瓜拉纳乳膏的开发

★ 熊佳 高玲 申新刚 雷婉容 刘运锋 陈丽华 管咏梅 朱卫丰（.江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室 南昌 330004；2.江西中医药大学附属医院 南昌 330006）

瓜拉纳（Paullinia cupana），又名巴西香可可，主要分布在巴西北部和委内瑞拉一带的亚马逊热带雨林中，属无患子科常绿木质藤状灌木［1-2］。国外研究发现，瓜拉纳中含有丰富的天然激情生物碱、咖啡因、四甲基黄嘌呤、氨基酸、单宁酸、蛋白质、维生素、矿物质等人体必需的活力因子［3-4］，具有抗疲劳、抗肥胖、抗衰老等药理作用［5-7］。由于其营养价值高和在临床上具有一定的疗效，所以瓜拉纳被称为“健康活力的推进剂”，广泛应用于食品饮料、制药原料、保健品等［8］。

目前关于瓜拉纳的产品开发，大多数集中在抗疲劳饮料、运动饮料、能量棒、营养代餐组合物等一些可食用方面，而关于瓜拉纳的外用制剂较为少见。瓜拉纳的提神醒脑功效，不仅可以用于制作抗疲劳饮料，制成类似清凉油的外用醒神乳膏也很有研究空间，因此，对于瓜拉纳乳膏的开发探索是十分必要的。

1 实验材料

1.1 仪器

BSA-224S-CW 型电子天平( 赛多利斯科学仪器有限公司)；SZ-93 自动双蒸水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）；KW-1000DC恒温数显水浴锅（国华电器有限公司）；FA25高剪切乳化器（上海弗鲁克流体机械制造有限公司）；HKCB-3型恒控磁力搅拌器(温州市医疗电器厂)；pH酸度计（上海仪电科学仪器股份有限公司）；ZS881-6数显鼓风干燥箱（志胜烘箱设备有限公司）；HKL-100高速离心机（北京创维电子科技有限公司）；Nano-ZS 激光粒度仪（英国马尔文仪器有限公司）；FR-1204型恒温恒湿箱（上海一恒科技有限公司）；CX41 偏光显微镜（OLYMPU技术有限公司）。

1.2 试剂

瓜拉纳种子（巴西）；迷迭香精油（深圳市中纯植美化妆品有限公司）；白凡士林（南昌白云药业有限公司）；羊毛脂(国药集团化学试剂有限公司）；硬脂酸（沈阳市东华试剂厂）；单硬脂酸甘油酯（浙江恒翔化工有限公司）；液体石蜡( 株洲九州化学化学试剂厂)；三乙醇胺( 长沙市湘科精细化工厂)；甘油（天津市大茂化学试剂厂）；水为自制双蒸水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 瓜拉纳的提取

将干燥瓜拉纳果粉碎成粗粉，称取药材粗粉适量，精密称定，用20倍70%乙醇回流提取2次，每次2 h。过滤，合并滤液，滤液浓缩到相对密度为1.2～1.3 g/mL，得瓜拉纳醇提取液，备用。

2.2 乳膏基质处方的筛选

2.2.1 处方筛选原则乳膏基质主要组分为水相、油相及乳化剂，主要有水包油（O/W）型和油包水（W/O）型两类，其基质特点满足以下要求：油腻小、稠度适宜、易于涂布；利于经皮渗透，对皮肤刺激性较小；易于清洗。对于W/O基质，O/W基质更易清洗，在实际临床中大部分乳膏也是O/W基质，为充分发挥瓜拉纳提取物中活性成分和迷迭香精油的提神醒脑作用，预期筛选出几组成分简单的乳膏剂基质组成，制成 O/W 型乳膏。

2.2.2 处方查阅经典的水包油型乳膏组成，筛选确立5个处方组成。见表1。

表1 瓜拉纳乳膏的处方及用量 g/mL

2.2.3 乳膏制备羊毛脂、硬脂酸、液体石蜡、白凡士林、单硬脂酸甘油酯作为油相。三乙醇胺、甘油、双蒸水为水相。称取油相、水相成分分别置于烧杯中，分别加热到80℃。瓜拉纳提取液缓慢加入水相中，边加边搅拌溶解。将水相缓慢加入油相中并高剪切搅拌（10 000 r/min），同温乳化5 min，冷却，待温度降至40 ℃时，加入迷迭香精油和薄荷脑，边加边搅拌，制成50 g，继续搅拌至冷凝，即得。

2.3 乳膏物理性能及稳定性评价方法的建立

2.3.1 乳膏理化性质评价方法

2.3.1.1 性状观察5个处方的乳膏性状，肉眼观察乳液是否色泽亮丽，有光泽，涂抹在手上时乳液是否均匀细腻，用水洗掉后皮肤是否会感觉油腻，经预实验考察瓜拉纳乳膏为浅黄色的软膏，气香，有清凉感，色泽均匀一致，质地细腻，无粗糙感，无污物。结果显示4个处方的乳膏均为淡黄色乳膏。

2.3.1.2 pH值从本品的5个处方取15个样品（每个处方取3个样品），每个样品取2 g,用20 g冷双蒸水溶解均匀，采用pH计测定本品的pH值。2010 版《中国药典》二部附录VIH规定的乳膏剂基质O/W型乳剂基质pH应不大于8.3 的相关要求。

2.3.1.3 粒径经预实验分别将瓜拉纳乳膏稀释25、50、100、200倍的样品采用激光粒度仪测粒径，发现乳膏粒径的分布随稀释的倍数增加而增加，当乳膏稀释至25倍时，分布最均匀，故选择稀释25倍进行测量。取本品5个处方的乳膏用一定量双蒸水稀释25倍，每个处方测3次。采用激光粒度仪测粒径，不得检出大于180 μm的粒子。

