5种杀菌剂混配对草莓细菌性角斑病防治效果研究

杨振华，缑一杰*，王新宁

(1.杨凌职业技术学院 生物工程分院，陕西 杨陵 712100；2.延安向新农业科技有限公司，陕西 延安 716000)

草莓(Fragariaananassa)被誉为“水果皇后”，营养价值高，在北方利用设施越冬栽培生产，11月底即可上市，经济价值高。但近几年，角斑病成为草莓生产中危害严重的细菌性病害，由于种苗退化及育苗期多雨等造成该病在生产田大量爆发，其病原菌是草莓角斑病菌(Xanthomonasfragariae)，属于薄壁细菌门(Gracilicutes)、假单胞杆菌科(Pseudomonadaceae)、黄单胞杆菌属(Xanthomonas)[1]。该病发病初期，叶片出现不规则的红褐色，湿度大时叶背可见溢有菌脓，随着时间的推移，病菌随着叶柄下移到植株根冠茎部，茎基部侵染后，组织坏死，植株根系营养无法供给到地上部分，植株出现“断头”现象，因此又称“断头病”[2]。据统计，2021年陕西关中地区约30%的草莓园区不同程度地发生了细菌性角斑病侵染植株现象，其中约10%的园区死苗率竟达100%。

化学药剂因为操作简单、使用方便、见效快等突出优点，在不同物种的生产管理中被广泛使用，如番茄(Solanumlycopersicon)[3]、黄瓜(Cucumissativus)[4]、苹果(Maluspumila)[5]、核桃(Juglansregia)[6]等。段永华等[7]对草莓细菌性角斑病及田间发病规律进行了调查研究，提出化学防治与农业防治并举措施。杨万凤等[8]研究表明，72%农用链霉素可溶性粉剂对草莓细菌性角斑病有一定的防治作用，最低有效浓度为 18.75 μg·mL-1。孙雪梅等[2]用宁南霉素、中生菌素、春雷霉素、四霉素和乙蒜素5个生物单剂对草莓进行蘸根处理，能够有效预防细菌性角斑病。陕西设施草莓产业起步较晚，本研究在前人研究的基础上，选择4种化学杀菌剂(春雷霉素、噻唑锌、噻唑铜、噻霉酮)和1种微生物杀菌剂(多粘类芽孢杆菌Paenibacilluspolymyxa)进行混配，通过发病植株叶面喷施和灌根的处理方式，研究不同混配方式对草莓细菌性角斑病的防治效果，为陕西省设施草莓的角斑病防治提供科研依据。

1 材料与方法

1.1 试验场地

试验选择在杨凌示范区五泉镇崔家寨村草莓园，于2021年9月2日定植红颜、章姬2个品种。试验地土壤pH为8.0，有机质2%，水解N 103 mg·kg-1，有效P 57.2 mg·kg-1，速效K 122 mg·kg-1。

1.2 供试材料

于2021年9月20日调研发现草莓植株大面积感染细菌性角斑病，通过前期筛选，选出1 400株发病程度相似植株，其中红颜700株，章姬700株。

1.3 供试药剂

噻唑锌 30%悬浮剂(德国巴斯夫)；春雷霉素 2%水剂(上海沪联)；噻唑铜30%悬浮剂(浙江东风化工厂)；3%噻霉酮水分散粒剂(陕西西大华特科技实业有限公司)；多粘类芽孢杆菌KN-03 悬浮液(山东阵地)。

1.4 仪器

G35-25L电动喷雾机，LI6400光合系统测定仪、卷尺、天平。

1.5 试验设计

试验设置6个处理和1个空白对照处理，每个处理200个病株(章姬100株，红颜100株)，空白对照喷等量清水。间隔10 d施药1次，共施3次。施药时间分别为9月25日、10月5日、10月15日。分别于第1次施药后4 d、第2次施药后7 d、第3次施药后11 d调查病情。药剂混配方式及处理方法见表1[9]。

