邱全优,李元凤,王亚超
(1.佛山市顺德区正宇饲料有限公司,广东 佛山 528000;2.西南科技大学生命科学与工程学院,四川 绵阳 621000)
博落回(Macleaya cordata, MC)是一种中草药植物,富含血根碱和白屈菜红碱,具有增强动物免疫力、促进动物生长、预防畜禽疾病的作用[1]。宫内发育迟缓(Intrauterine growth retardation, IUGR)通常被定义为由于宫内充血和胎盘功能障碍导致胎儿或产后生长发育受损的低初生体重哺乳动物新生儿。研究发现,母亲在分娩期间容易出现生理性氧化应激,而新生动物在出生时由于缺乏抗氧化系统而遭受严重的氧化应激[2],在母体分娩期间导致新生仔猪承受更严重的压力[3],而膳食营养可以提高IUGR存活率和生长性能[4-5]。如何通过母体营养提高新生儿抗应激能力是关键的研究方向。前人研究还发现,博落回提取物(MCE)可以调节猪的先天免疫系统和消化功能[6],在母猪饲粮中纳米硒和博落回提取物合用可以增强后代IUGR新生仔猪的抵抗力[7]。但母体MCE营养对IUGR断奶仔猪生长性能和免疫功能是否有促进作用尚缺乏研究。因此,在本研究中,母猪饲粮添加两种水平的MCE,并对IUGR断奶仔猪的生长性能、抗氧化和免疫功能进行研究,以确定母源性MCE饲粮是否可以提高后代IUGR断奶仔猪的抗应激能力,促进生长。
本试验使用的博落回提取物(macleaya cordata extract, MCE)为市售,含0.375%活性成分和0.15%血根碱。
采用单因素试验设计,选择60头初产母猪(长白×约克),按照体重相近的原则随机分为3个处理,每个处理20个重复,每个重复1头母猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加500 mg/kg和1 000 mg/kg MCE。母猪试验期46 d(妊娠90 d至泌乳21 d断奶)。从每个处理母猪所产IUGR断奶仔猪中随机选取16头21日龄(4.1±0.09) kg的仔猪进行饲养,分为4个重复,每个重复4头IUGR断奶仔猪,试验期28 d(22—49日龄)。母猪饲粮参考Li等的配方饲粮[7]进行设计,断奶仔猪使用养殖场统一外购的保育前期饲料。母猪基础饲粮组成[7]见表1。
表1 母猪基础饲粮组成和营养水平(风干基础)
本试验于2022年4—5月在广东省佛山市五岭养殖场开展。断奶仔猪饲养栏舍为半封闭、塑料漏缝地板式高床保育猪舍。饲养管理和免疫按照该养殖场规范操作,试验猪只自由采食,鸭舌式自动饮水器饮水。每天密切观察断奶仔猪采食、粪便质量,以及死淘等异常情况,并做好记录。每天记录圈舍的环境情况(温度、湿度等)。
1.4.1 生长性能 试验开始和结束时称取猪只体重,记录试验期间饲料的总采食量、浪费量以及剩余量,计算平均日采食量、平均日增重和料重比。
1.4.2 IUGR仔猪血清抗氧化和免疫指标 试验第28天早上,空腹12 h,每个处理随机选取5头接近平均体重的IUGR仔猪,前腔静脉采血5 mL,置于未加抗凝剂的EP管中,在4 ℃条件下12 000 r/min离心10 min,分离血清,-80 ℃冻存备用。超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA),以及白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)使用ELISA试剂盒(南京建成生物工程研究所),按照制造商说明进行分析测定。
数据先用Microsoft Office Excel 2013软件预处理, SPSS 22.0软件进行方差分析(ANOVA),结果以平均值±标准误表示,采用Duncan's法进行多重比较,P<0.05表示差异显著。
由表2可知,与对照组相比,1 000 mg/kg MCE组平均日增重和平均日采食量分别显著增加15.00%(P<0.05)和15.15%(P<0.05)。
表2 母源性MCE对IUGR断奶仔猪生长性能的影响
由表3可知,与对照组相比,1 000 mg/kg MCE组血清SOD显著增加14.62%(P<0.05)。500 mg/kg MCE组和1 000 mg/kg MCE组GSH-Px水平均显著高于对照组(P<0.05),MDA含量均显著低于对照组(P<0.05)。
表3 母源性MCE对IUGR断奶仔猪抗氧化能力的影响
由表4可知,与对照组相比,500 mg/kg MCE组和1 000 mg/kg MCE组血清IL-10水平显著增加(P<0.05),IL-6、IL-1β和TNF-α水平均显著降低(P<0.05)。
表4 母源性MCE对IUGR断奶仔猪免疫功能的影响
本研究结果表明,母猪饲粮添加1 000 mg/kg MCE,可以显著提高后代IUGR断奶仔猪的日增重和日采食量,促进仔猪生长,但对饲料效率无改善作用。秦克蕊[8]在妊娠后期和哺乳母猪饲粮中添加500 mg/kg MCE研究发现,母源性MCE也可以一定程度增加哺乳期仔猪增重,但无统计学差异,与夏超笃等[9]在断奶仔猪饲粮中添加1 000 mg/kg MCE的结果一致。本试验中1 000 mg/kg MCE组能显著提高IUGR断奶仔猪的增重,其原因可能是MCE对IUGR仔猪的改善效果要优于正常仔猪。MCE可能通过增强母猪的免疫功能,改善了后代弱仔猪的抵抗力,提高了IUGR仔猪的长势。
机体抗氧化系统处于动态平衡状态,其抗氧化能力可以通过血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量来反映[10]。SOD和GSH-Px的水平反映了动物机体清除自由基的能力[11]。MDA是自由基在动物体内引起脂质过氧化的最终产物,其水平反映了自由基对动物的损伤程度[12]。如果体内自由基过多,可能会破坏抗氧化系统的动态平衡,影响机体健康。TNF-α是机体应激反应中最主要的炎症细胞因子,可诱导其它炎症介质,在体内产生炎症反应,加重组织损伤[13]。IL-1β作为促炎介质,可介导炎症反应[14]。IL-6可在体内诱导细胞炎症[15]。IL-10是一种多效性抗炎细胞因子,可以抗炎和调节免疫[15]。
研究发现,MCE具有较强的抗炎、增强机体免疫功能等生物活性,其可以通过母体的传递作用提高后代仔猪抗应激能力,减少氧化损伤和炎性反应。本研究结果表明,妊娠后期和哺乳期母猪饲粮中添加500或1 000 mg/kg MCE,均可显著提高后代IUGR断奶仔猪血清GSH-Px活性,显著降低MDA含量,与夏超笃等[9]在断奶仔猪饲粮中添加1 000 mg/kg MCE的研究结果相似。母源性MCE还能显著提高IUGR断奶仔猪血清IL-10水平,显著降低IUGR断奶仔猪血清 IL-6、IL-1β和TNF-α水平,增强IUGR断奶仔猪的免疫功能。说明母体添加MCE可以显著增强后代弱仔猪抗氧化和免疫功能,促进生长。
在本试验条件下,妊娠后期和哺乳期母猪饲粮中添加MCE能提高后代IUGR断奶仔猪日增重,提高抗氧化和免疫功能,MCE 1 000 mg/kg添加剂量要优于500 mg/kg。