20-03软枣猕猴桃雄性试管苗炼苗技术研究

杨殿静 曲 淼 刘 政 王丹萍 张 功 何广仁

（通化市园艺研究所）

软 枣 猕 猴 桃（Actinidia arguta（Sieb.et Zucc.）Planch.ex Miq.），属猕猴桃科（Actinidiaceae），猕猴桃属（Actinidia），落叶大藤本，具有很高的营养价值和药用价值。种苗繁殖主要采用种子及扦插方式进行。但种子繁殖的周期长，苗木的生长势参差不齐；使用枝条扦插受到母株数量及质量限制，繁殖系数较低，减慢了优异资源的驯化及推广工作。

应用植物组织培养方法具有生长周期短、繁殖系数高等优点，应用此项技术可以加快软枣猕猴桃优异资源的驯化及种苗繁殖速度。其中试管苗炼苗技术是极其重要的过程。可分为二部分，一是温室炼苗，二是大田炼苗。本文是以延边大学农学院朴一龙教授提供的20-03软枣猕猴桃雄性株进行组织培养获得的试管苗进行炼苗试验结果的技术总结。

1 温室炼苗

1.1 温室试管苗瓶中炼苗

1.1.1 温室炼苗准备：①整地、翻地：破碎土块清除碎石杂物，用500倍多菌灵土壤消毒，喷后覆盖48小时，去膜，平整土地。②移栽炼苗材料：田园土、草炭土、珍珠岩、营养钵、晒水桶、剪刀、镊子、水盆、保温布、棚膜、遮阳网、支架，农药、化肥、操作台等，根据苗数量合理准备。③设备：加温、降温、保温、放风、遮阳调试。④最好专项专人。⑤运输：冬季室外温度高时可及时运输试管苗。

1.1.2 试管苗进入温室炼苗

试管苗炼苗是苗从无菌状态过度到有菌状态，苗从瓶中气候过度到温室、大田气候，叶片恢复闭合功能的过程，整个过程需要逐步适应，温度、湿度、光照强度、通风强度，水、肥、病虫害等每个阶段需要精准控制，相差一步，都有很大损失。

①整个软枣猕猴桃试管苗温室炼苗区，棚膜上要覆盖65%遮阳网。②进炼苗床：1米平床，头天苗床浇透水，第二天放入装在接种盘中的试管苗，扣好小拱棚，上面覆盖一层保温布，一层65%遮阳网。保证光照强度低于6000Lux。在瓶内湿度保护下，试管苗加强光照强度。③去培养瓶盖：进炼苗床5天后，去掉培养瓶瓶盖，降低瓶内湿度，让苗适应苗床小拱棚湿度、温度、光照强度和有菌环境。

试验结果讨论：去培养瓶盖后，炼苗天数不能超过4天，应及时拿出栽入育苗钵中进行下一步炼苗。经过试验，不打开瓶盖，试管苗可以延缓2～4天去瓶盖。可以根据工作准备情况、人员操作能力调整进入炼苗床的瓶数量、不开盖时间、开盖时间。

1.2 试管苗出瓶炼苗

表1 20-03雄株试管生根苗敞瓶天数与移栽成活率

1.2.1 装营养钵

①培养基质配制（见表2）

表2 20—03雄株试管生根苗移栽基质试验

试验结果讨论：软枣猕猴桃试管苗移栽基质易田园土∶草炭土∶珍珠岩70∶20∶10为宜，田园土宜选择壤土更利于生长和移栽。

②移栽基质装钵、消毒：移栽基质根据比例加入1%有机肥混拌，加入0.5%复合肥水，装入直径10厘米、高8厘米营养钵中，装入8分基质，上盘，放入苗床，用500倍多菌灵浇透消毒，覆盖地膜2天后再打开，准备栽苗。

1.2.2 移栽试管苗

①清洗试管苗：主要是清洗掉培养基，培养基宜于生长杂菌，污染苗的紧、根，引起苗死亡。用镊子去除已去瓶盖炼完苗的试管苗，放入清水中清洗干净残留在苗茎、根上的培养基，清洗2～3次。沥水2～5分钟，观察根没有水珠，说明培养基清洗干净，可以栽苗。②栽苗：在装有移栽基质的营养钵中间打直径2厘米，深2厘米的孔，放入清洗完的试管苗，根向下，不撅即可，覆盖后，先轻提后轻压。③入苗床：苗床宽1米，苗床间距0.5米。将栽入苗的营养钵摆放到苗床，苗床外围营养钵用土培好，保证苗床水不流失。苗要浇透水。④支棚架：苗床支0.5米高棚架，上覆盖65%遮阳网。

1.2.3 移栽管理

①温度管理（见表3）

表3 20-03雄株试管生根苗夜间温度与移栽成活率

试验结果讨论：炼苗不能低于10℃，适宜温度15～20℃，利用加温、保温（温室、苗床）措施保证夜间15℃以上。白天，控制温室温度不超过30℃，炼苗前期（营养钵未生成新根系前约10天左右）只能开放顶风，后期可在温室外气温达到10℃以上时才可以放底风，并且逐步开放。使温度慢慢与温室外白天、夜间相同，为大田炼苗做准备。

