上皮性卵巢癌中T 淋巴细胞的浸润特征

谭金城，王羽丰，高 霞，王安阳，蒋礼伟，罗晓霞，杨家英，段杨娟

（1.昆明医科大学第三附属医院干部医疗科，云南 昆明 650118；2.昆明医科大学临床肿瘤学院，云南 昆明 650500）

卵巢癌（ovarian cancer）是最致命的妇科恶性肿瘤[1]，晚期卵巢癌患者的常规治疗手段包括肿瘤细胞减灭术和化学疗法，但仍有70%的晚期患者最终会复发并产生化学耐药性[2]，这使得免疫疗法在卵巢癌中特别有吸引力，具有强烈免疫应答的卵巢癌患者往往有更高的生存率[3]。既往已经证明了肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocyte，TIL）与化疗疗效和患者预后有关[4-6]，TIL 被认为是抗肿瘤免疫效应的反映。为此，本文就肿瘤浸润T 淋巴细胞的分布特征作一综述，以期为临床治疗上皮性卵巢癌提供帮助。

1 肿瘤浸润T 淋巴细胞

TIL 包括从脉管系统迁移到肿瘤中的T 细胞、B细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞等类型[7]，其中T 淋巴细胞是肿瘤免疫过程中的主要效应细胞。CD3 抗原通常在T 淋巴细胞上表达，是T 淋巴细胞的抗原标志物，主要分为CD3+CD8+T 淋巴细胞和CD3+CD4+T 淋巴细胞（辅助性T 细胞），还有一些表达CD29 和CD45RO 的记忆T 细胞。辅助性T细胞亚群种类较多，根据抗原及功能不同分为辅助T 细胞1（Th1）、辅助T 细胞2（Th2）、辅助T 细胞17（Th17）、滤泡辅助性T 细胞（Tfh）。不同T 淋巴细胞亚群在免疫防御中起着不同的作用。据报道[8]，CD8+T 淋巴细胞与预后良好相关，Treg 细胞与预后差有关，但具体的免疫效应还要考虑到免疫细胞的浸润特征，即类型、位置、数量、细胞比值等因素。

2 T 淋巴细胞的浸润特征

在卵巢癌组织中，CD3+T 细胞最多，CD8+T 细胞次之[9]。研究表明[10]，卵巢癌组织中的CD8+、CD4+T 细胞比良性组织少；但Treg、Th17 细胞亚群数量及Treg/Th17 比值显著高于良性组织[11]，癌组织中Treg/Th17 比值升高可能是导致肿瘤增殖与迁移的因素。就浸润位置而言，肿瘤间质内的CD4+、CD8+T 细胞数量和CD4+/CD8+比值均显著高于癌巢[10，12]。间质中高密度的CD8+T 细胞可能与5 年生存率的改善有关，而癌巢中高密度的CD4+T 细胞往往预示化疗效果差[9]，CD4+/CD8+比值侧面反映了机体抗肿瘤免疫的总体水平，也许可以作为患者预后的一个指标。

3 T 淋巴细胞浸润特征与临床病理特征的关系

3.1 与病理类型的关系 上皮性癌卵巢癌可分为浆液性腺癌、粘液性腺癌、子宫内膜腺癌、透明细胞癌等主要亚型。国内外研究发现[10，13]，不同病理类型的TIL 存在一定差异。子宫内膜样腺癌间质内的TIL多于高级别浆液性腺癌，而癌巢内的TIL 数量没有差别[13]。浆液性腺癌间质内的CD4+、CD8+T 细胞和癌巢内的CD4+T 细胞数量明显多于粘液性腺癌[10]。以往已证明卵巢癌患者预后与病理类型有关[14]，这是否与T 淋巴细胞的浸润差异有联系还有待进一步研究。

3.2 与分化程度的关系 上皮性卵巢癌以高级别浆液性腺癌居多，这类患者预后往往很差[15]。低分化癌组织中的CD3+、CD8+T 细胞多于高、中分化组，而CD4+T 细胞的浸润数量与分化级别无关[8，10，12]。胡喜珍等[12]利用免疫组织化学法对68 例浆液性腺癌患者中的TIL 进行观察，发现高-中分化组癌巢及间质内的CD4+/CD8+比值及癌巢内CD8+/FoxP3+比值均高于低分化组，说明高分化患者体内的免疫平衡整体倾向于抗肿瘤效应，这类患者对免疫治疗可能更加敏感，但这一猜测可能还需要进一步验证。

