安 敏, 马 艳, 刘志强, 张海雷, 汪建国, 杨开伦*
(1.新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐 830052;2.新疆上品美羊科技有限公司,新疆昌吉 831100)
湖羊具有多胎性的繁殖特征(赵有璋,2011)。初生重会随着产羔数量增加而减少,单羔初生重最高5.9 kg,多羔湖羊最低体重1.8 kg,并且会影响此后的生长发育(潘洋,2018)。羔羊初生重由妊娠期获取的营养物质所决定,胎儿在母体内生长发育所需营养均由临时器官胎盘提供。瓜氨酸是动物细胞合成精氨酸的前体,精氨酸家族成员在胎儿体液中与妊娠前半期胎盘一氧化氮和多胺的最大合成有关,此阶段胎盘生长最快(Wu等,2013a;Wu等,2013)。妊娠早期母羊日粮中添加0.75 g/kg体重的精氨酸,可提高羔羊出生重和存活率(Zeitoun等,2016)。母猪补喂精氨酸可提高产奶量(Wu等,2018)。精氨酸在瘤胃具有极高的降解率,而瓜氨酸在绵羊、牛的瘤胃中不被微生物降解(Gilbreath等,2020;Gilbreath等,2019)。根据动物体内瓜氨酸与精氨酸之间的代谢转化,这就为反刍家畜通过补喂瓜氨酸来实现补喂精氨酸的研究和应用提供了可能性。因此,本试验选择妊娠90 d的湖羊母羊,通过测定母羊产羔性能、泌乳量和乳成分及产后母羊繁殖激素,探究补喂瓜氨酸对母羊繁殖性能和泌乳性能的影响,为瓜氨酸在繁殖母羊中的应用及深入研究提供科学依据。
1.1 动物试验地点和时间 本试验于2021年5月22日-2021年9月5日在新疆呼图壁县(新疆上品美羊科技有限公司)进行。
1.2试验设计 试验选取妊娠90 d的湖羊母羊50只,随机分成2组,每组25只。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加瓜氨酸10 g/d进行补喂。试验一直进行到母羊产后45 d。
1.3 饲养管理 试验期间,母羊妊娠期至断奶每天每只母羊TMR为2.4 kg,自由饮水及舔盐砖。母羊每天09:00、19:00各饲喂1次,试验组补喂瓜氨酸10 g/d,分为两等份拌入TMR中饲喂。母羊TMR原料及营养成分见表1。
表1 母羊TMR原料及营养成分(原料成分比例)%
羔羊从第21日龄开始补喂颗粒料,颗粒料主要由玉米、豆粕、乳清粉、磷酸氢钙、石粉、氯化钠、微量元素、维生素、氨基酸等组成。羔羊颗粒料营养成分(干物质基础):干物质88.06%、粗蛋白质20.21%、粗脂肪2.19%、粗灰分7.24%、酸性洗涤纤维5.55%、中性洗涤纤维12.44%、钙1.41%、磷0.41%。
1.4 指标测定
1.4.1 母羊产羔性能和羔羊增重的测定 母羊分娩时记录初生重、产羔数、产活羔数、断奶前存活数。羔羊45日龄早晨09:00进行称重并记录体重,计算羔羊总增重、平均日增重和断奶前存活率。
1.4.2 母羊泌乳量的测定 采用羔羊哺乳前后体重差法测定母羊分娩后16~30 d的泌乳量,即母羊分娩后第16天早晨07:30将羔羊与母羊隔离,每隔3 h将羔羊称重再放到母羊处自由哺乳,每次哺乳10~15 min,哺完乳后立即隔离并称重,羔羊每日每次哺乳前后2次体重之差即为其每次哺乳量,前后质量差即为当日泌乳量。哺乳时间分别为10:30、14:00、17:30、21:00,期间纯母乳饲喂。