2.3.2 偏光显微镜观察微观结构偏光显微镜是在光学显微镜的光学系统中插入了起偏振镜和检偏振器，通常用来检测生物体内某些有序结构、镜体的存在及其折射光学性质。1971年Barry B W［9］提出稳定的乳膏体系微观呈凝胶网状结构，主要由表面活性剂、两亲性化合物和水三元体系构成。Savic S等［10］将其称之为“扭曲马尔他十字”，这是溶致液晶中典型的层状液晶。在偏光显微镜下能观察到乳膏凝胶网状结构，从预实验结果中确定观察瓜拉纳乳膏测定方法为：取适量乳膏至于载玻片上，均匀涂展，不能有气泡，在放大40倍条件下观察。

2.3.3 宏观稳定性评价方法

2.3.3.1 离心试验取5个处方样品置于5 mL离心试管中，在离心机中离心，4 000 r/min，分别离心15、30、60 min，观察软膏离心前后有无油水分层等异变。

2.3.3.2 耐热试验取5个处方样品置于45 ℃恒温箱里24 h，取出，放置恢复至室温，剖开软膏管，观察膏体，与试验前比较，无分层等明显变化现象。

2.3.3.3 耐寒试验取5个处方样品置于-15 ℃恒温箱里24 h，取出，放置恢复至室温，观察软膏无分层等明显变化现象。

2.4 物理性能及稳定性评价结果

2.4.1 性状按照“2.3.1.1”项下的方法，对5个处方进行观察。5个处方基质制备的瓜拉纳乳膏，能很好的成型，均为淡黄色乳膏，均匀细腻，易涂布，且具有气香，有清凉感。处方4、5颜色淡黄色较偏浅，稠度略稠。见表2和图1。

表2 5种基质处方组成的乳膏比较

图1 乳膏外观性状

2.4.2 pH值按照“2.3.1.2”项下的方法，测5个处方的15个样品的pH值。见表3。

表3 5个处方制备的乳膏pH值测定结果

2.4.3 粒径按照“2.3.1.3”项下的方法，测5个处方分别稀释25倍的粒径。见表4和图2。

表4 5种处方制备的乳膏粒径测定结果 μm

图2 5个处方粒径分布图

结合各处方的粒径分布图，可知处方1、2、3、5均有粒径大于180 μm的粒子，不符合药典规定。处方4未检出大于180 μm，且粒径积分曲线成光滑的曲线，均小于100 μm，符合规定。

2.4.4 偏光显微镜观察液晶结构按照“2.3.2”项下的方法，在偏光显微镜下观察微观结构。见图3。五种处方在偏光显微镜下均能看到液晶结构，但只有处方4具有明显的“扭曲马尔他十字”，该处方较其他处方微观结构更稳定。

图3 不同处方液晶结构图

2.4.5 离心稳定性按照“2.3.3.1”项下的方法，对5种乳膏进行离心试验。见图4和表5。

图4 乳膏稳定性结果

表5 5种乳膏离心稳定性测定结果

2.4.6 耐热按照“2.3.3.2”项下的方法，对5种乳膏进行耐热试验。见表6和图5。

表6 5种乳膏耐热试验测定结果

图5 乳膏耐热结果

2.4.7 耐寒按照“2.3.3.3”项下的方法，对5种乳膏进行耐寒实验。见表7和图6。

图6 乳膏耐寒结果

表7 5种乳膏耐寒试验测定结果

根据处方4基质配比组成制备的瓜拉纳乳膏，乳膏色泽为淡黄色，细腻，稠度较适宜，易涂布，微观稳定性、离心稳定、耐热、耐寒等均较好，可以作为本实验中最佳处方制备瓜拉纳乳膏。

3 小结

瓜拉纳在巴西亚马逊地区常被印第安人用作兴奋剂，具有提神供能、抗疲劳作用。本实验尝试将瓜拉纳醇提液制成乳膏，其药理药效作用有待后期继续探讨。

本实验采用的瓜拉纳醇提取液是采用实验室前期进行正交优化瓜拉纳醇提液试验中最优的提取方法，但是对于瓜拉纳醇提取液加入量的多少，目前只是参考大部分乳膏文献中加入的量，初步试验了瓜拉纳是否合适制成乳膏剂以及它是否能成型，初步考察了瓜拉纳乳膏剂的外观性状、稳定性等因素，为后期进一步的实验研究奠定基础。

本实验中采用处方4中基质所做的乳膏，稠度略稠，后期将考虑再调整处方中水相和油相的比例，确立最佳的处方构成，并对其各项指标进行考察，看是否符合各项指标要求。在实验研究过程中，主要存在的问题是常温放置时，随着时间的推移，瓜拉纳乳膏会发生颜色以及稠度上的变化，颜色有所加深，稠度变稀。但是油相和水相未发生分离，目前稳定性较好，初步推测是氧化剂加入的量不合适，后期还将继续调整处方中基质的含量，以制备出符合药典标准的合格产品。醒神的瓜拉纳配伍同样醒神作用的迷迭香精油和薄荷脑，不仅调节了气味，更增强了瓜拉纳乳膏剂的醒神功效。

乳膏剂是一种传统剂型，但因为其使用方便、性质稳定、溶解性能较好等优点越来越受到人们的关注，很多新的医药原料正在尝试着制成乳膏通过透皮吸收达到较好的治疗效果，特别是近几年来，随着中药产业优化的发展，很多中药制剂也朝着这个方向发展，显现着较好的发展态势，目前关于瓜拉纳的研究，外用制剂少之又少，而根据瓜拉纳的提神醒脑的功效，将其制成外用的清凉油将会有很大的发展空间。