TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测对菌阴性肺结核的诊断价值分析

汤勇 达军 张惠生 孔春晶 吕艳霞 孙国有

1.武威市中医医院，甘肃 武威733000；2.武威市凉州区黄羊镇卫生院，甘肃 武威733000

肺结核病是危害全球公众健康的慢性传染性疾病，是肺组织感染结核分枝杆菌后所致，国内发病率较高，可累及多种器官。菌阴性肺结核为肺结核的主要类型，占肺结核的60%～80%，抗菌治疗为其主要疗法，但若不及时诊治，部分菌阴性肺结核患者可转化为菌阳性肺结核，加重病情，不利于预后。因此，对菌阴性肺结核患者进行及时诊断与治疗对于控制病情进展，改善预后具有重要意义。菌阴性肺结核患者缺少细菌学的相关查证，仅靠患者临床症状、病史及胸部X 射线、实验室检查容易导致误诊、漏诊。近年来，为了减少菌阴肺结核漏诊、误诊现象，已有多种诊断手段被发明和使用，包括结核分枝杆菌脱氧核糖核酸（TB-DNA）、结核感染T 细胞斑点试验（T-SPOT）检查及噬菌体检测等，但其诊断价值尚未完全明确［1］。本研究以100 例疑似肺结核患者为研究对象，旨在分析TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测对菌阴性肺结核的诊断价值，为菌阴性肺结核患者的诊治提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年10 月至2020 年10 月于武威市中医院肺病科住院或门诊就诊的疑似肺结核患者为研究对象，共100 例，患者均对本研究知情同意。根据痰涂片结果［2］可分为菌阳性肺结核组（23 例）、菌阴性肺结核组（44 例）、非结核病组（33 例）。菌阳性肺结核组男性13 例，女性10 例；年龄30～69 岁，平均（52.55±3.26）岁。涂阴性肺结核组男性24 例，女性20例；年龄31～70 岁，平均（52.49±3.20）岁。非结核病组男性17 例，女性16 例；年龄31～69 岁，平均（52.58±3.30）岁。三组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经我院伦理委员会审核并批准。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：①符合《肺结核诊断和治疗指南（2001 年订）》［3］中相关诊断标准者；②临床资料完整，年龄30～70 岁者；③无精神、神经障碍，可配合各项检查者。排除标准：①伴其他非结核性肺部疾病（尘肺、矽肺、支气管扩张、肺栓塞、支气管肺癌等）者；②伴免疫性缺陷病、感染性疾病、凝血功能异常、血液系统疾病者；③长期服用免疫抑制剂治疗者。

1.3 方法 三组均行TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测，具体方法为：①TB-DNA 检查。以核酸扩增实时荧光的检测系统（达安基因股份有限公司）、结核分枝杆菌核酸扩增的荧光制剂（中山大学达安基因有限公司提供）检查痰液、肺泡灌洗液、胸腔积液中的TBDNA 表达水平。判定标准：以循环数值＜35 并合曲线为S 形为阳性，无循环数值为阴性；②T-SPOT 检查。以结核感染T 细胞检测试剂盒（英国Oxford Immu-note 公司）进行T-SPOT 检查。判定标准：以循环数值＜35 并合曲线为S 形为阳性，无循环数值为阴性。对照孔斑点个数0～5 个，抗原A 或B 孔斑点数-阴性对斑点数＞5为阳性；对照孔斑点数6～10 个，抗原A 或B 孔斑点数＞2 倍阴性斑点孔为阴性；不符合上述标准为阴性；③噬菌体检测：以噬菌体裂解法检测噬菌体。噬菌斑＜20个/平板为阴性，噬菌斑≥20 个/平板为阳性。TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测联合的结果判定为任意两项或三项联合中检查结果为阳性者即可判为联合阳性。

1.4 观察指标 ①记录三组TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测阳性率；②记录菌阴性肺结核组患者联合检查的阳性率；③根据检查结果分析TB-DNA、T-SPOT检查及噬菌体检测对菌阴性肺结核的诊断价值。

1.5 统计学方法 采用SPSS 21.0 软件进行统计分析，计数资料以［例（%）］表示，采用χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

表1 三组TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测阳性率比较［例（%）］

2 结果

2.1 三组TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测阳性率比较 菌阳性肺结核组TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌阴体检测阳性率高于且菌性肺结核组高于非结核病组（P＜0.05）。见表1。

2.2 菌阴性肺结核组患者联合检查的阳性率比较 菌阴性肺结核组患者TB-DNA+噬菌体+T-SPOT 联合检查阳性率最高，为84.09%。见表2。

2.3 TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测对菌阴性肺结核的诊断价值 TB-DNA+噬菌体+T-SPOT 三者联合诊断菌阴性肺结核的灵敏度、特异度、诊断符合率最高，分别为84.09%、100.00%、93.00%。见表3。

表2 菌阴性肺结核组患者联合检查的阳性率比较［例（%）］

表3 TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测对菌阴性肺结核的诊断价值

3 讨论

肺结核是患病率和感染率均较高的传染性疾病，主要通过呼吸道传播，其中以菌阴肺结核的人数及死亡人数较多。菌阴性肺结核属于活动性肺结核，临床检查可见1 次痰培养结核分枝杆菌检测、3 次痰涂片抗酸杆菌检测均为阴性。肺结核患者前期一般经细菌学检查以发现传染源，但菌阴性肺结核患者大多缺乏特异性临床症状，无典型胸片表现，难以与肺炎、肺纤维化等其他肺部疾病进行鉴别，使得临床诊断难度较高，容易成为新的传染源，进一步增加肺结核流行风险。现阶段，临床主要以细菌学诊断作为肺结核诊断的金标准，但其耗时长、灵敏度低，容易产生误诊、误治。近年来T-SPOT、分子生物学检测等新的诊断方法应运而生，但关于相关诊断方法对菌阴性肺结核的诊断价值无统一定论［4，5］。

本研究结果显示，菌阳性肺结核、菌阴性肺结核患者TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测阳性率均高于非结核病患者，且随着病原菌感染情况加重，三者阳性率增加，与李振生等［6］研究相一致。本研究还发现，菌阴性肺结核组患者TB-DNA+噬菌体+T-SPOT 联合检查阳性率最高，且TB-DNA+噬菌体+T-SPOT 三者联合诊断对菌阴性肺结核灵敏度、特异度、诊断符合率最高，提示TB-DNA+噬菌体+T-SPOT 单一检测的诊断效果较差，而三者联合可提高对菌阴性肺结核的诊断价值。分析其原因可能为：三者单一检测各有优劣，其中TB-DNA 虽可间接检出结核杆菌水平，但有较高的检查成本、技术要求，易出现假阳性而导致诊断价值降低。T-SPOT 检查则可检出结核分枝杆菌的特异性抗原（抗原A、抗原B）而诊断是否出现肺结核，但诊断菌阴性肺结核患者容易出现假阳性。噬菌体生长快、特异性高，故检测噬菌体可为结核病的快速诊断提供新的契机，但其不能真实反映患者排菌状态；而三者联合检查可弥补各自的不足，有助于提高对菌阴肺结核的诊断价值［7，8］。

综上，菌阳性肺结核、菌阴性肺结核患者TB-DNA、T-SPOT 检查及噬菌体检测阳性率均高于非结核病患者，其中，菌阴性肺结核组患者TB-DNA+噬菌体+TSPOT 联合检查阳性率最高，且TB-DNA+噬菌体+TSPOT 单一检测的诊断效果较差，而三者联合可提高对菌阴性肺结核的诊断价值。