表1 不同药剂配比及处理方法

1.6 项目测定与方法

1.6.1 角斑病防效效果测定 细菌性角斑病病情分级标准如下：0级，无病斑；1级，病斑面积占整个叶片面积的6%以下；3级，病斑面积占整个叶片面积的6%～10%；5级，病斑面积占整个叶片面积的11%～20%；7级，病斑面积占整个叶片面积的21%～50%；9级，病斑面积占整个叶片面积的50%以上[10]。病情指数、防效、发病率的计算方法如下：

病情指数=∑(各级病叶数×代表数f值)/(总叶数×最高病级值)×100%；

(1)

防效=(对照病情指数-处理区病情指数)/(对照病情指数)×100%

(2)

发病率=发病植株/调查总植株×100%。

(3)

1.6.2 营养生长、生殖生长指标测定 显蕾期前11月1日统计每个处理下章姬、红颜的营养生长、生殖生长指标测定，包括株高、叶柄长、叶面积、花序长、花枝数、花蕾数。

株高：草莓植株基部至叶片最高处之间的距离。

叶柄长：为心叶向外第3片展平的功能叶的叶柄长度。

叶面积：心叶向外第3片展平的功能叶面积。

1.6.3 草莓叶绿素含量、净光合速率、蒸腾速率及根系活力测定 于草莓第1片新叶成龄后测定叶绿素含量、净光合速率、蒸腾速率及根系活力。净光合速率(PN)及蒸腾速率(E)，采用 Li6400光合系统测定仪测定；叶绿素，采用丙酮浸提法测定；根系活力，采用 TTC法测定。

1.6.4 草莓产量测定 在草莓整个生长期，其他农艺管理措施一致。待头茬果成熟后每个处理选具有代表性的连续20株作为调查对象，用天平测其单株产量，并取平均值。

1.7 数据处理

采用Excel 2010和SPSS 19.0对数据进行统计分析；采用Origin 2021进行绘图。

2 结果与分析

2.1 不同处理对细菌性角斑病的防治效果分析

对‘章姬’草莓进行药剂处理(表2)，第1次施药后4 d，T6处理的防效可达83.56%，显著优于其他处理；T1、T2、T3、T4、T5的防效分别为62.11%、63.45%、65.25%、78.23%。第2次施药后7 d，T4、T5、T6处理的防效都可达85%以上，均显著优于T1、T2、T3处理。第3次施药后11 d，T4、T5、T6处理的防效都可达90%以上，以T5、T6处理效果最佳，防效分别为95.92%、94.56%，二者差异不显著。同时，6组处理都大大降低了病苗率，其中T6处理的病苗率低至10.23%。

表2 不同处理对章姬品种细菌性角斑病的防治效果

对‘红颜’草莓进行药剂处理(表3)，第1次施药后4 d，T6处理的防效可达84.36%，显著优于其他处理。第2次施药后7 d，T4、T5处理的防效也大幅度提高、与T6处理的防效都可达85%以上，三者差异不显著。第3次施药后11 d，T6处理的防效可达95.26%。同时，6组处理都大大降低了病苗率，T6处理的病苗率为18.21%。

表3 不同处理对红颜品种细菌性角斑病的防治效果

2.2 不同处理对营养生长、生殖生长影响

由表4可见，对章姬草莓进行药剂处理后，不同处理对其营养生长及生殖生长的影响十分明显，各项指标均优于对照。营养生长方面，T5、T6处理下的草莓株高分别可达24.21、23.62 cm，显著优于对照和其他处理。生殖生长方面，T5处理下草莓的花序长、花枝数分别为25.65 cm、3.9个，优于其他处理；T6处理下的草莓叶柄长和叶面积分别为18.23 cm、49.26 cm2，营养生长状况；而T6处理下的花蕾数最多，达到19.3个。

