胃癌组织高尔基体磷蛋白3蛋白表达与根治术后肿瘤复发的关系

刘中松

南阳南石医院普外科，河南 南阳 473000

胃癌是指起源于胃黏膜上皮的消化道恶性肿瘤，在我国各种癌症中发病率位居首位，死亡率已经超过世界平均水平的2倍［1］。调查指出［2］，我国早期胃癌的占比仅为20%，5年总体生存率不足50%，严重威胁人们的生命。另有资料显示［3］，我国新诊断的实体瘤中根治术后1年复发率高达60%，而胃癌患者一旦复发，将会有80%的病例生存期不足5年。因此探讨胃癌根治术后肿瘤复发的因素十分重要。高尔基体磷蛋白3（GOLPH-3）可激活细胞中雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路促进细胞增殖和生长，而mTOR通路的激活与胃癌等多种恶性肿瘤的发生密切相关［4］。据此推测GOLPH-3蛋白阳性表达很可能能够参与胃癌的发生和发展，但其与根治术后肿瘤复发是否有关鲜见报道。基于此，本研究选取108例实施胃癌根治术的患者探讨上述问题，旨在为胃癌根治术后复发的预防提供方向，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年2月—2019年10月南阳南石医院收治的108例实施胃癌根治术的患者作为研究对象。纳入标准：经活检证实为胃癌患者；临床病理特征明确，方便跟踪随访，对本研究知情同意。排除标准：胃癌复发患者或其他部位恶性肿瘤转移至胃部者；合并肝肾等严重器质性疾病者，有精神障碍者，不配合诊疗者；伴有严重外伤或急性感染性疾病者。108例患者中男81例，女27例；年龄34～80岁，平均年龄（59.58±10.25）岁；临床分期：I期16例、II期70例、III期22例；分化程度：未/低分化42例，中/高分化66例；病理类型：腺癌48例、鳞癌29例、腺鳞癌19例、印戒细胞癌10例、未分化癌2例。

1.2 方法

GOLPH-3蛋白表达检测：取手术切除的胃癌组织和边缘正常组织采用免疫组化法检测。将组织修剪为1mm3组织块，置于中性福尔马林溶液中固定，然后常规浸蜡、包埋、切片，脱蜡后以梯度浓度酒精水化并进行抗原热修复。滴加一抗（购自Abcam中国公司），4℃过夜；滴加二抗（酶标记，购自Abcam中国公司），室温30 min。滴加显色剂，5 min后以自来水冲洗，苏木素复染，3 min后以自来水冲洗，氨水反蓝。脱水后二甲苯透明，封片后观察。以无色、淡黄色、棕黄色、棕褐色分别评为0分、1分、2分、3分；以阳性细胞数＜5%、≥5%且＜25%、≥25%且＜50%、≥50%且＜75%、≥75%分别评分0分、1分、2分、3分、4分。计算二者乘积，结果≤1分记为GOLPH-3蛋白阴性表达，否则记为阳性表达［5］。

1.3 观察指标

（1）对比胃癌组织和边缘正常组织GOLPH-3蛋白阳性表达率。（2）对比复发和未复发患者胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率：随访1年，随访方式为门诊或电话等。（3）分析胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达与胃癌根治术后肿瘤复发的关系，可能影响后者的因素包括性别、年龄、临床分期、分化程度、胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达、术后规范放化疗、中医药辅助治疗等。

1.4 统计学方法

采用SPSS 24.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。采用COX模型分析胃癌根治术后肿瘤复发的危险因素。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌组织和边缘正常组织GOLPH-3蛋白阳性表达率情况

108例胃癌患者有1例意外死亡，有2例主动放弃治疗，有3例转院，均剔除本研究。胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率为78.43%（80/102），高于边缘正常组织的55.88%（57/102）（χ2=11.757，P=0.001），见表1。

表1 胃癌组织和边缘正常组织GOLPH-3蛋白阳性表达率情况 例（%）

2.2 复发与未复发患者胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率情况

102例胃癌患者随访1年内共有39例复发，复发率为38.24%（39/102）。复发患者的胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率高于未复发患者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 复发与未复发患者胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率情况 例（%）

