟株的病株率最高，病情指数达到最大；且接种体浓度为10个孢子/mL时，其病株率为77.78%，与接种体浓度为10个孢子/mL时的病株率和病情指数差异不显著。因此，烟草根黑腐孢子接种体量影响烟草根黑腐病的发生，当浓度低于10个孢子/mL时,不利于烟株发病，当接种体浓度≥10个孢子/mL时，接种体浓度越大，烟株病株率越高，病情指数就越大，根黑腐病越严重。

表3 不同接种体浓度对植株发病的影响

由表4可知，施氮组烟草的平均病株率和病情指数均高于不施氮组。随着施氮量的增加，病株率逐渐增多，病情指数逐渐增大，当施氮量达25 g/m时，其病株率达到最大，病情指数达到最高，分别为85.18%、52.80。但当施氮量达30 g/m时，其病株率反而降低，病情指数减小，分别为66.66%和37.90。因此，氮肥的施加会加重烟草根黑腐病的发生。

表4 施氮量对植株发病的影响

由表5可知，不同烟草品种烟草根黑腐病抗性差异显著。供试5个烟草品种的病株率为51.85%～96.3%，病情指数为20.37～62.97，其中云烟87的病情指数最高，为62.97，为高感品种；中烟100病情指数为20.37，为抗性品种；云烟85和K326为中抗品种，云烟97为感病品种，未测到高抗品种。

表5 不同烟草品种烟草根黑腐病的抗性差异

3 结论与讨论

该试验结果表明，偏酸性、碱性土壤有利于烟草根黑腐病的发生，而强酸性的土壤环境有利于控制病害，与魏国胜等的研究结果一致。Meyer提出，土壤抑菌效果是土壤碱性饱和度、铝离子浓度、土壤 pH共同作用的结果；罗文富指出，影响烟草根黑腐病发生的土壤因素多样，不同地区与抑病有关的土壤因素和抑病机制可能不同；因此生产上不仅要通过调节土壤酸碱度来控制根黑腐病的发生，更要结合应用土壤抑制机制来达到防治病的目的。土壤含水量的增加将会加重烟草根黑腐病的发生，即在低洼阴湿的田块，此病易暴发，在田间生产中，及时采用行间深松和中耕松土的方法，增强土壤通气透水性，以控制病的发展；孢子浓度在10～10个孢子/mL，浓度越大，发病率越高，病情越严重，在田间生产中，前茬作物要及时清理干净，避免病残体在田间腐烂，而导致烟苗被侵染，减少土壤中病原孢子的残留；一定范围内，氮肥的施加加重了烟草根黑腐病的发生，左丽娟等研究发现，传统施肥中，钾肥的增施可以显著提高根黑腐病抗性。因此，田间管理中，可以适当增施钾肥、腐熟的有机肥，增强烟草的抗病力，从而减轻根黑腐病的发生。

烟草根黑腐病给烟草生产造成了巨大的经济损失，选育抗病品种是病害防治最经济有效的措施；成功培育的抗根黑腐病的白肋烟品种，使病情得到较大控制，是抗病育种的重要抗原。该试验5个供试品种中未发现高抗品种，窦彦霞等研究表明，我国不同地区来源烟草根黑腐病菌致病力分化明显，并具有多样性，伴随着病原菌不断发生生理小种的变异，以及不同地区生态条件的不同，部分品种在不同种植区域，抗感性表现也不同，抗病品种的选育及抗性评价有待进一步研究。