蛇足石杉内生真菌Penicillium chrysogenum MT-40的代谢产物研究

贾放放，齐博文，张蓓蓓，王雯静，王 阳，石璠钰，刘 晓，朱枝祥，王 娟*，史社坡*

蛇足石杉内生真菌MT-40的代谢产物研究

贾放放1, 2，齐博文1，张蓓蓓1，王雯静1，王 阳1，石璠钰1，刘 晓1，朱枝祥1，王 娟1*，史社坡1*

1. 北京中医药大学中药学院 中药现代研究中心，北京 100029 2. 高平市中医医院，山西 高平 048400

研究蛇足石杉内生真菌MT-40的代谢产物。利用硅胶、Sephadex LH-20及半制备液相色谱等方法进行分离纯化，根据化合物的理化性质及IR、MS、NMR等数据鉴定化合物的结构；利用体外模型进行抑制血小板ATP释放及抗乙酰胆碱酯酶活性筛选。从MT-40固体发酵培养后的代谢产物中分离得到了20个化合物，分别鉴定为(±)--(3a,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,13a-dodecahydrocyclododeca []oxazol- 2-yl)-4-hydroxybenzamide（1）、cyclo-(Trp-Tyr)（2）、cyclo-(Trp-Phe)（3）、meleagrin（4）、alternariol（5）、alternariol methyl ether（6）、altenuene（7）、koninginin B（8）、koninginin F（9）、koninginin D（10）、过氧化麦角甾醇（11）、β谷甾醇（12）、volemolide（13）、4-hydroxy-17-methylincisterol（14）、4-hydroxy-3,6-dimethyl-2-pyran-2-one（15）、对羟基苯甲酸（16）、对羟基苯甲醛（17）、香草酸（18）、对羟基苯乙酸（19）、酪醇（20）。化合物1为新化合物，命名为(±)-盘尼西碱A；化合物5在100 μmol/L时有一定的抑制血小板释放ATP作用，抑制率为（40.6±5.2）%；所有化合物在100 μmol/L时未表现出乙酰胆碱酯酶抑制活性。

蛇足石杉；内生真菌；产黄青霉菌；生物碱；聚酮；(±)-盘尼西碱A；alternariol

植物内生真菌（endophyte）是指一类部分或全部生活史存在于健康植物组织内部，而不使宿主植物表现出明显感染症状的微生物[1]。由于寄主植物的不同及其生存环境的差异，植物内生菌的种类多样、数目庞大，且在长期进化过程中形成了丰富的代谢系统，使其次生代谢产物结构新颖、类群丰富、生物活性显著。目前从植物内生菌中分离鉴定的化合物包括生物碱、萜类、蒽醌、𠮿酮、甾醇、多肽等多种成分，并发现了一系列具有活性的天然产物，如具有动物神经毒性的麦角生物碱和吲哚生物碱，具有植物抗毒素样作用的细胞松弛素，以及其他活性物质，包括抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗病毒等天然化合物。这些代谢产物结构丰富多样，是活性天然产物的重要来源之一[2-6]。因此，内生真菌代谢产物的系统研究对于发现更多结构新颖的活性天然产物具有重要意义。

蛇足石杉(Thunb. ex Murray) Trev.为石杉科石杉属多年生草本蕨类植物，全草具有散瘀消肿、清热解毒的功效。蛇足石杉各个组织中含有丰富的内生真菌，文献报道从部分蛇足石杉来源的内生真菌中分离得到了生物碱、倍半萜、多肽等多种化合物[7-12]，但是相对于蛇足石杉中所含有的丰富的内生菌来说，目前这些内生菌代谢产物的研究明显不足。因此，进一步挖掘蛇足石杉内生真菌次生代谢产物，有望发现结构新颖的活性天然产物。在前期研究中，本课题组对蛇足石杉中的内生真菌进行了分离鉴定，并对部分真菌代谢产物进行了系统研究，发现了一系列结构新颖的化合物[13-16]。本实验主要对蛇足石杉内生真菌MT-40进行了系统的化学成分研究，固体发酵培养后分离鉴定了20个化合物，分别为(±)--(3a,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,13a-dodecahydrocyclododeca[]oxazol-2-yl)-4-hydroxybenzamide（1）、cyclo-(Trp-Tyr)（2）、cyclo-(Trp-Phe)（3）、meleagrin（4）、alternariol（5）、alternariol methyl ether（6）、altenuene（7）、koninginin B（8）、koninginin F（9）、koninginin D（10）、过氧化麦角甾醇（ergosterol peroxide，11）、β-谷甾醇（βsitosterol，12）、volemolide（13）、4-hydroxy-17-methylincisterol（14）、4- hydroxy-3,6-dimethyl-2-pyran-2-one（15）、对羟基苯甲酸（-hydroxybenzoic acid，16）、对羟基苯甲醛（4-hydroxybenzaldehyde，17）、香草酸（4- hydroxy-3-methoxybenzoic acid，18）、对羟基苯乙酸（4-hydroxyphenylacetic acid，19）、酪醇（tyrosol，20）。其中化合物1为新化合物，命名为(±)-盘尼西碱A。并对分离鉴定的化合物进行了抑制血小板释放ATP活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性的研究。