表4 不同处理对章姬草莓营养生长、生殖生长的影响

由表5可见，对红颜草莓进行药剂处理后，各项指标均优于对照。营养生长方面，T6处理下的草莓株高和叶柄长分别为23.62、17.56 cm，为最佳；T5、T6处理下的草莓叶面积分别为48.10、48.16 cm2，无明显差异。生殖生长方面，T5处理下的草莓生长指标均为最佳，花序长、花枝数、花蕾数分别为14.80 cm、2.9个、29.8个。

表5 不同处理对红颜草莓营养生长、生殖生长的影响

2.2 不同处理对净光合速率、叶绿素含量、蒸腾速率及根系活力的影响

由图1可以看出，对章姬、红颜草莓进行不同药剂处理后，对其净光合速率、叶绿素含量、蒸腾速率及根系活力的影响十分明显，6种处理的各项指标相较于对照均大幅度提高。

注：相同字母表示差异不显著，不同字母表示差异显著。

2.3 不同处理对章姬、红颜产量的影响

由图2可以看出，对章姬、红颜草莓进行不同药剂处理后，产量的影响十分明显，6种处理的产量相较于对照均大幅度提高。对照组的章姬、红颜草莓产量仅分别为0.2、0.24 kg·株-1。而经过药剂处理后，每组处理的产量均达到0.3 kg·株-1以上，T6处理下，章姬、红颜草莓的产量达到0.6、0.57 kg·株-1。

图2 不同处理对章姬、红颜草莓产量的影响

3 结论与讨论

将生产上常用的4种化学杀菌剂和1种微生物杀菌剂混配成6组处理后，进行田间药效试验对比，测定不同处理对草莓细菌性角斑病的防效。结果表明，噻霉酮、春雷霉素和多粘类芽孢杆菌对草莓细菌性角斑病有较好的防治效果，三者作用机制不同。春雷霉素为农用抗生素，噻霉酮为广谱杀菌剂，二者复配可以协同增效。近年来，由于生产者对化学杀菌剂的不科学使用，常常造成病原菌抗药性，同时带来一系列环境和健康问题。基于此，研究者寻找了许多生物防治的方法来替代化学杀菌剂的使用，并颇有成效[11]。用生防菌进行生物防治是一种高效绿色的植物病害防治办法，常见的生防菌种主要分为细菌、真菌及放线菌[12]。多粘类芽孢杆菌是植物生产中一种有效的拮抗菌和促生菌，具有固氮能力的革兰氏阳性细菌，是可免做安全鉴定的一级菌种，其能够通过自身代谢产生具有广谱拮抗作用的代谢产物，有效抑制农作物病原菌，还可促进作物生长发育并提高产量[13-14]。

目前，生产上对草莓细菌性角斑病的防治措施有限，常用春雷霉素、噻唑锌、噻霉酮等杀菌剂进行叶面喷施防治，如此也带来一定的抗药性和农残问题[15-16]。综合评价表明，化学类单剂叶面喷施用于防治草莓细菌性角斑病不是最佳选择。本研究在此基础上，用生防菌“多粘类芽孢杆菌KN-03”进行灌根处理，大大提高了防治效果和产量，为防治草莓细菌性角斑病提供了新思路。

对于章姬、红颜草莓，T1、T2、T3处理对草莓细菌性角斑病田间防治药效相对表现较差，原因在于以上3种处理仅单独使用2种杀菌剂进行叶面喷施，已产生了抗药性，与其他处理添加多粘类芽孢杆菌灌根相比，防治手段较为单一。T5处理和T6处理的防治效果最佳，同时2种处理下营养生长和生殖生长的各项指标也均有显著提升；但T6处理的草莓产量优于T5处理。

综上，在进行草莓角斑病的防治时，抓住施药的关键时期，即在发病初期采用叶面喷施3%噻霉酮水分散粒剂和2%春雷霉素，同时用多粘类芽孢杆菌KN-03 300倍稀释液灌根的方式，间隔10 d、连续施用3次，能够提高对角斑病的防治效果，并控制病菌抗药性的产生。