三种不同免疫检验法在IV诊断中的可靠性分析

朱刘丹 赵梦月

郑州市疾病控制中心检验科 (河南 郑州 450000)

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)是致使人们感染艾滋病的主要原因，其传播途径包含血液传播、性传播、母婴传播等，一经感染会破坏机体免疫功能，继而造成机会性感染以及肿瘤等疾病，该病毒传播速度较快，且治愈率较差，致死率较高。因此及早确诊艾滋病患者，对防控艾滋病具有积极意义[1-3]。金标快速检测法检测速度较快，3～20min即可完成检测，对于急诊患者友好度较高，但检测时需使用新鲜血液样本；时间分辨免疫法属非放射微量分析技术，具有标准曲线范围较广、自动化检测、可重复高等优势，且其筛查效率较高，但在临床实际应用时，常会检出弱阳性标本；酶联免疫吸附试验操作较为简便，所用试剂稳定性更佳，且诊断限制较少，应用价值较高。基于此，选取我院152例艾滋病患者，分析三种不同免疫检验法诊断的可靠性。具体分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料本研究选取2018年1月至2020年2月我院收治艾滋病患者152例。

纳入标准：经免疫印痕迹法被确诊为艾滋病；无肢体功能障碍或内科疾病；意识清醒。排除标准：病情不稳定；存在严重代谢异常疾病；存在严重精神疾病。男性83例，女性69例；年龄27～44岁，平均年龄(33.15±4.20)岁。

1.2 方法所有患者均行金标快速检测法、时间分辨免疫法、酶联免疫吸附试验诊断。

1.2.1 金标快速检测法 选用购自上海科华生物工程股份有限公司的金免疫试纸，抽取血液样本，置于金免疫试纸加样区，10s后，其被样本全部浸没，仔细查看试纸颜色变化，若结果显示1条红线，表示受检者阴性；若结果显示2条红线，表示受检者阳性。

1.2.2 时间分辨免疫法 于清晨抽取3mL空腹静脉血，以3000r/min的速度离心，置于低温环境下冷藏待检。选用购自上海新波公司的Easy Cuta时间分辨免疫荧光仪检测，并予以其配套试剂。

1.2.3 酶联免疫吸附试验 于清晨抽取3mL空腹静脉血，以3000r/min的速度离心，置于低温环境下冷藏待检。予以酶复合物稀释液将血清稀释，然后进行孵育、洗板、加底物共60min，予以Bio Tek ELx800自动化酶免分析仪诊断。

1.3 观察指标(1)诊断结果，以免疫印痕迹法确诊为“金标准”，统计金标快速检测法、时间分辨免疫法、酶联免疫吸附试验的诊断结果。(2)诊断检出率，对比金标快速检测法、时间分辨免疫法、酶联免疫吸附试验的诊断敏感度、特异度、准确度。

1.4 统计学方法采用SPSS 22.0分析，计数资料n(%)表示，χ2检验，检验水准α=0.05。

2 结 果

2.1 诊断结果免疫印痕迹法诊断HIV真阳性99例，真阴性53例；金标快速检测法诊断真阳性82例，真阴性38例；时间分辨免疫法诊断真阳性83例，真阴性39例；酶联免疫吸附试验诊断真阳性92例，真阴性48例，见表1。

表1 诊断结果(例)

2.2 诊断检出率酶联免疫吸附试验敏感度92.93%、特异度90.57%、准确度92.11%较金标快速检测法82.83%、73.58%、78.95%，时间分辨免疫法83.84%、75.47%、80.26%高(P＜0.05)，见表2。

表2 诊断检出率[n(%)]

3 讨 论

虽我国医疗科技快速发展，但艾滋病仍为棘手病症，而HIV则是导致机体产生免疫力功能障碍，引发艾滋病的主要因素[4-6]。目前，临床对其并无有效治疗方法，且因该疾病传染性较高，故社会当前对其防治性重视度较高，只有及时将确诊艾滋病的患者进行有效隔离，才可避免其大范围传染，而可对艾滋病进行准确判断的诊断方式便显得尤为重要[7-8]。

金标快速检测法所用胶体金为红色，在检测期间安全性较高，且红色标记线的稳定性较佳，检验过程也相对简单，检测血清的反应时间＜30min，且其无须处理血液，可减少血液受湿度、温度的影响，且在操作时无需仪器，但此方式的特异度较低，且血液样本需维持新鲜状态，具有局限性。时间分辨免疫法的自动化操作程度较高，对于高通量、快速检测较为友好，适宜大批量标本筛查，可利用荧光强度，依据产物荧光强度以及相对应荧光强度的比值，对反应体系中所具有的分析物浓度进行判断，进而可定量分析，且此种检测方式并无放射性污染，操作流程较为简便，但具有时间局限性[9]。酶联免疫吸附试验包含双抗体夹心法、间接法，其中双抗夹心法可用于大分子抗原检测，而间接法可用于特定抗体检测，但两者的显色反应均较为清晰，肉眼可见，且因抗体或抗原的选择性，抗原抗体结合位置，在空间构型、化学结构上具有一定互补关系，故检出率较高，且其具有快速、易于标准化、简便、敏感等优势，故疾病判断更为准确，防治效果更佳[10]。本研究选取152例艾滋病患者作为研究对象予以金标快速检测法、时间分辨免疫法、酶联免疫吸附试验三种检测方式检测，结果显示，酶联免疫吸附试验敏感度92.93%、特异度90.57%、准确度92.11%较金标快速检测法82.83%、73.58%、78.95%，时间分辨免疫法83.84%、75.47%、80.26%高(P＜0.05)。当血清标本中具有HIV抗体时，应用金标快速检测法，其会线与金标记结合，又因层析作用，反应复合物会沿硝酸纤维膜逐渐向前移动，而当其与包被抗原相遇时，会产生Ag-Ab-Ag-Au复合物，于包被线上聚集，呈现出1条红色沉淀线，而包被膜上还具有1条质控线以作参照，故呈现出2条红线时，即可判断其为阳性，但会存在一定漏诊概率。时间分辨免疫法的检测原理是基于双抗原夹心的非竞争免疫分析，可利用镧系元素标记抗体或抗原，并依据镧系元素稀土螯合物荧光发光时间较长的特点，延缓测量时间，使短寿命背景荧光衰变后，对螯合物荧光进行测量，即可将非特异荧光干扰排除，进行定量分析，但该方式检测时间较长。酶联免疫吸附试验可予以抗体、酶二者结合，且并未对抗体免疫性反应的特异性造成较大改变，不影响酶活性，而补充相应底物，可使基质水解呈色，使还原型氢体的颜色发生变化，由无色向有色进行转变，利用呈色反应可察觉酶，且该检测方式还可于细胞水平上呈现出抗体所在部位，在具有较高敏感度、特异性的同时，还可利用微克水平或纳米水平给予定量，防止假阳性，整体诊断结果较佳。

综上所述，与金标快速检测法、时间分辨免疫法相比，酶联免疫吸附试验诊断HIV的敏感度、特异度、准确度更高，临床应用价值更高。