除螨洗衣液中的氯氰菊酯含量测定——高效液相色谱法

王 娟 查青青 雷 敏 于 文

西安开米股份有限公司，陕西西安，710075

氯氰菊酯是一种拟除虫菊酯类农药，是模拟天然除虫菊素由人工合成的一类杀虫剂，有效成分是天然菊素。市面上除螨洗衣液中大多都添加氯氰菊酯类成分，但目前除螨洗衣液中氯氰菊酯含量的检测方法是一个空白。需要检测它们是否添加防虫防蛀成分氯氰菊酯，所以目前文献中大多是关于食品中氯氰菊酯的检测方法[1-4]，尚无洗衣液中氯氰菊酯含量的检测方法。除螨洗衣液中含有大量表面活性剂和功能成分，成分较复杂，干扰因素较多，故需对高效液相色谱法加以调整。为此，采用高效液相色谱法，确定了适宜的检测波长，有效去除干扰，以期建立一种准确性高、可靠性强、适用性广的检测方法。

1 实验部分

1.1 仪器及试剂

仪器：UV6000LP（二极管阵列检测器）液相色谱仪，Thermo Finnigan公司。

甲醇：色谱纯，德国Merck公司。

氯氰菊酯：标准品（纯度≥99.0%，上海哈灵生物科技有限公司）。

无水乙醇：分析纯，安徽安特食品股份有限公司。冰醋酸：分析纯，重庆北碚精细化工厂。超纯水：自制。

1.2 色谱条件

色谱柱：K ro m a s i l 1 0 0-5 C 1 8 柱（1 5 0 mm×4.6 mm，5 μm）。

柱温：室温。

进样方式：20 μl阀进样。

检测波长：235 nm。

流速：1.2 ml/min。

流动相：甲醇∶纯水∶醋酸 = 80∶20∶0.1，用0.45 μm滤膜过滤。

洗脱方式：等度洗脱。

1.3 溶液的配制及样品处理

1.3.1 流动相的配制

流动相：将甲醇、纯水、冰醋酸按80∶20∶0.1的比例混匀，用0.45 μm滤膜过滤，再用超声振荡脱气10 min，备用。

1.3.2 标准溶液的制备

称取0.2500 g氯氰菊酯标准样品于100 ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，再继续稀释配制一系列不同质量浓度的样品（2.06 μg/ml、4.12 μg/ml、25.74 μg/ml、51.48 μg/ml、102.96 μg/ml、257.4 μg/ml）备用。

1.3.3 样品溶液的制备

精确称量2.0000 g样品于50 ml容量瓶中，用无水乙醇稀释，超声振荡，定容至刻度备用。

2 结果和讨论

2.1 流动相的选择

主要进行甲醇/水/醋酸与乙腈/水/醋酸的筛选，并根据实际情况调整其配比，以达到最佳分离效果和减少干扰，最后比较看哪个体系比较适合洗衣液中氯氰菊酯的检测。实际实验过程中发现乙腈/水/醋酸体系峰分不开。并对甲醇体系与乙腈体系进行比较分析，总结出甲醇∶纯水∶醋酸 = 80∶20∶0.1（体积比，v/v）、梯度洗脱能达到最佳分离效果、基线平稳和减少干扰，比较适合本项目检测。

2.2 检测波长的选择

氯氰菊酯最大吸收波长（图1）为235 nm，其次为277 nm。由于氯氰菊酯紫外吸收峰不大，在277 nm处氯氰菊酯的吸收峰较小，选择235 nm作为液相检测波长，其目标色谱峰与其他色谱峰分离度高（图2、图3），干扰峰少，提高了样品中氯氰菊酯的检测精度，故选择235 nm作为检测波长。

2.3 线性关系

图1 氯氰菊酯的紫外光谱图

图2 235 nm处除螨洗衣液溶液的液相图谱

图3 235 nm处氯氰菊酯的液相图谱

在上述液相色谱条件下，待仪器基线稳定后，采用浓度-峰面积外标法定量，配制质量浓度为2.06 μg/ml、4.12 μg/ml、25.74 μg/ml、51.48 μg/ml、102.96 μg/ml、257.4 μg/ml标准溶液进样分析。实验数据见表1，由实验得线性回归方程为y =3×10-5X+0.5238，r²= 0.9997，其中y为氯氰菊酯浓度（μg/ml）、X为氯氰菊酯峰面积、r为相关系数，r值大于0.999，说明在氯氰菊酯浓度2.06～257.4 μg/ml内线性关系良好。洗衣液样品黏度较高，需要稀释定容后进样检测。

2.4 重复性

精确称取0.2500 g含氯氰菊酯的样品于100 ml容量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释到刻度、摇匀，再吸取1 ml上述溶液于100 ml容量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度，摇匀。按此方法配制6份样品溶液，进行6次检测，实验结果见表2。

由表2中实验结果可知，此样品检测结果RSD为3.22%，说明方法误差小，具有良好的重复性。

表1 标准曲线溶液

表2 重复性实验

2.5 精密度

精确称取0.2500 g氯氰菊酯样品于100 ml容量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释到刻度，摇匀；再稀释两次，至2 μg/ml，备用。将此标准溶液，检测6次，实验结果见表3。

由表3中实验结果可知， RSD为0.32%，说明方法误差小，精密度比较好。

表3 精密度实验

2.6 回收率

回收率实验采取在已知含量（氯氰菊酯含量2.17 μg/ml）的市售样品1作为基质样品，加入已知质量浓度的氯氰菊酯标准溶液；精确称量2.0000 g含氯氰菊酯的样品于50 mL容量瓶中，加入1 ml或2 ml浓度为102.96 μg/ml氯氰菊酯标准溶液，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，超声振荡，定容至刻度备用，利用选定的色谱条件进行分析，实验结果见表4。

表4 回收率实验（n＝6）

由表4可知，回收率在100.19%～101.35%之间，满足分析要求。

2.7 市售样品的测试结果

精确称量2.0000 g市售样品于50 ml容量瓶中，用无水乙醇稀释，超声振荡，定容至刻度备用。测定样品中的氯氰菊酯含量，实验结果见表5。

由表5中实验结果可知，两组市售样品的六次结果的RSD分别为1.03%和2.84%，说明方法误差小，平行性比较好。

3 结论

采用高效液相色谱法测定洗衣液中氯氰菊酯的含量方法简便快速，精密度高。标准溶液在2～257.4 μg/ml线性相关，回收率为100.19%～101.35%。此方法精确、可靠，可作为除螨洗衣液产品质量控制的检测方法。

表5 样品中的氯氰菊酯的测试结果