小儿过敏性紫癜急性期外周血CD4+、CD8+T细胞及免疫球蛋白的变化及意义

王 颖，姚玉淑 (天津市北辰医院检验科，天津 300400)

过敏性紫癜(HSP)是儿童自身免疫性血管变态反应性疾病，具有较高的发病率。该疾病的发病机制复杂难明，普遍认为与体液免疫、细胞免疫存在密切关系[1]。有研究显示检测HSP急性期外周血CD4+、CD8+T细胞及免疫球蛋白(Ig)含量，有助于为临床诊治提供参考依据[2]。本文对比分析HSP急性期患儿外周血CD4+、CD8+T细胞及IgA、IgM、IgG水平变化的临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取2016年7月～2020年5月天津市北辰医院接收的HSP急性期患儿53例作为研究组，另选同期保健科接收体检健康儿童53例作为对照组。研究组中男28例，女25例，年龄3～14岁，平均(8.12±1.25)岁。HSP分型：皮肤型18例，肾型12例，腹型10例，混合型8例，关节型5例。对照组中男27例，女26例，年龄3～15岁，平均(8.21±1.23)岁。两组性别、年龄资料相近，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本次研究经过本院医学伦理委员会同意。

1.2纳入排除标准：研究组纳入标准：①患儿均符合《儿童过敏性紫癜循证诊治建议》中关于HSP的诊断标准[3]，且均处于急性期；②均为首次确诊患儿；③家属及患儿认知功能正常；④家属知情同意，自愿参与。对照组纳入标准与研究组③、④一致。研究组排除标准：①排除伴有其他血管性疾病患儿；②排除伴有免疫功能障碍性疾病患儿；③排除入组前1个月内使用激素及免疫药物患儿；④排除资料不全、失访患儿。对照组排除标准与研究组均一致。

1.3方法

1.3.1仪器与试剂：采用美国BD公司生产的FACSCalibur流式细胞仪及配套试剂测定CD4+、CD8+细胞，采用美国Beckman Coulter公司生产的特定免疫球蛋白测定仪及配套试剂测定IgA、IgM、IgG水平。所有研究对象均采集清晨空腹外周静脉血两份各2 ml，分别置于EDTA-K2抗凝管、真空管中，标本最长保留时间6 h。样本中白细胞数目控制在4×109/L～10×109/L，若白细胞数过少则需单个核细胞分离，若白细胞数过多则稀释处理，若样本出现溶血，则弃用。严格按照试剂盒说明书使用，标本处理好后上机检测，获取CD4+、CD8+细胞百分率，计算CD4+/CD8+；Ig测定时，外周血样本进行完全凝集，并保证无任何纤维蛋白及微小颗粒，离心沉降处理，分离血清。血清完全凝固后上机，采用散射比浊法测定IgA、IgM、IgG水平。研究组在患儿出院当天再次采集清晨空腹外周静脉血，检测方法同上。

1.4观察指标：对比分析HSP急性期患儿与健康儿童IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+之间的差异。观察比较HSP急性期患儿治疗前后IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+的差异。

1.5统计学分析：采用SPSS25.0软件进行t及χ2检验。

2 结果

2.1两组IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比较：研究组外周血CD4+、CD4+/CD8+明显低于对照组，CD8+、IgA明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，两组IgM、IgG水平对比，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组外周血CD4+、CD8+及Ig比较结果

2.2研究组治疗前后IgA、IgM、IgG、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比较：研究组治疗后外周血CD4+、CD4+/CD8+高于治疗前，CD8+、IgA低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)，研究组治疗前后IgM与IgG无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 研究组治疗前后外周血CD4+、CD8+及Ig比较结果

3 讨论

小儿HSP属于常见自身免疫性疾病，临床表现和发病机制复杂[4]。常见的病因包括感染、药物、食物、花粉等，发生后表现出一定的皮肤症状、消化道症状、关节症状、肾脏症状及其他症状，因此被分为皮肤型、腹型、关节型、肾型、混合型，但不论哪种类型，都表现出免疫功能紊乱[5]。通过检查患儿免疫功能相关指标，有助于判断病情，为临床治疗提供参考。

儿童时期免疫功能发育不成熟，容易受到外界因素影响而诱发免疫功能障碍。细胞免疫和体液免疫都参与集体免疫功能调节[6]。其中T淋巴细胞属于细胞免疫效应细胞[7]，在外来抗原侵入机体时，T淋巴细胞参与反应，调节血CD4+、CD8+，其中血CD4+在局部环境发生变化时，被诱导分化为Th1、Th2、Th17等亚群，通过不同转录途径及分泌不同细胞因子来执行生物学效应。正常情况下Th1/Th2处于稳定状态，存在相互制约与调节的关系，共同维持机体正常免疫应答，而当HSP急性期发作，Th1/Th2的平衡关系遭到破坏，引起机体免疫功能紊乱，呈现Th2细胞亚群相对优势。导致Th2细胞介导的体液免疫功能增强，促使B细胞增殖、分化，诱导产生IgA，进一步形成循环免疫复合物，在全身小血管壁沉积，导致组织和器官损伤，促使HSP加重[8]。本研究结果显示研究组外周血CD4+、CD4+/CD8+明显低于对照组，CD8+、IgA明显高于对照组，说明HSP急性期体液免疫、细胞免疫功能发生明显改变，因此认为诱发HSP免疫功能紊乱的主要环节是T淋巴细胞亚群功能紊乱[9]。经过治疗发现，研究组治疗后外周血CD4+、CD4+/CD8+高于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)，外周血CD4+、CD8+及IgA恢复至正常水平，免疫功能恢复平衡，疾病得到改善。因此，通过检测HSP急性期患儿血清Ig及外周血CD4+、CD8+，有助于观察疾病进展情况，并及时采取有效治疗措施，调节免疫功能，促进患儿恢复，并为疾病治疗效果评价提供参考依据。

综上所述，小儿HSP急性期表现出体液免疫和细胞免疫功能紊乱，外周血CD4+下降、CD8+升高、IgA水平升高，治疗后免疫功能恢复平衡，通过监测指标变化，有助于为临床诊治提供参考。