2.3 胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达与胃癌根治术后肿瘤复发的关系分析

COX模型单因素和多因素分析结果均显示，III期、未/低分化、胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达均是胃癌根治术后肿瘤复发的独立危险因素，差异有统计学意义（P＜0.05），术后规范放化疗、中医药辅助治疗则是胃癌根治术后肿瘤复发的保护因素，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3、表4。

表3 单因素分析

表4 多因素分析

3 讨论

胃癌的发生与不健康饮食习惯、致癌物质接触、幽门螺旋杆菌感染及遗传因素等均有关。有研究显示［6］，基因突变和蛋白表达异常是胃癌发生和发展的病理基础，尤其是参与细胞增殖、生长、分化、凋亡等调控的通路异常表达可促使细胞大量增殖而凋亡减少，还可增强细胞的侵袭和迁移能力，诱发胃癌并促使肿瘤浸润和转移。由此可知调控细胞生物学活性的蛋白表达异常可能参与胃癌预后效果不良。然而目前人们对胃癌发生和发展的机制认识尚不明确，影响胃癌根治术后肿瘤复发的分子机制也仍需要深入研究。

GOLPH-3属于一种磷酸化高尔基体膜蛋白，可参与执行高尔基体的蛋白质分选。该蛋白是第一个被发现定位于反面高尔基网并被证实具有强大转化能力的癌基因［7］。在既往相关报道中发现在胃癌、甲状腺乳头状癌、胆囊癌等组织中GOLPH-3蛋白阳性表达率均高于癌旁组织［8-10］，本研究中胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率也高于边缘正常组织，与上述研究结果相符，推测GOLPH-3蛋白高表达很可能参与胃癌的发生。GOLPH-3与高尔基体反面的基质动态相连，可快速从反面高尔基体管网状结构向细胞质移动，且在此过程中可参与蛋白糖基化，促进细胞生长和增殖，最终可打破细胞增殖和凋亡平衡，参与恶性肿瘤的发生。有研究［11］显示，胃癌组织GOLPH-3蛋白表达与组织分化、临床分期、淋巴结转、浸润程度均有关，且该蛋白阳性表达率越高，组织分化程度越低，临床分期越高，淋巴结转移的风险也越高，浸润程度也越严重，因此可用高蛋白阳性表达率评价胃癌组织的恶性程度，推测预后不良的发生几率。本研究中胃癌患者术后1年复发率38.24%，与既往报道的水平基本一致，证实胃癌根治术后复发的风险高；胃癌复发患者胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率高于未复发患者，提示胃癌组织GOLPH蛋白阳性表达可能与胃癌患者根治术后复发的风险有关。本研究单因素和多因素分结果均显示胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达是胃癌根治术后肿瘤复发的危险因素，提示蛋白阳性表达的确可增加胃癌肿瘤复发的风险。

本研究还发现，III期、未/低分化也均是胃癌根治术后肿瘤复发的独立危险因素，术后规范放化疗、中医药辅助治疗则是其保护因素，与既往相关报道结果一致［12-13］。但也有报道［14］显示，淋巴结转移、肿瘤浸润、病理类型是胃癌根治术后复发的影响因素，本研究未探讨上述因素的影响，主要是因为淋巴结转移、肿瘤浸润与临床分期不相互独立，病理类型与肿瘤分化程度不相互独立。根据上述研究结果，建议对III期、未/低分化的胃癌患者加强监控，对所有胃癌根治术后患者实施规范放化疗，必要时配合中医药治疗以降低胃癌根治术后复发的风险。

综上所述，胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率高，根治术后肿瘤复发的风险也高，且胃癌根治术后肿瘤复发患者的胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达率更高，III期、未/低分化、胃癌组织GOLPH-3蛋白阳性表达均是胃癌根治术后肿瘤复发的独立危险因素，术后规范放化疗、中医药辅助治疗则是其保护因素，建议对有危险因素加强防控，并积极配合实施术后规范放化疗、中医药辅助治疗。另外GOLPH-3蛋白可能参与胃癌的发生和发展，而是否可作为临床治疗的新靶点仍待进一步研究探讨。