健康老年人群尿液NAG及NAG/Crea参考范围建立的探讨

燕文敬，龚美亮，陈 瑞，焦 娇，李玉茹，王 坤

解放军总医院第二医学中心 检验科，国家老年疾病临床研究中心，北京 100853

N-乙酰-β-氨基葡萄糖酶(N-acetyl- β- glucosaminase，NAG)是细胞溶酶体内的一种酸性水解酶，在肾单位近曲小管上皮细胞内含量丰富，正常情况下尿液中NAG含量较低，肾小管受损时，会导致大量NAG释放入尿液，引起尿液中NAG升高。研究已证实尿NAG升高是肾早期损伤的敏感指标[1-3]。因尿液稀释和浓缩的影响，随机尿中成分浓度或活性检测结果重复性较差，尿肌酐(creatinine，Crea)每日排除量较为稳定，随机尿液中肌酐的浓度可以反映尿液的浓缩程度，临床上常用尿肌酐作为其他排泄物的校正因子，计算随机尿液中NAG/Crea的比值，即可及时反映肾小管受损情况，也能减少因随机尿液浓缩程度差异带来的影响，临床上得到广泛应用[4-5]。目前并没有已达成共识的老年人群尿液NAG/Crea参考范围，为了给临床诊疗提供更加完善的辅诊依据，本研究旨在探讨老年群体尿液NAG、NAG/Crea的参考范围。

资料与方法

1 资料 选择解放军总医院第二医学中心2021年4 - 7月健康查体人员体检资料。排除标准：临床诊断为糖尿病、高血压、肾功能异常、肿瘤或其他恶性疾病。

2 NAG和尿肌酐检测 采用西门子全自动生化分析仪Dimension EXL(德国，西门子医疗器械公司)，NAG检测试剂盒(京械注准20152400968)及相应校准品、质控品(北京九强生物技术股份有限公司)；尿肌酐检测试剂为西门子厂家原装试剂。

3 分组和分析指标 世界卫生组织将≥60岁人群定义为老年群体[6]。本组依此将实验对象分为青壮年组(＜60岁)和老年组(≥60岁)，比较两组人员尿液标本NAG、NAG/Crea差异性。NAG/Crea=尿NAG活性/尿肌酐浓度。

4 统计学分析 统计学处理使用SPSS19.0软件完成。符合正态分布的计量资料以±s表示，非正态分布的计量数据以Md(IQR)表示。计数资料以例数(百分比)表示，组间差异比较采用χ2检验。尿液NAG、NAG/Crea参考范围制定为2.5 ～ 97.5分位数(P2.5～P97.5)；确定参考范围制定是否需要区分性别和年龄采用Z检验，若Z＞Z*则需要分组建立各自的参考范围[7]。P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 两组尿液NAG/Crea等指标年龄比较 共纳入915例体检者，年龄分布在21 ～ 98岁，男性525例(57.4%)，女性390例(42.6%)。青壮年组419例，老年组496例。受限于单中心样本来源的局限性，两组性别组成差异有统计学意义(χ2=163，P＜0.001)，但本实验纳入对象标准和数量完全符合《WS/T 402-2012 临床实验室检验项目参考区间的制定》文件要求。尿NAG参考范围的制定不需考虑年龄因素(Z＜Z*)，尿NAG/Crea参考范围的制定需要区分年龄差异(Z＞Z*)。由表1知，两年龄段数据Z检验统计量Z明显小于临界Z*(即无统计学差异)，符合相应的定义/要求。两年龄段数据Z检验统计量Z已大于临界Z*(即有统计学差异)，佐证了相应的定义/要求。

2 两组尿液NAG/Crea等指标性别比较 尿NAG、NAG/Crea参考范围的制定均不需考虑性别因素(Z＜Z*)。见表2。

3 NAG和NAG/Crea参考范围分析 尿液NAG参考范围为3.53 ～ 24.48 U/L。尿液NAG/Crea参考范围：＜60岁为4.24 ～ 21.93 U/g·Cr，≥60老年人群为4.61 ～ 27.83 U/g·Cr。见表3。

表 1 不同年龄分组参考范围Z检验Tab. 1 Reference interval Z-test grouped by age

表 2 不同性别分组参考范围Z检验Tab. 2 Reference interval Z-test grouped by sex

讨 论

2019年末，我国60岁及以上人口约有2.54亿，占总人口的18.4%[8]。老年人群因身体功能的逐渐下降，激素水平、代谢能力等方面都异于年轻群体，所以在检验工作中，制定老年人群检测项目的参考范围尤为必要，当前已有不少研究用于制定老年人检测项目的参考范围，如红细胞计数、血浆D二聚体水平等[9-10]。目前还没有老年群体尿液NAG/Crea的参考范围。

尿NAG作为肾损伤的一个敏感度较高的指标，其升高要早于尿素氮、内生肌酐清除率、肾小球滤过率等[11-12]。研究发现当基础疾病并发症涉及肾时，尿NAG可以作为一种肾标志物用来衡量患者的病情[13-16]。最新证据表明尿NAG不仅可以反映肾小管的受损程度，还与动脉粥样硬化有较强的相关性。Kim等[17]在实验中发现，尿NAG与颈动脉内膜中层厚度高度相关，推测可能是肾小管受损后发生氧化应激反应会产生相应的物质，进一步引发斑块的聚集。

表 3 NAG和NAG/Crea参考范围Tab. 3 NAG and NAG/Crea reference ranges

本研究结果显示，随机尿NAG活性水平没有表现出年龄、性别上的统计学差异。分析其原因， NAG活性受限于随机尿液的浓缩情况而产生较大的随机误差，而尿肌酐每日排除总量较为稳定，引入尿肌酐作为修正因子，采用NAG/Crea作为评估指标可以减少因随机尿液浓缩程度不同产生的随机误差，提高临床诊断的准确性。Liu等[18]实验结果显示尿NAG活性随着年龄的增长而升高，且男性的活性要高于女性。我们认为，随机尿本身NAG活性检测结果并不稳定，另外单中心数据来源也会造成偏差，且我们的实验主要针对老年人群，从样本年龄架构上，两个实验存在不同，采用不同的试剂也可能产生偏差。Liu等的实验并没有引入尿肌酐这个校正因子做进一步比对。我们通过尿Crea比对后得出结论，尿NAG/Crea值随着年龄的增长而升高，但不同性别的差异无统计学意义。

本实验存在的局限：1)受限于单中心样本来源的局限性，性别比例差异有统计学意义，有待多中心、跨区域、大样本量数据的支持完善；2)是虽然提出了参考范围，但缺少对早期肾损伤患者的验证，下一步将进行临床验证。

综上所述，本实验初步建立了老年人群尿NAG、NAG/Crea的参考范围，其中尿NAG参考范围为3.53 ～ 24.48 U/L；尿NAG/Crea参考范围为＜60岁人群4.24 ～ 21.93 U/g·Cr，≥60岁老年人群4.61 ～ 27.83 U/g·Cr。