肿瘤干细胞标志物SOX2 在甲状腺癌中的临床应用价值

孙红岗 何丽钦 夏颖

甲状腺癌是起源于甲状腺滤泡上皮的一种恶性肿瘤，是头颈部最常见的恶性肿瘤之一，发病率呈逐年上升趋势[1]。最常用的治疗方法为手术切除，但有部分晚期患者容易复发，因而早期诊断具有重要的意义。目前，尚没有针对甲状腺癌诊断的特异性标志物。SOX2 在肝癌、恶性黑色素瘤、乳腺癌的发生发展都有密切的关系[2～4]，但在甲状腺癌中鲜有报道。本次研究旨在分析SOX2 在甲状腺癌诊断治疗中的应用价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2018 年1 月至2021 年12 月期间绍兴市人民医院行甲状腺切除的确诊为甲状腺癌150 例患者为肿瘤组，其中男性71 例、女性79 例；平均年龄（43.62±4.85）岁；收集本院同期经病理确诊的甲状腺良性疾病患者30 例为良性组，其中男性18 例、女性12 例；平均年龄（48.32±3.68）岁。两组的性别与年龄比较，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。本次研究通过医院伦理委员会审批同意，且患者均签署生物样本研究同意书。

1.2 方法 采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbnent assay，ELISA）测定两组的血清SOX2 水平。采用免疫组化的方法检测两组的SOX2 阳性表达，取5 cm3的组织切成4 mm片，42 ℃恒温箱中烘烤过夜；二甲苯脱蜡，100%乙醇浸泡，水化，在甲醇中与过氧化氢孵育消除内源性过氧化物酶活性的作用，抗原修复液修复抗原磷酸盐缓冲兴中孵育1 h 以封闭蛋白。SOX2 抗体用含1%胎牛血清和5%山羊血清的溶液按1∶100 稀释，4 ℃过夜；用免疫组化法检测结合抗体，显色，苏木精复染。SOX2 的表达强度根据染色深度分为4 级：无染色者为阴性（-）、浅黄色者为弱阳性（+）、棕黄色者为中等度阳性（++）、棕褐色者为强阳性（+++）。+～+++为SOX2阳性标本，以此计算其阳性表达率。

同时通过医院内部数据库收集肿瘤组患者的术前甲状腺球蛋白（thyroglobulin，TG）、促甲状腺激素受体抗体（thyroid stimulating hormone receptor antibody，TRAb）检测数据，临界值按照试剂说明书TG＞8 ng/ml，TRAb＞5 mg/ml判读为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS 16.0 统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（）表示。组间计量资料比较采用t检验；计数资料比较采用χ2检验。采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic，ROC）分析SOX2、TG 和TRAb 对甲状腺癌的诊断价值。设P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清中SOX2水平及阳性率比较见表1

表1 两组血清中SOX2水平及阳性率比较

由表1可见，肿瘤组血清中的SOX2水平及阳性率均高于良性组，差异均有统计学意义（t=3.21，χ2=36.11，P均＜0.05）。

2.2 血清SOX2、TG、TRAb 诊断甲状原癌的ROC 曲线分析见图1

由图1可见，发现SOX2诊断甲状腺癌的临界值为31.95 pg/ml，诊断的曲线下面积为0.79（95%CI0.70～0.87）；同时，血清TG 和TRAb 对甲状腺癌的诊断的曲线下面积分别为0.52（95%CI0.41～0.64）和0.69（95%CI0.58～0.79）。

图1 血清SOX2、TG、TRAb诊断甲状腺癌的ROC曲线

3 讨论

肿瘤干细胞又称肿瘤启动细胞，是一群具有自我更新能力和多能性的恶性肿瘤细胞亚群[5]。肿瘤干细胞具有干细胞的许多特征，肿瘤干细胞与肿瘤发生、发展、侵袭、转移、耐药都有重要关系[6,7]，通过促进肿瘤的复发和转移导致患者预后不良。多能转录因子（SOX2、Nanog、c-Myc 和Oct4）参与转录肿瘤干细胞自我更新[8,9]。Tsunedomi 等[10]研究发现SOX2 是诱导多功能干细胞重要的转录因子。SOX2在肿瘤的发展和肿瘤干细胞的调节中起着重要作用。

由于甲状腺癌缺乏有效的诊断治疗检测标志物，传统的细针穿刺有创检测患者不容易接受，还有造成癌组织播散的风险。近年许多研究都表明肿瘤干细胞与肿瘤微环境与肿瘤的发生、发展有密切关系，因此，找出甲状腺癌干细胞中的关键标志物与甲状腺癌诊断转移的关系，对治疗和预后具有很重要的意义。

本次研究从肿瘤干细胞标志物SOX2 的角度入手，在组织与血清中研究SOX2 对于甲状腺癌的影响，揭示其在甲状腺癌诊断治疗中的作用。本次研究结果显示，肿瘤组患者血清中的SOX2 水平及阳性率均高于良性组（P均＜0.05），表明甲状腺癌组织中SOX2 的表达明显强于良性组织，由此推断SOX2可能是由甲状腺癌组织分泌入血，提供血清学诊断的依据。并且可能与肿瘤进展有关系，对于判断甲状腺癌分期及组织切除是否完全、复发有一定的意义。

目前，临床上没有诊断甲状腺癌的特异性指标。一般情况下应用TG[11]、TRAb[12]作为甲状腺癌检测的非特异性指标。本次研究结果显示，SOX2诊断甲状腺癌的临界值为31.95 pg/ml，曲线下面积为0.79（95%CI0.70～0.87），而TG、TRAb 诊断甲状腺癌的曲线下面积分别为0.52（95%CI0.41～0.64）和0.69（95%CI0.58～0.79）。由此可见，SOX2 的诊断效能更具有优势，具有诊断甲状腺癌的意义。

综上所述，SOX2 在甲状腺癌血清中的表达升高，SOX2 对甲状腺癌诊断效能较高，血清中SOX2有可能可以作为甲状腺癌诊断及检测预后的一个指标。本次研究由于样本数量的限制还具有一定的局限性，以后将继续联合多中心以更多的样本数量，以及与临床分期相关性等做进一步研究。