1 仪器与材料

Autopol IV全自动旋光仪（美国Rudolf公司）；UV-2401PC紫外分光光度计（日本Shimadzu公司）；470 FT-IR红外光谱仪（美国Thermo公司）；XT4显微熔点测定仪（北京科仪电光仪器厂）；高效液相离子阱飞行时间质谱分析系统：UFLC SIL-20AC自动进样器，CTO-20AC柱温箱，SPD M20A紫外检测器，LC-20ADXR泵，IT-TOF-MS配备ESI离子源（日本Shimadzu公司）；Varian 500核磁共振仪（美国Varian公司）；Waters 2998半制备型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；ODS半制备柱（SunFireTMC18，150 mm×10 mm，5 μm）；Sephadex LH-20填料（瑞典Amerasham Biosciences公司）；ODS柱色谱填料（Li-Chroprep RP-C18，40～63 μm，德国Merck公司）；D101大孔树脂、柱色谱用硅胶（200～300目）及薄层色谱用GF254硅胶预制板均为青岛海洋化工厂生产。M1000型多功能酶标仪（美国TECAN公司）；碘代硫代乙酰胆碱、5,5-二硫代二硝基苯甲酸、二甲基亚砜、十二烷基硫酸钠、荧光素酶原液、ATP、凝血酶均由Sigma公司提供；D-荧光素钠盐购于北京百灵威科技有限公司；HBSS缓冲液（Hank’s Balanced Salt Solution，HBSS）购于美国赛默飞世尔科技公司；石杉碱甲（批号80/100629）购于上海诗丹德标准技术服务有限公司；电鳗乙酰胆碱酯酶由上海源叶生物公司提供。

蛇足石杉(Thunb ex Murray) Trev.采自福建省南平市（标本编号201507）。本研究所用菌株由课题组自蛇足石杉中分离，根据其形态特征及ITS rDNA序列鉴定为产黄青霉菌，菌种保存于北京中医药大学现代研究中心（菌种编号MT-40）。

