气相色谱-质谱法测定苹果中甲拌磷重复性和再现性统计分析及应用

许瑞清，杨 柳，甘雨鑫，刘建春

（1.山西锦烁生物医药科技有限公司，山西晋中 030600；2.山西省检验检测中心，山西太原 030032）

检验检测机构向社会出具具有证明作用的数据和结果，其中数据准确是判定其结果准确的基础[1]。在科技研发与产品生产中，数据准确也是后续进行研究的基石，对后续实验具有指导意义[2]。测量方法与结果的准确度由结果的正确度和精密度评价。正确度评价数据的偏离情况，用给定真值或参考值偏倚评定；精密度评价数据的离散水平，用测量数据重复性与再现性评估[3]。本文采用甲拌磷气相色谱质谱联用仪测定法测量数据重复性和再现性数据统计分析，建立一种数据评价方法，并探讨重复性和再现性的应用。

1 测量方案设计

1.1 实验室对比方案

实验室1主导，实验室2～8参加，选取本底为未检出的苹果样品，向试样中添加4种含量水平的甲拌磷，进行测定。各实验室将各含量水平测定3组数据，主导实验室统计分析。

1.2 测量方法

采用《食品安全国家标准 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（GB 23200.113—2018）测定苹果中甲拌磷的含量[4-5]。称取10 g试样于50 mL离心管中，加 10 mL乙腈、4 g硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠及1颗陶瓷均质子。振荡1 min，于4200 r/min离心5 min。取6 mL加入内含900 mg MgSO4和150 mg PSA的15 mL离心管中，涡旋 1 min，于4200 r/min离心5 min。取2 mL至10 mL的试管中，40 ℃水浴氮吹近干，加入20 μL内标溶液，用1 mL乙酸乙酯复溶，过膜，待测。

2 测量数据

8个实验室4种含量水平的测量数据见表1。

表1 各实验室各含量测量数据（单位：mg/kg）

3 离群值的检验

采用柯克伦检验、格拉布斯检验评定离群数据。依据贝塞尔公式计算标准偏差，数据见表2。

表2 各实验室各含量标准偏差

3.1 柯克伦检验

各实验室各含量测量数据为n，采用测量结果标准偏差评定数据离群值。选取各含量s最大值，按式（1）计算检验统计量值，与柯克伦检验临界值进行比较。n=3，p=8，柯克伦检验5%和1%的临界值为0.516，0.615。

式中：C代表柯克伦检验；s代表标准偏差；p代表实验室总数；i代表实验室编号。

添加水平为0.01 mg/kg时，实验室8柯克伦检验统计量最大，统计量=0.643，为离群值；添加水平为0.10 mg/kg时，实验室8柯克伦检验统计量最大，统计量=0.498；含量0.20 mg/kg，实验室5柯克伦检验统计量最大，统计量=0.295；含量0.50 mg/kg，实验室5柯克伦检验统计量最大，统计量=0.139。

3.2 格拉布斯检验

测量结果呈正态分布，采用格拉布斯检验最大值与最小值的偏倚。同组数据按从小到大的顺序排列，各含量格拉布斯检验结果见表3。

表3 各含量格拉布斯检验结果

最大值y(p)、最小值y(1)格拉布斯统计量Gp的计算公式如下：

式中：Gp表示格拉布斯检验值；yi表示第i个实验室的测量值；y—为各实验室的平均值；s表示标准偏差。

两个最大值y(p),y(p-1)格拉布斯统计量Gp的计算公式如下：

各数值标准偏差的平方s02的计算公式如下：

两个最小值y(1),y(2)格拉布斯统计量Gp的计算公式如下：

依据单检验原则，歧离值为2.1260，临界值为2.3870，含量0.01 mg/kg实验室8测量值为离群值，含量0.10 mg/kg实验室8测量值为离群值；依据双检验原则，歧离值为0.1101，临界值为0.0563， 含量0.01 mg/kg实验室8测量值为离群值，含量 0.20 mg/kg实验室5测量值为离群值。相关含量剔除一个数据后，经检验，无歧离值。

4 数据计算

表4 各含量检验数据结果

5 结论

8个实验室参与一致水平实验，共剔除3个离群值。甲拌磷气相色谱-质谱联用仪测定法的精密度表述为0.01～0.50 mg/kg，重复性标准差sr= 0.0019 mg/kg，再现性标准差sR=0.0029 mg/kg。

本文针对样品同一个实验内两组测量结果说明。第一组测试结果数为n1，其算数平均值为，第二组测试结果数为n2，其算数平均值为。式计算出在95%的置信概率下重复性标准差应小于r。

6 结语

再现性和重复性对精密度的评定应用广泛，是评定数据准确度的重要手段，其优越性在于可核算出某行业某方法的平均水平，局限性在于所需数据量庞大。在食品检测领域中，农药残留项目常用重复性限和再现性限评定测量结果，标准制定方经过严密分析得出行业准确度范围。掌握这一评定方法，能更好地保证结果的有效性。