3.3 与临床分期的关系 多项研究表明[8，10，11，16]，晚期患者肿瘤组织中的CD8+T 细胞明显多于早期患者；而CD4+T 细胞及Th17、Treg 细胞亚群在早、晚期患者中无明显差别。就免疫细胞比值而言，晚期患者癌巢内的CD4+/CD8+、CD8+/FoxP3+比值均低于早期患 者[10，12]，Treg/Th17 比值高低则与分期无关[11]。Leffers N 等[17]的研究显示，晚期患者中高比例的CD8+T 细胞、记忆T 细胞和Treg 细胞与疾病特异性存活率增加有关，此外，晚期患者癌巢内高CD4+/CD8+比值、CD8+/FoxP3+比值同样是患者预后的保护因素[10，17]。

3.4 与复发转移的关系 与原发卵巢癌组织相比，网膜转移组织中的CD3+、CD8+细胞更少，CD4+细胞数量则没有差异[8]，但有研究认为CD8+，CD45R0+和Treg 细胞在两者间没有差异[17]。值得注意的是，无论是原发癌组织还是网膜转移组织，高比例的Treg 细胞和记忆T 细胞均与疾病特异性生存期改善有关。卵巢癌患者复发前后的TIL 也存在一定的联系，具体而言，绝大多数具有高密度TIL 的患者在复发后依旧具有高密度的TIL，TIL 密度低的患者复发后TIL 也会出现一定程度的上升[18]。Stansk M 等[18]研究认为复发组织中的CD4+T 细胞往往增多，而CD8+、CD3+T 细胞无明显变化。另外，与淋巴结外复发卵巢癌患者相比，孤立淋巴结复发患者有更高密度的CD3+、CD8+T 细胞浸润，且有更长的总体生存期[19]，这表明CD8+T 细胞可能参与了抗肿瘤免疫，导致孤立淋巴结复发患者病情进展更加缓慢。

3.5 与新辅助化疗的关系 有研究表明[20-22]，新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy，NACT）可以会改变局部免疫状态，通过刺激或抑制宿主的TIL 来调节治疗效果。Mesnage SJL 等[23]报道称Treg 细胞在癌组织和癌旁组织中的浸润水平明显低于新辅助化疗前，CD8+T 细胞在NACT 前后变化不大。也有研究者认为NACT 后CD8+、CD4+T 细胞的浸润密度增加，Treg 细胞在NACT 前后无明显变化[24]。Böhm S等[25]对54 例高级别浆液性卵巢癌患者进行研究，结果显示NACT 前后CD8+、CD4+T 细胞及记忆T 细胞无显著差异，但在化疗效果好的患者中Treg 细胞明显减少，这表明新辅助化疗可以改变肿瘤免疫微环境，在新辅助化疗后，根据肿瘤的免疫状况，结合适当的维持免疫疗法，可能是一种改善晚期卵巢癌患者预后的方法。

3.6 与基因突变的关系 错配修复（mismatch repair，MMR）基因在维持遗传保真度中起重要作用，MMR缺陷型卵巢癌是一个独特的分子亚组[26]。研究表明[27]，与正常的卵巢癌患者相比，MMR 缺陷型卵巢癌患者有更多的CD3+、CD8+T 细胞以及更长的无进展生存期，这类患者可能是抗PD-1/PD-L1 治疗的理想人选。虽然子宫内膜样腺癌中MMR 缺陷更为常见，但Aysa A 等[28]研究认为，这类患者的TIL 与MMR 基因不存在联系。此外，大约50%的高级别浆液性腺癌在同源重组（homologous recombination，HR）DNA修复途径中具有遗传和表观遗传学改变，最常见于BRCA1 和BRCA2 基因[29]。与无HR 基因改变的患者相比，BRCA1/2 突变患者CD3+、CD8+T 细胞显著增加，且CD3+T 细胞与PD-1+细胞在数量上呈正相关[30]，CD3+T 细胞也许可以作为PD-1 的替代标志物，但这需要进一步研究来确定TIL 的数量是否可以预测抗PD-1 或抗PD-L1 治疗的效果[30]。

4 总结

在不同临床病理特征的卵巢癌中，TIL 的分布不同，且对患者的预后有一定的影响。但T 淋巴细胞的浸润差异除了与各种临床病理因素有关外，还与检测方式的差异、样本量大小有关，为了更好地研究T 淋巴细胞的浸润，应建立统一规范的检测标准，加大样本量，减少患者异质性的干扰。另外，目前的研究者多专注于TIL 与患者预后的关系，但并未在具体免疫机制上做深入研究，这也是未来努力的方向。