2 内生菌的发酵培养及代谢产物的提取分离

MT-40于无菌环境下接种至0.5 L×40瓶糙米培养基中，室温培养40 d后，用醋酸乙酯超声提取6次。提取液合并滤过，减压浓缩得浸膏提取物130 g。经正相硅胶柱色谱，石油醚-醋酸乙酯（10∶1→0∶1）、二氯甲烷-甲醇（20∶1→0∶1）梯度洗脱，合并得到10个流分（Fr. A～J）。Fr. D经过正相硅胶柱色谱分离，收集合并相同部分，得到7个流分（Fr. D1～D7），其中Fr. D3经Sephadex LH-20柱色谱分离并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物19（2.5 mg；流动相为甲醇-水90∶10）和16（2.5 mg；流动相为甲醇-水90∶10）；Fr. D4经Sephadex LH-20柱色谱并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物5（2.8 mg；流动相：甲醇-甲酸水80∶20）；Fr. D5经Sephadex LH-20柱色谱分离并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物6（2.5 mg；流动相为甲醇-甲酸水70∶30）；Fr. D6经Sephadex LH-20柱色谱分离并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物13（2.0 mg；流动相为乙腈-甲酸水45∶55）和14（1.9 mg；流动相为乙腈-甲酸水45∶55）；Fr. D7用正相硅胶柱色谱反复进行梯度洗脱，得到化合物11（5.0 mg）和12（3.5 mg）。Fr. E经正相硅胶柱色谱分离，收集合并相同部分，得到5个流分（Fr. E1～E5），其中Fr. E3经反相ODS液相色谱并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物1（2.5 mg；流动相为甲醇-水65∶35）和8（2.3 mg；流动相为甲醇-水50∶50）；Fr. E4经Sephadex LH-20柱色谱分离并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物15（2.9 mg；流动相为甲醇-甲酸水45∶55）、17（2.5 mg；流动相为甲醇-甲酸水45∶55）、18（2.4 mg；流动相为甲醇-甲酸水25∶75）和20（2.4 mg；流动相为甲醇-甲酸水25∶75）。Fr. F经正相硅胶柱色谱分离，收集合并相同部分，得到5个流分（Fr. F1～F5），其中Fr. F3经Sephadex LH-20柱色谱分离并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物7（2.8 mg；流动相为甲醇-水50∶50）；Fr. F4经反复重结晶得到化合物4（20.0 mg）；Fr. F5经反相ODS液相色谱并结合半制备液相色谱分离纯化得到化合物2（1.9 mg；流动相为乙腈-甲酸水45∶55）、3（1.5 mg；流动相为乙腈-甲酸水45∶55）、9（2.8 mg；流动相为甲醇-水30∶70）和10（2.5 mg；流动相为甲醇-水30∶70）。

3 结构鉴定

表1 化合物1的1H- 和13C-NMR数据(500/125 MHz, CDCl3)

Table 1 1H- and 13C-NMR data of compound 1 (500/125 MHz, CDCl3)

碳位δHδC 2 155.1 43.46 (m)50.0 51.95 (m), 1.81 (m)31.1 61.78 (m), 1.23 (m)26.4 71.51 (m)25.6 81.23 (m)25.5 91.09 (m), 0.86 (m)24.7 101.09 (m), 0.86 (m)24.7 111.23 (m)25.5 121.51 (m)25.6 131.78 (m), 1.23 (m)26.4 141.95 (m), 1.81 (m)32.5 154.16 (m)57.4 1′ 171.3 2′ 128.7 3′,7′7.45 (d, J = 8.5 Hz)129.5 4′,6′6.77 (d, J = 8.5 Hz)115.6 5′ 159.1

图1 化合物1结构与关键HMBC ()、1H-1H COSY () 相关

化合物4：黄色粉末，mp 250～252 ℃，HR-ESI-MS/: 434.180 7 [M＋H]+（计算值为434.182 3），分子式为C23H23N5O4。1H-NMR (500 MHz, DMSO-6): 3.66 (3H, s, 1-OCH3), 7.54 (1H, d,= 8.0 Hz, H-4), 7.04 (1H, t,= 7.5 Hz, H-5), 7.26 (1H, t,= 7.5 Hz, H-6), 6.98 (1H, d,= 8.0 Hz, H-7), 5.25 (1H, s, H-8), 9.26 (1H, s, 9-OH), 10.13 (1H, s, 14-NH), 8.19 (1H, s, H-15), 7.77 (1H, s, H-18), 12.91 (1H, s, 19-NH), 7.36 (1H, s, H-20), 6.00 (1H, s, H-22), 4.98 (2H, m, H-23), 1.20 (6H, s, H-24, H-25)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 64.8 (1-OCH3), 101.3 (C-2), 52.2 (C-3), 125.6 (C-3a), 124.7 (C-4), 123.2 (C-5), 127.9 (C-6), 111.5 (C-7), 146.3 (C-7a), 109.1 (C-8), 142.9 (C-9), 158.5 (C-10), 123.7 (C-12), 164.9 (C-13), 106.8 (C-15), 126.0 (C-16), 137.7 (C-18), 134.2 (C-20), 41.8 (C-21), 143.4 (C-22), 112.9 (C-23), 24.3 (C-24), 23.2 (C-25)。以上数据与文献报道一致[21]，故鉴定化合物4为meleagrin。

