●姜晓丽 闫华颖 毕月霞 吕艳艳
(1.山东省威海市荣成市崖西畜牧兽医站 山东 威海 264300;2.山东省威海市荣成市大疃畜牧兽医站 山东 威海 264300;3.山东省威海市荣成市虎山畜牧兽医站 山东 威海 264300;4.山东省威海市文登区动物疫病预防控制中心 山东 威海 264400)
近年来,禽养殖业快速发展,随着养殖数量和养殖密度的不断增加,禽病的发生与种类越来越多,更多地表现为混合感染,给养殖业带来较大的经济损失。在临床诊治过程中,经常会遇到病毒和细菌混合感染的病例。新城疫是由新城疫病毒引起的一种禽类急性高度接触性传染病[1],常呈败血症经过。临床上主要表现为呼吸困难,下痢,神经机能紊乱,黏膜和浆膜出血,出血性纤维素性坏死性肠炎。大肠杆菌病是由某些致病性血清型大肠杆菌引起禽类局部及全身性感染的疾病,临床主要特征为心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎和眼炎等。
2020年6月,荣成市大疃镇丛某饲养的3000 只2月龄雉鸡,陆续出现精神萎靡、食欲不振、甩鼻、排黄绿色稀便等症状。丛某根据自己的养殖经验,判断为大肠杆菌。于是,在家自行投喂粘杆菌素,按照每千克水60 mg 的用量,3000 只雉鸡每日的饮水量为180 kg,每日11 g,每日1次,连用5 d。5 d 后,病情没有得到有效控制,反而随着病情的逐渐发展,雉鸡出现张口喘、排水样便等症状,每天死亡5~6 只。
患病雉鸡消瘦,精神沉郁,羽毛蓬乱,翅膀下垂,呆立一旁或角落处,眼睛半闭,呈半睡状态,嗉囊胀大,充满液体内容物,倒提时有大量的酸臭液体从口内流出;排黄绿色稀便,肛门周围的羽毛粘有黄绿色粪便。近距离观察,可以看到眼睑外翻并发红,眼内有细小的气泡;甩鼻、咳嗽甚至张口呼吸,发出呼噜声;个别患病鸡的跗关节肿大,触摸有波动感,跛行。
口腔内有大量的黏液和污物,嗉囊内充满酸臭液体或者气体;气管环状出血,有黏稠的淡白色黏液;心包积液,有少量的淡黄色液体,心包外膜增厚,呈苍白色,心尖和心冠脂肪有数量不等的小出血点;肺脏充血,水肿,呈深红色,气囊混浊,有淡黄色的干酪样物;肝脏肿大,边缘钝圆,表面附着一层黄白色的纤维素性样物;腺胃乳头出血,肌胃有出血斑;肠壁菲薄,肠黏膜和浆膜出血,肠道内充满黄绿色的稀薄内容物,泄殖腔呈条纹状出血。
根据临床症状和剖检变化,初步判断为新城疫和细菌性混合感染。有条件的实验室还可以采取病毒分离、血凝抑制试验、中和试验和荧光抗体试验等方法进行确诊。
用棉签从患病雉鸡的泄殖腔和气管采集样品。将棉签插入装有样品缓冲液的试管,在试管壁上用力旋转至少10次,并混匀溶液,使标本溶解在溶液中,拿出棉签。将检测卡放置在平整桌面上,用吸管从试管内吸取上层清亮液体(100~120 μL),缓慢、逐滴滴加到有“S”标记的加样孔内。在室温下放置10~15 min,观察到对照线、检测线同时显色,结果为阳性。
随机采集20 只病死雉鸡的脾脏和肺脏,制备病料,按照RT-PCR 方法进行检测。
在PCR 技术中的DNA 聚合酶是不能以RNA为模板合成DNA 的,而新城疫病毒是RNA 病毒[1],所以要首先提取该病毒的RNA 然后加入反转录酶合成cDNA,再用cDNA 作为模板进行PCR 扩增。经过电泳检测,最后检查结果20 份病料均为阳性。