②湿度管理：炼苗湿度管理是从培养瓶中100%湿度逐步过度到温室炼苗拱棚湿度，温室炼苗拱棚湿度过度到温室湿度，温室湿度过度到大田湿度的过程；是培养瓶中试管苗从异养状态过度到自养状态的过程；叶片从敞开状态恢复到能够自我控制闭合功能的过程。

试管苗从无菌状态进入有菌状态的过程。湿度变化从大到小逐步进行，不能变化剧烈。开瓶时第一次湿度变化，在炼苗拱棚内，苗还在培养基上生长，苗床床面湿润，可保证湿度在80%，叶片开始恢复闭合功能。取出试管苗移栽到营养钵中，第二次湿度变化，试管苗根系进入有菌基质中，湿度前期应扣拱棚保证湿度80%，不宜剧烈变化，基质应保证温度并且透气，发新根，恢复根系自养功能。后期逐步降低湿度，同温室逐步一致。

③光照管理：炼苗光照管理是保证试管苗从培养室2000Lux低光照强度恢复到软枣猕猴桃大田苗50，000Lux左右高光照强度，通过各种技术手段逐步完成。从培养室生根阶段开始，加入散射光培养，提高光照强度让试管苗有适应性，进入温室开始加强遮光，防止强光灼伤试管苗叶片，在早晚、阴雨雪天撤去拱棚遮阳网，晴天再盖上遮阳网，反复多次，直到全部撤去拱棚遮阳网。

④水分管理：水分管理原则是保证营养钵土壤水分含水量65%。阴天不浇水或少浇水，晴天苗床边营养钵苗叶片稍微萎蔫或基质与营养钵有裂隙浇透水。浇水在早晨进行。

⑤肥料管理：分为二步，一是配制基质时进行；二是炼苗期进行。随着营养钵苗炼苗时间的延长，营养钵内基质中营养的消耗以及试管苗根系生长的局限，应该对试管苗进行营养补充，最好同水分管理同时进行。试管苗入营养钵二周开始追肥，0.3%K2HPO4、0.3%二铵、0.5%复合肥每一周一次，轮流使用。

⑥病虫草害管理：软枣猕猴桃苗期主要病害为根腐病、猝倒病、基腐病，由于温室湿度大，有时有灰霉病发生。防治方法一是每隔20天进行一次百菌清烟雾剂夜间熏棚；二是每周一次800倍多菌灵、1000倍甲基托布津间隔喷雾。

软枣猕猴桃苗期主要虫害为蛴螬、蝼蛄。试验表明，用马铃薯、苹果拌敌百虫诱杀效果高于灌地，诱杀3～5次，诱杀5天即可消灭虫害。杂草在苗高不超过5厘米高度可人工除草，个别大草拔出时用手按住软枣猕猴桃苗再拔出，以免带出苗或松动根系。

⑦通风管理：软枣猕猴桃试管苗炼苗中后期，炼苗30天左右，苗茎基部开始半木质化，已具有一定抗逆性，可以逐步加强通风，直到温室内与温室外全天通风。

讨论：温室炼苗各种因素相互作用，相互制约，每个时期的主要影响因素不同，应抓好主要因素，平衡其它因素。比如炼苗初期控制湿度、温度、光照强度、病虫害，在保证温度时，应以控制湿度、光照强度为主，兼顾控制病虫害。炼苗中后期以控制光照强度、通风为主，兼顾水分管理、肥料管理、病虫害管理。

2 大田炼苗

当软枣猕猴桃试管温室炼苗的环境与温室外环境相同或除降雨外相同时，经过5～7天，有条件移栽大田应移栽大田。

2.1 整地：①选地：软枣猕猴桃忌涝，应选排水良好地块做育苗地。②施肥：每亩施入有机肥1000千克或40千克复合肥。③耙地、翻地：清除石块、杂物，耕翻，做50厘米宽垄。④打床：2垄并1床，床面宽70厘米，整平。⑤覆防草地膜（黑地膜）：床面充分接受降雨后，覆盖地膜保水，或地膜下铺滴管，每15厘米有1个滴孔。

2.2 移栽：①移栽时期：7月15日前移栽，苗落叶时基部平均10～20厘米木质化，成熟芽5个以上，达到成熟苗。②打孔：苗床2行，间距40厘米，每行间距15厘米打孔，深8厘米，直径10厘米。

2.3 移栽苗：①移栽苗准备：营养钵苗浇透水，装入移栽盘。②移栽：去掉营养钵，栽入穴孔，压实。③封孔：浇透水，用土封住孔。防止杂草丛地膜孔边长出来。

2.4 支遮阳网：软枣猕猴桃苗期阳光直射，易引起叶片灼伤。可以在整个炼苗地支1.8米高65%遮阳网棚。

2.5 支架：每株苗立1.0～1.5米竹竿，或者在苗床中间立1.8米拉线，对苗用拉线引蔓，方便软枣猕猴桃苗攀爬。

3 苗期管理

①引蔓：将伏地枝条牵引到支架上。②修剪：每株只保留1个健壮枝，其余剪除。③除草：在杂草苗小时，及时拔除苗眼、操作道杂草。④追肥：炼苗20天后可以每隔10天喷一次叶面肥。⑤防寒：在苗落叶冻土之前，撤除遮阳网，同时撤去支架，放倒苗，覆盖玉米秸秆或其它防寒物。