化合物5：黄色粉末，mp 319～321 ℃，HR-ESI-MS/: 257.044 4 [M－H]−（计算值为 257.045 5），分子式为C14H10O5。1H-NMR (500 MHz, DMSO-6): 6.67 (1H, brs, H-5′), 6.31 (1H, brs, H-4), 6.59 (1H, brs, H-3′), 7.20 (1H, brs, H-6), 2.65 (3H, brs, H-7′)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 138.3 (C-1), 97.4 (C-2), 164.7 (C-3), 100.9 (C-4), 164.1 (C-5), 104.3 (C-6), 165.5 (C-7), 109.0 (C-1′), 138.1 (C-2′), 101.6 (C-3′), 158.4 (C-4′), 117.5 (C-5′), 152.6 (C-6′), 25.3 (C-7′)。以上数据与文献报道一致[22]，故鉴定化合物5为alternariol。

化合物6：黄色粉末，mp 275～277 ℃，HR-ESI-MS/: 271.062 2 [M－H]−（计算值为271.061 2），分子式为C15H12O5。1H-NMR (500 MHz, DMSO-6): 6.73 (1H, brs, H-5′), 6.66 (1H, brs, H-3′), 6.61 (1H, brs, H-4), 7.21 (1H, brs, H-6), 2.73 (3H, s, H-7′), 3.90 (3H, s, 5-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 138.4 (C-1), 98.5 (C-2), 164.0 (C-3), 99.2 (C-4), 164.7 (C-5), 103.4 (C-6), 166.2 (C-7), 109.5 (C-1′), 137.8 (C-2′), 101.6 (C-3′), 158.7 (C-4′), 117.6 (C-5′), 152.6 (C-6′), 25.0 (C-7′), 55.8 (5-OCH3)。以上数据与文献报道一致[23]，故鉴定化合物6为alternariol methyl ether。

化合物11：白色针状结晶（甲醇），mp 171～173 ℃，EI-MS/: 428 [M]+，分子式为C28H44O3。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 3.93 (1H, m, H-3), 6.21 (1H, d,= 8.5 Hz, H-6), 6.45 (1H, d,= 8.5 Hz, H-7), 0.85 (3H, s, H-18), 1.20 (3H, s, H-19), 0.96 (3H, d,= 6.5 Hz, H-21), 5.11 (1H, dd,= 8.5, 15.5 Hz, H-22), 5.19 (1H, dd,= 8.5, 15.5 Hz, H-23), 0.79 (3H, d,= 5.0 Hz, H-26), 0.77 (3H, d,= 5.0 Hz, H-27), 0.87 (3H, d,= 7.0 Hz, H-28)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 34.9 (C-1), 30.3 (C-2), 66.7 (C-3), 37.1 (C-4), 82.4 (C-5), 135.6 (C-6), 130.9 (C-7), 79.6 (C-8), 51.2 (C-9), 37.0 (C-10), 23.6 (C-11), 39.5 (C-12), 44.7 (C-13), 51.9 (C-14), 20.2 (C-15), 28.9 (C-16), 56.4 (C-17), 13.1 (C-18), 18.4 (C-19), 39.5 (C-20), 20.8 (C-21), 135.4 (C-22), 132.5 (C-23), 43.0 (C-24), 33.3 (C-25), 19.9 (C-26), 18.4 (C-27), 17.8 (C-28)。以上数据与文献报道的一致[26]，故鉴定化合物11为过氧化麦角甾醇。

化合物12：白色结晶（甲醇），mp 137～139 ℃，EI-MS/: 414 [M]+，分子式为C29H50O。1H-NMR (500 MHz, DMSO-6): 3.50 (1H, m, H-3), 5.32 (1H, d,=.0 Hz, H-6), 0.65 (3H, s, H-18), 0.98 (3H, s, H-19), 0.90 (3H, d,= 6.5 Hz, H-21), 0.83 (3H, d,= 4.5 Hz, H-26), 0.78 (3H, s, H-27), 0.85 (3H, d,= 2.0 Hz, H-29)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 37.5 (C-1), 31.9 (C-2), 72.0 (C-3), 42.5 (C-4), 141.0 (C-5), 121.9 (C-6), 32.1 (C-7), 32.1 (C-8), 50.3 (C-9), 36.7 (C-10), 21.3 (C-11), 40.0 (C-12), 42.5 (C-13), 57.0 (C-14), 24.5 (C-15), 28.5 (C-16), 56.2 (C-17), 12.2 (C-18), 19.6 (C-19), 36.4 (C-20), 19.0 (C-21), 34.1 (C-22), 26.2 (C-23), 46.0 (C-24), 29.3 (C-25), 19.2 (C-26), 20.1 (C-27), 23.3 (C-28), 12.1 (C-29)。以上数据与文献报道的一致[27]，故鉴定化合物12为β-谷甾醇。