1.4.3 乳样采集及乳成分的测定 通过人工挤乳方式采集试验母羊产后第1、7、15、22天和30天乳样,采集时间为07:00、13:00和20:00,并将同一天乳样混合装置30 mL乳样瓶,置于-20℃冰箱中待测。乳样进行室温解冻后,把第7天和第15、第22天和30天混合均匀,置于42℃水浴锅内预热,测定第1、7~15天和22~30天乳成分,并按照乳成分自动分析仪(杭州浙大优创科技有限公司UL40BC)的操作步骤测定乳常规成分。
1.4.4 血液采集及测定 采集母羊产后第15、30天和45天血样,进行晨饲前颈静脉采集;采集后立刻3500 r/min离心15 min,制备血浆,-20℃保存,待测定。将所采集血浆送至北京华英生物技术研究所进行测定,血浆中促黄体生成素(LH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)使用酶免法(华卫德朗DR-200BS酶标分析仪,无锡华卫德朗仪器有限公司)进行测定。
1.5 统计分析 所有数据利用SPSS 23.0软件处理,羔羊体重、乳成分和血浆激素采用独立样本t检验进行分析,利用单因素ANOVA检验泌乳量,所得试验数据结果以P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著,结果均用“平均值±标准差”表示。
2.1 补喂瓜氨酸对湖羊母羊产羔性能、羔羊增重和母羊产后16~30 d泌乳量的影响 由表2可知,与对照组相比,试验组初生重极显著提高了19.6%(P<0.01);试验组羔羊45日龄体重显著提高了6%(P<0.05),其产羔数、羔羊0~45日龄总增重、平均日增重均无显著差异(P>0.05),但试验组羔羊断奶前存活率提高了25%;试验组母羊产后16~30 d平均日泌乳量和总泌乳量分别极显著提高了19.6%(P<0.01)。
表2 补喂瓜氨酸对湖羊母羊产羔性能、羔羊增重和母羊产后16~30 d泌乳量的影响
2.2 补喂瓜氨酸对湖羊母羊产后1~30 d乳成分的影响 由表3可知,与对照组相比,试验组母羊产后第1天乳蛋白率极显著提高了21.0%(P<0.01)及第7~15天、20~30天乳脂率分别极显著提高了22.0%、16.8%(P<0.01);此外,试验组母羊产后第7~15天灰分显著提高了5%(P<0.05),其余乳成分均无显著差异(P>0.05)。
表3 补喂瓜氨酸对湖羊母羊产后1~30 d乳成分的影响%
2.3 补喂瓜氨酸对湖羊母羊产后血浆激素的影响 由表4可知,与对照组相比,试验组母羊产后第15天血浆中PRL含量极显著提高了167%(P<0.01);试验组母羊产后第15天和第45天血浆中LH含量分别显著提高了86.3%和34.4%(P<0.05);此外,试验组母羊产后第15天血浆中P4含量显著降低了67.5%(P<0.05),其余激素含量对照组与试验组均无显著差异(P>0.05)。
表4 补喂瓜氨酸对湖羊母羊产后血浆激素的影响
3.1 补喂瓜氨酸对湖羊母羊繁殖性能的影响本试验显示,妊娠90 d湖羊母羊饲粮中添加瓜氨酸,可显著提高羔羊初生体重和断奶前存活率。母体营养对胎儿生长和存活率非常重要(Wu等,2014)。母畜妊娠期,提供适宜的营养及足量的氨基酸,对胚胎的生长发育极其重要(Wu等,1998)。瓜氨酸是一种非蛋白质氨基酸,其在尿素循环中起着重要的作用,在精氨琥珀酸合成酶及裂解酶作用下生成精氨酸(Mc等,2010),精氨酸作为一氧化氮合成前体,可以通过一氧化氮通路调节能量底物的代谢和营养物质传感信号传导。饲粮中添加L-瓜氨酸可降低断奶前仔猪死亡率(黄靓,2019);妊娠中期母羊静脉注射L-瓜氨酸对母羊胎盘活性、新生羔羊、产后羔羊发育以及羔羊胴体组成有明显影响(Kott等,2021),本试验与上述文献结果一致。