无菌取病死雉鸡肝脏和脾脏,分别接种于普通培养基和麦康凯培养基上,置于37℃恒温箱中培养,24 h 后观察。普通培养基上形成圆形凸起,表面光滑、湿润、灰白色、边缘整齐的半透明中等偏大菌落;麦康凯培养基上形成中央凹、直径达1~3 mm 的粉红色菌落。挑起乳白色菌落,进行革兰氏染色镜检,可见两端着色较深的革兰氏阴性杆菌。
将培养的菌落均匀涂布在普通培养基上,用常规药敏试纸进行药敏试验,置于37℃环境下,24 h 后观察结果。结果发现该菌对氟苯尼考、强力霉素、青霉素高度敏感,对卡那霉素、头孢噻呋钠中度敏感,对阿莫西林、新霉素、恩诺沙星、粘杆菌素低度敏感或耐药。
因此,根据发病情况、临床症状、剖检变化和实验室检查结果,最后确诊为新城疫和大肠杆菌混合感染。
加强饲养管理,改善卫生环境,保持禽舍良好通风,禽舍及饲养用具等应定期进行清扫和消毒。新城疫的最佳预防措施是免疫接种。一般情况下,对于7 日龄家禽,可用H120、IV 系或克隆-30 弱毒疫苗,1 倍量滴鼻点眼;21~30 日龄家禽,可用IV 系或克隆-30 弱毒疫苗,1 倍量滴鼻点眼或2 倍量饮水;间隔45~60 d,加强免疫1次,方法同上。各养鸡场应结合本场实际情况,定期进行新城疫免疫体水平检测,根据检测结果调整免疫程序。
根据药敏试验结果,选取氟苯尼考和强力霉素进行投喂。3000 只雉鸡平均体重0.8 kg,共计2400 kg。内服,氟苯尼考[2],按照每千克体重30 mg 的用量计算,每次80 g,每日1次,连用5 d;强力霉素,按照每千克体重25 mg 的用量计算,每次60 g,每日1次,连用5 d。
温欣(神康药业的清瘟败毒散),每袋500 g,按照一只雉鸡1 g,3000 只雉鸡,每次6 袋,每日1次,连用5 d。温欣是纯中药,可以用热水浸泡30 min 后,药水和药渣同时添加到饲料中,饲料的比例可适当减少,让雉鸡在3~4 h 采食完,以免饲料发生霉变。
提高雉鸡的抗病力,加快恢复健康。饮水中添加70%的黄芪多糖,按照每只雉鸡每日0.5 g,每 袋100 g,每次15 袋,每 日1次,连用5 d;电解多维,每袋240 g,按照每袋拌料200 kg,每日1 袋,每日1次,连用5 d。
抗生素治疗结束后,在饲料中添加益生菌和葡萄糖氧化酶。益生菌,每袋500 g,按照每袋拌料50 kg,每日1次,连用5 d;葡萄糖氧化酶,每袋1 kg,按照每袋拌料300 kg,每日1次,连用5 d。
经过5 d 的对症治疗和辅助治疗,雉鸡的病情得到有效控制,精神状态有所好转,死亡数量开始减少。后期经过综合调理,雉鸡停止死亡,采食量和饮水量恢复正常,鸡群恢复健康。
病例中的雉鸡是由新城疫和大肠杆菌混合感染,由于养殖户判断为大肠杆菌感染,只进行抗菌治疗,忽视了病毒感染,导致疾病治疗的延迟,增加了治疗的成本。
中兽医认为,“内热则易外感”,用清热解毒的中药,可以达到“邪祛正安”的目的。治疗过程中使用的温欣,主要成分是生地、黄连、黄芩、石膏等,具有泻火解毒的作用,对新城疫有较好的治疗作用。
黄芪多可诱导机体产生干扰素,从而有效干扰病毒在机体内的复制,有提高机体抵抗力的作用。
大肠杆菌是畜禽肠道内的常在菌,在外界恶劣的环境因素影响下,加速繁殖导致机体发病。治疗后期,在饲料或饮水中添加益生菌和葡萄糖氧化酶,人为地在肠道内植入有益菌,可以达到抑制有害菌的生长,调理肠道菌群,改善肠道内环境,加速鸡群恢复健康。