化合物15：白色粉末，mp 184～186 ℃，HR-ESI-MS/: 139.042 0 [M－H]−（计算值为139.040 1），分子式为C7H8O3。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 5.93 (1H, s, H-5), 1.82 (3H, s, H-7), 2.16 (3H, H-8)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 169.7 (C-2), 98.3 (C-3), 161.1 (C-4), 103.2 (C-5), 160.5 (C-6), 8.5 (C-7), 19.6(C-8)。以上数据与文献报道的一致[30]，故鉴定化合物15为4-hydroxy-3,6- dimethyl-2-pyran-2-one。

化合物16：浅黄色粉末，mp 214～216 ℃，HR-ESI-MS/: 137.024 9 [M－H]−（计算值为137.024 4），分子式为C7H6O3。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.83 (2H, d,= 8.0 Hz, H-2, 6), 6.77 (2H, d,= 8.0 Hz, H-3, 5)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 122.9 (C-1), 133.1 (C-2, 6), 116.2 (C-3, 5), 163.5 (C-4), 172.8 (C-7)。以上数据与文献报道一致[31]，故鉴定化合物16为对羟基苯甲酸。

化合物17：白色粉末，mp 106～108 ℃，HR-ESI-MS/: 121.028 2 [M－H]−（计算值为121.029 5），分子式为C7H6O2。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.75 (2H, d,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.89 (2H, d,= 8.5 Hz, H-3, 5), 9.74 (1H, s, H-7)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 128.6 (C-1), 132.0 (C-2, 6), 115.5 (C-3, 5), 163.7 (C-4), 191.4 (C-7)。以上数据与文献报道的一致[32]，故鉴定化合物17为对羟基苯甲醛。

化合物18：白色粉末，mp 200～202 ℃，HR-ESI-MS/: 167.035 8 [M－H]−（计算值为 167.035 0），分子式为C8H8O4。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.53 (1H, s, H-2), 6.80 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 7.51 (1H, d,= 8.0 Hz, H-6), 3.87 (3H, s, -OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 123.2 (C-1), 115.8 (C-2), 148.7 (C-3), 152.4 (C-4), 113.8 (C-5), 125.1 (C-6), 169.4 (C-7), 56.5 (-OCH3)。以上数据与文献报道的一致[33]，故鉴定化合物18为香草酸。

化合物19：无色针状结晶（甲醇），mp 148～150 ℃，HR-ESI-MS/: 151.041 4 [M－H]−（计算值为 151.040 1），分子式为C8H8O3。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.83 (2H, d,= 8.0 Hz, H-2, 6), 6.77 (2H, d,= 8.0 Hz, H-3, 5), 3.31 (2H, s, H-7)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 126.9 (C-1), 131.5 (C-2, 6), 116.3 (C-3, 5), 157.4 (C-4), 41.2 (C-7), 176.4 (C-8)。以上数据与文献报道的一致[34]，故鉴定化合物19为对羟基苯乙酸。

化合物20：白色片状晶体（甲醇），mp 89～91 ℃，EI-MS/: 138 [M]+，分子式为C8H10O2。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 3.68 (2H, t,= 7.5 Hz, H-1), 2.71 (2H, t,= 7.5 Hz, H-2), 7.02 (2H, d,= 8.0 Hz, H-2′, 6′), 6.69 (2H, d,= 8.0 Hz, H-3′, 5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 63.2 (C-1), 38.0 (C-2), 129.4 (C-1′), 129.6 (C-2′, 6′), 114.7 (C-3′, 5′), 155.3 (C-4′)。以上数据与文献报道的一致[35]，故鉴定化合物20为酪醇。

4 活性筛选

参考文献报道方法[36]测定乙酰胆碱酯酶抑制活性，抗血小板释放ATP作用方法[16]如下：设对照组、模型组和给药组，每组设3个复孔。各组分别加入100 μL血小板悬液，放入CO2培养箱孵育5 min。给药组加入25 μL不同浓度（0、4、20、100 μmol/L）的化合物，对照组和模型组加入等体积的HBSS缓冲液。随后在给药组和模型组加入25 μL凝血酶至终浓度0.05 U/mL，对照组加入等体积的HBSS缓冲液。在各孔加入50 μL荧光素酶底物，室温反应5 min，多功能酶标仪测定生物发光值（RLU），按照公式计算各化合物对血小板释放ATP的抑制率和半数抑制浓度（median inhibitory concentration，IC50）值。