本试验显示,与对照组相比,妊娠90 d湖羊母羊饲粮中添加瓜氨酸显著提高了羔羊45日龄体重,羔羊0~45日龄总增重和平均日增重均比对照组高。一方面可能是初生重会影响此后的生长发育(潘洋,2018);另一方面羔羊通过吸允母乳获得足够的营养物质,泌乳母猪饲粮中添加精氨酸可促进哺乳仔猪体增重(Zhu等,2016)。因此,妊娠90 d湖羊母羊补喂瓜氨酸可显著提高初生体重,改善母羊繁殖性能。
3.2 补喂瓜氨酸对湖羊母羊泌乳性能的影响充足的母乳是保证哺乳期羔羊正常发育、增强抵抗力和提高存活率的重要因素(张磊等,2020)。本试验显示,妊娠90 d湖羊母羊补喂瓜氨酸,显著提高了泌乳量。饲粮中添加精氨酸可提高母猪日均泌乳量(刘星达等,2011),本试验与该研究结果一致。其原因是瓜氨酸可促进机体内催乳素的分泌,瓜氨酸是精氨酸内源合成过程中一个重要的氨基酸,Cit转运系统和参与Cit-Arg-NO途径的酶的共定位,有利于Cit向NO的转运,增加乳腺生成乳汁所需的血流量(Bahadoran等,2020)。本试验显示,妊娠90 d湖羊母羊补喂瓜氨酸,可显著提高初乳中乳蛋白率和常乳中乳脂率,其他乳成分均高于对照组。乳腺在泌乳期间对胰岛素高度敏感(Mackle等,2000),添加胰岛素后奶牛的乳腺能够通过促进氨基酸吸收以及乳腺血液流通来增加乳蛋白产量(Fulkagawa等,1986)。乳蛋白主要受乳蛋白前体物合成影响,由乳腺内氨基酸的浓度和氨基酸的平衡性决定,氨基酸除了参与机体构成蛋白质的组成之外,还是维持机体整个乳汁分泌和代谢的主要路径。精氨酸可促进血液中胰岛素的分泌,胰岛素可能会促进乳腺对氨基酸的吸收(Burnol等,1990),母猪、奶牛日粮中添加精氨酸可提高乳中脂类产量和乳蛋白含量(Chew等,1984),本试验与上述研究结果一致。因此,妊娠90 d湖羊母羊补喂瓜氨酸,可改善母羊泌乳性能。
3.3 补喂瓜氨酸对湖羊母羊产后血浆激素的影响 泌乳期间激素水平的动态变化对维持母羊正常泌乳及泌乳后期卵巢机能恢复起重要作用,生殖激素的浓度变化还反映母羊卵巢所处的生理状态(何其宏等,2002)。本试验显示,妊娠90 d湖羊母羊饲粮中添加瓜氨酸,可显著提高母羊产后第15天血浆中PRL和LH含量,显著降低P4含量。在泌乳时,主要是P4下降,并解除了对PRL的抑制作用,使PRL浓度上升,促进泌乳。瓜氨酸可促进机体内分泌激素释放,如催乳素、胰岛素、生长素等激素(Noris等,1999)。本试验显示,母羊产后第15、30、45天血浆中PRL均高于对照组,且泌乳量显著高于对照组。目前,瓜氨酸对母羊产后血浆激素的影响研究较少,但有研究表明,妊娠期补喂精氨酸具有提高多浪母羊产后第12 h血浆中PRL含量的趋势(古力米热·穆萨,2021),本试验与该文献结果相似。LH与FSH协同促进母畜排卵,有利于母畜产后卵巢机能恢复。本试验显示,母羊产后第15、30、45天血浆中LH含量均高于对照组,其原因是瓜氨酸在机体内主要有两条代谢途径,其终产物分别为一氧化氮和多胺。一氧化氮可通过抑制LH-RH诱导LH的释放(Ceccatelli等,1993)。因此,饲粮中添加瓜氨酸可促进母羊产后血浆中PRL、LH分泌,提高母羊泌乳性能,有助于改善母羊繁殖性能。
妊娠90 d湖羊母羊饲粮中添加瓜氨酸对羔羊初生重、断奶前存活率、泌乳量、乳成分及母羊产后血浆激素分泌具有明显的改善作用,可提高湖羊母羊繁殖性能和泌乳性能。