女性生殖道沙眼衣原体、解脲支原体和淋球菌DNA定量检测分析

许志定，林小玲

罗定市人民医院检验科，广东罗定 527200

沙眼衣原体（CT)、解脲支原体（UU）、淋病奈瑟菌（NG）感染是目前世界范围内引起性传播感染的常见病原体。非淋菌（UU、CT 等）性尿道炎属于我国重点监测的传染病，淋菌（NG）感染更是法定乙类传染病。近年来，泌尿生殖道CT、UU 感染在我国呈逐年上升趋势，淋病的发病率在以往逐年下降的基础上近年来有起伏不定的趋势［1］。早有研究认为CT、UU、NG 严重影响女性身心健康，可导致女性阴道炎、宫颈炎、盆腔炎等一系列严重炎症和并发症，影响患者的心理及家庭健康［2-3］，还可导致不良妊娠［4-5］，因此及时发现并有效治疗隐匿的性传播疾病十分重要。鉴于传统的培养检测、免疫学检测等方法灵敏度低、准确率低等缺点，本研究采用实时荧光PCR（FQ-PCR）法定量检测2 619例于2018年6月—2021年5月到该院就诊女性的生殖道分泌物CT、UU和NG 的DNA，旨在准确了解该地区女性群体生殖道CT、UU、NG 的患病情况和特征，为临床诊断治疗及预防提供实验室依据。现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取到本院妇科、产科、泌尿外科诊治疑似泌尿生殖系感染的患者2 619例作为研究对象，就诊者主诉为阴道分泌物异常或外阴痒，年龄8～76 岁，平均（35.51±9.95）岁。将本研究对象分为≤20 岁组168例，21～30岁组915例，31～40岁组961例，41～50岁组386 例，≥50 岁组189 例。采集其生殖道分泌物进行沙眼衣原体（CT)、解脲支原体（UU）、淋病奈瑟菌（NG）检测，对CT、UU 和NG 检测结果进行回顾性分析。

1.2 仪器与试剂

仪器为上海宏石医疗科技有限公司生产的SLAN-96P 全自动医用PCR 分析系统。试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供。试剂使用均在有效期内，实验操作及结果判断严格按照说明书进行。

1.3 标本采集收集

先将宫颈口过多的分泌物清洁，再用无菌棉拭子插入女性宫颈1.0～1.5 cm，稍用力转动并停留数秒后取出，将标本均立即置入无菌专用试管加盖密闭送检。

1.4 观察指标

①观察研究对象性病总体感染率。②观察研究对象沙眼衣原体（chlamydia trachomatis,CT)、解脲支原体（ureaplasma urealyticum, UU）及淋病奈瑟菌（neisseria gonorrhoeae, NG）单一病原体感染率。③比较观察研究对象CT、UU 及NG 混合感染类型及感染率。④比较观察研究对象CT、UU、NG 在不同年龄段及不同季节的感染率。

1.5 统计方法

应用SPSS 23.0 统计学软件对数据进行描述性统计分析，符合正态分布的计量资料用(±s)表示；计数资料用频数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 总体感染情况

2 619 例就诊女性CT、UU、NG检测中，性病感染者有822例，总感染率为31.4%（822/2 619）。感染者年龄最小12 岁，最大76 岁；其中淋球菌感染年龄最小为14岁，最大为76岁。

2.2 CT、UU、NG单一病原体感染情况

UU-DNA感染率最高为41.7%，CT-DNA感染率为10.2%，NG-DNA检出率为4.8%。见表1。

表1 CT、UU及NG单一病原体感染情况

2.3 NG、CT、UU混合感染类型及分布

存在多种混合感染现象，混合感染中CT+UU 的阳性率为6.7%，相对高于其他混合感染类型，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 CT、UU及NG混合感染类型及分布

2.4 年龄分析

CT 感染患者≤20岁最高，达23.4%；21～30岁和≥50 岁组感染率分别为12.7%和10.3%。UU 感染患者≤20 岁为主，感染率为47.5%，随年龄增加呈递减趋势。NG 感染患者以≥50 岁组为主，感染率为11.7%，其次为41～50 岁为6.8%。上述组间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 CT、UU、NG不同年龄段分布情况

2.5 季节性分析

女性CT、UU、NG 总体感染率以冬春季最高为21.6%和20.1%；UU 感染率以冬季最高为56.4%，其次为春季50.3%；NG 感染率以秋季最高8.2%，春季最低1.9%，上述季节间差异有统计学意义（P＜0.05）。CT 感染在春夏秋冬差异无统计学意义（P＞0.05）。见表4。

表4 不同季节CT、UU、NG感染情况

3 讨论

CT、UU 和NG 是我国性病实验室检查的主要项目。传统的检测方法包括培养法检测、形态检测和免疫方法检测，其中形态学检查灵敏度低、准确率低，易造成误诊和漏诊；培养法检测作为检测的“金标准”，检测特异度高，但存在检测周期长及某些病原体较难培养的问题。在目前所有检测方法中，FQ-PCR 检测技术将基因扩增、特异分子杂交、化学荧光相结合，具有操作简便、灵敏性、特异性和准确性高等优点［6］，检测所得结果可靠，可及时有效地为临床提高准确判断病情的依据；而且只要取材一次就能对CT、UU、NG 项目同时进行检测，使用该法检测快速、简便、敏感、特异、廉价，大大节省时间，提高检测效率。