抑制率＝(RLU模型组均值－RLU给药组均值)/(RLU模型组均值－RLU对照组均值)

结果表明化合物5在100 μmol/L时有一定的抗血小板释放ATP作用，其抑制率为（40.6±5.2）%。阳性药LY294002抑制率为（102.7±3.1）%；化合物1抑制率为（32.9±9.6）%，其他化合物抑制率均小于20%；所有化合物在100 μmol/L时对乙酰胆碱酯酶不显示抑制活性，所有化合物的抑制率均小于10%，阳性药石杉碱甲IC50为（0.54±0.02）μmol/L。

5 讨论

本研究对蛇足石杉内生真菌MT-40的化学成分进行了系统分离，得到20个化合物，包括生物碱类化合物、聚酮类化合物、甾体类化合物和小分子芳香类化合物，其中化合物1为新化合物。新化合物1的结构中含有独特的二氢噁唑并十二元大环结构，这类结构在文献报道的天然产物中非常少见，根据其结构推测可能是在聚酮合酶（polyketide synthase，PKS）、非核糖体肽合成酶（nonribosomal peptide synthetase，NRPS）、酰基转移酶的共同作用下生成，但其确切的合成机制尚在研究中。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

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Metabolites fromMT-40, an endophytic fungus isolated from

JIA Fang-fang1, 2, QI Bo-wen1, ZHANG Bei-bei1, WANG Wen-jing1, WANG Yang1, SHI Fan-yu1, LIU Xiao1, ZHU Zhi-xiang1, WANG Juan1, SHI She-po1

1. Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine, School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China 2. Gaoping Chinese Medicine Hospital, Gaoping 048400, China

To investigate the chemical metabolites fromMT-40, an endophytic fungus isolated from.The compounds were isolated and purified by using various column chromatographies including silica gel, Sephadex LH-20, and-preparative HPLC. The structures were established using extensive spectroscopic techniques such as IR, MS, and NMR. The inhibitory activities against ATP release of platelets and acetylcholinesterase of all the isolates were also investigated by usingmodels.Twenty compounds including (±)--(3a,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,13a- dodecahydrocyclododeca []oxazol-2-yl)-4-hydroxybenzamide (1), cyclo-(Trp-Tyr) (2), cyclo-(Trp-Phe) (3), meleagrin (4), alternariol (5), alternariol methyl ether (6), altenuene (7), koninginin B (8), koninginin F (9), koninginin D (10), ergosterol peroxide (11), βsitosterol (12), volemolide (13), 4-hydroxy-17-methylincisterol (14), 4-hydroxy-3,6-dimethyl-2-pyran-2-one (15),-hydroxybenzoic acid (16), 4-hydroxybenzaldehyde (17), 4-hydroxy-3- methoxybenzoic acid (18), 4-hydroxyphenylacetic acid (19), and tyrosol (20) were isolated from the solid fermentation cultures ofMT-40.Compound 1 is a new compound; Compound 5 exhibited slight inhibitory activities on ATP release of thrombin-activated platelets with inhibition rate of (40.6 ±5.2)% at the concentration of 100 μmol/L. All the compounds didn′t exhibit inhibitory activities on AChE at the concentration of 100 μmol/L.

(Thunb. ex Murray) Trev.; endophytic fungi;; alkaloids; polyketides; (±)-penicialkaloid A; alternariol

R284.1

A

0253 - 2670(2022)13 - 3904 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.13.003

2021-12-23

国家自然科学基金项目（81773842）；国家自然科学基金项目（81903495）；北京中医药大学新教师启动基金项目（2021-JYB-XJSJJ-005）

贾放放，女，主要从事中药化学成分研究。E-mail: jiaff017@163.com

史社坡，研究员，主要从事中药活性成分发现及合成生物学研究。E-mail: shishepo@163.com

王 娟，讲师，主要从事中药活性成分发现及合成生物学研究。E-mail: wjwangjuan2012@163.com

[责任编辑 王文倩]