研究显示，本省各个地区性病疫情近年呈上升趋势，防控形势依然严峻［7］。本研究采用实时荧光定量PCR 方法对女性生殖道标本进行CT、NG、UU的DNA 检测结果显示，该地区总体阳性率为31.4%，低于广西彭契六等［8］、广东深圳宗曾艳等［9］、广东茂名车汉荣等［10］采用相同方法对女性生殖道标本进行CT、NG、UU 的DNA 检测所报道的总阳性率43.4%（2 562/5 897）、57.4%（2 104/3 506）、70.3%（23 100/32 853），其中广西、深圳报道UU 的阳性率远高CT和NG 的阳性率。茂名车汉荣等报道UU 的阳性率与CT 和NG 的阳性率接近，而该地区UU 的检出率（41.7%）远高于CT（10.2%）和NG（4.8%）的检出率。这可能是由于地域差异，导致对这些病原体感染率的报道并不一致。尽管该地区CT、UU、NG 总体检出率低于某些地区，但仍需要重视控制传染源、切断传播途径及保护易感人群，尤其需重视对UU 感染者检测和治疗。

沙眼衣原体（CT）可通过性接触和母婴传播，感染后可导致眼、生殖道、肠道等多器官发病，CT 感染已成为全球公共卫生问题，被WTO 在全球“Towards Ending STIs”“全民健康覆盖”战略中提出将其纳入2016—2030 降低90%性传播疾病发病率的实施战略中［11］。熊明洲等[7]报道称，本省（广东省）生殖道沙眼衣原体感染发病率居于高位为72.2/10 万，女性增长尤其明显。本研究对纳入患者的感染情况进行分析发现，CT 阳性率为10.2%，与广西彭契六等（阳性率8.84%）、广东深圳宗曾艳等（阳性率9.27%）、四川省刘玉林[12]（阳性率11.0%）报道的检测结果较接近，远高于上海陈佳婕等[13]（阳性率7.51%）、广东揭西丘玉辉等[14]报道的检测结果。鉴于CT 在本地区、本省、全国乃至全球的高感染率，应持续加大女性对衣原体感染的认识，加大筛查和检测发现的力度，力求早期发现、及时治疗。

UU 是常见的生殖道病原体，是一种条件致病菌，需要结合临床症状评估患者感染风险，确定是否需要治疗[15]，但UU 容易反复及交叉感染，仍然会危害患者健康。该地区UU 阳性率为41.7%，低于广西彭契六等(58.20%)、广东深圳宗曾艳等(62.54%)、四川刘玉林等(64.1%)、上海陈佳婕等(71.27%)、广东揭西丘玉辉(52.20%)报道的情况，这可能与本地区女性群体对该病原体感染的认识相对不足、检测发现的力度不够有关，仍待进一步揭示。

淋球菌（NG）感染又称淋病，淋球菌感染患者会瘙痒、灼热感、排尿疼痛等，会造成尿道、阴道化脓性感染，破坏患者尿道、阴道黏膜，如果不及时治疗会形成瘢痕和不育等。大多是由不洁性生活感染引起。本地区NG 阳性率为4.8%，远高于广西彭契六等(2.45%)、广东深圳宗曾艳等(1.25%)、上海陈佳婕等(1.47%）发现报道的情况，也远低于上述广东茂名车汉荣等（24.44%）、四川刘玉林等（9.0%）报道的情况。这说明卫生知识宣教的覆盖率还是不很够，力度还需要加强，性卫生知识方面的教育也有待提高。如何让所有的女性了解更多的卫生知识，更好地保护自己是一项很重要、很必要的工程，有待医务人员的努力。值得重视的是，淋球菌除对常规抗生素产生普遍耐药外，在全球多个地区出现对头孢曲松耐药的菌株，这是淋病诊疗工作的巨大挑战［16］。

混合感染CT、UU、NG 对患者的危害比单一感染更严重，可导致患者病情反复、迁延、久治不愈。该研究发现，混合感染有138 例，其中CT+UU 最常见，三重感染率为0.8%，临床治疗应注意应精准用药，减少抗生素滥用和过度治疗。

不同年龄段的感染情况分析显示，CT 阳性率以小于20岁为主，40岁以下是UU高感染率阶段，提示性活跃阶段CT、UU 感染水平相对高。然而分析发现，该地区50 岁以上的中老年人CT 感染率也不低，甚至NG 感染率（11.7%）比其他年龄段要高，这可能是50 岁以上者，尤其老年人缺乏性教育和自我保护意识，防治工作中对此类人群重点关注。

本研究结果显示，CT 检出率季节差异无统计学意义（P＞0.05），但UU、NG 检出结果提示感染有季节性特点，冬春两季UU 检出率最高；NG 在秋季检出率最高，其次为夏季，与广西报道的情况存在一定的差异。这可能与冬春气温较低，人们卫生保暖意识有关，以及夏秋季气温更适合NG 生长繁殖有关。

综上所述，地区CT、UU 和NG 的感染情况不容忽视，检出率具有明显的地区、年龄和季节差异。