2018—2020年新疆地区保育猪主要病毒性传染病的抗体检测与分析

常军帅，谢钫得，谢 静，屈勇刚，梁 晏，李 娜，党瑞莹，孙琼飞，邱国斌

（1.石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832003；2.动物疾病防控兵团重点实验室，新疆 石河子 832003；3.第四师畜牧兽医站，新疆 可克达拉 831304）

保育猪又称断奶仔猪，是指从仔猪断奶开始算起，到70日龄左右的猪群[1]。保育猪是成为后备猪、肥育猪等猪群的必经阶段，该阶段猪群的生长速度、健康状况及存活率直接影响着养殖带来的经济效益。但由于仔猪断奶后发育未完善，在各种应激（断奶应激、换料应激、合群应激、疫苗应激等）下极易出现腹泻、皮毛粗乱、采食量下降，同时母源抗体也在衰减，保育猪缺乏对各种疾病抵抗力[2]。病毒性传染病，对保育猪健康存在巨大威胁：猪圆环病毒病是由猪圆环病毒（PCV）引起的一种免疫抑制性疾病，其中2型（PCV2）危害最为严重，保育猪患病后，在断奶1周左右可出现断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS），主要表现为精神沉郁、皮毛粗乱、消瘦，剖检可见多器官衰竭、腹股沟淋巴结肿大，耐过猪则变为僵猪[3]；猪伪狂犬病（PR）是由伪狂犬病病毒（PRV）引起的，患病后保育猪出现体温升高、奇痒、腹泻、四肢划水等神经症状，日龄越小死亡率越高[4]；猪蓝耳病病毒（PRRSV）属于动脉炎病毒科、动脉炎病毒属的单股正链RNA病毒，保育猪患病后呼吸困难、皮肤发绀、发烧、嗜睡，保育猪感染后比16～24周龄的成年猪患病毒血症的持续时间更长[5-6]；猪瘟（CSF）在我国被列为一类动物疫病，随着疫苗普及，该病已转为温和型症状和病理变化，主要表现为在耳尖、蹄趾末端、尾尖有坏死病变，病猪逐渐衰竭而亡，死亡率可达30%[7]。

疫苗免疫是预防上述病毒性传染病最有效的方法之一，注射疫苗后，动物会在一段时间内产生稳定的抗体水平，可有效抵御病毒入侵。对于免疫效果需及时评价，根据评价结果，调整免疫程序，才能更有利于猪群的健康。本试验采用酶联免疫吸附试验（ELISA），对2018—2020年在新疆地区采集的304份保育猪血清进行抗体检测，以期为该地区的免疫工作提供帮助。

1 材料

1.1 样品

2018年1月至2020年12月期间从新疆石河子市、巴音郭楞蒙古自治州、伊犁、塔城地区、奎屯市、阿克苏市，随机采集304份血清样品，送至石河子大学动物科技学院传染病实验室进行检测。

1.2 材料和仪器

猪瘟病毒（CSFV）ELISA抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病病毒gB（PRV-gB）ELISA抗体检测试剂盒、蓝耳病病毒（PRRSV）ELISA抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病病毒gE（PRV-gE）ELISA检测试剂盒均购自北京爱德士元亨生物科技有限公司；猪圆环病毒2型（PCV2）ELISA抗体检测试剂盒，购自哈尔滨元亨生物药业有限公司；兽用一次性采血器5 mL为美康实业有限公司产品；自动酶标仪、微量移液器购自赛默飞世尔科技公司。

2 方法

2.1 样品处理

将保育猪固定好后，在前腔静脉窝45°进针，采集6 mL血液，室温下静置40 min，将血清收集后，放于4 ℃保存（8 d以内使用）。

2.2 ELISA检测方法

根据不同检测项目的说明书，进行PCV2、PRV-gB、PRV-gE、PRRSV、CSFV的抗体检测。注意各个检测过程中的温度及避光要求。

2.3 结果判定

PCV2：在酶标仪内使用OD450进行测定。试验成立的条件是阴性对照均值≤0.15，阳性对照均值≥0.60。临界值=阳性对照OD450均值×1/4。被检样品值＜临界值，判定为阴性；被检样品值≥临界值，则判定为阳性。

PRV-gB、PRV-gE：在酶标仪内使用OD650进行测定。当阴性均值-阳性均值≥0.3时，试验成立。通过计算S/N=样品值/阴性值，进行结果判定。当S/N＞0.70时，为阴性；当0.60＜S/N≤0.70时，为可疑；当S/N≤0.60时，为阳性。

PRRSV：在酶标仪内使用OD650进行测定。试验成立后，计算S/P值。其中S=样品值-阴性对照均值，P=阳性对照均值-阴性对照均值。S/P≥0.40为阳性，S/P＜0.40判为阴性。

CSFV：在酶标仪内使用OD450进行测定。试验判定成立后，计算阻断率。阻断率（%）=（阴性对照均值-样品均值）/阴性对照均值。当阻断率≤30%时，为阴性；当30%＜阻断率＜40%时，为可疑；当阻断率≥40%时，为阳性。

当出现可疑时，需再次进行检测。再次检测时不符合阳性标准，统一安排阴性处理（PRV-gE相反）。

2.4 数据分析

使用SPSS 20.0对数据进行统计分析，计算总体平均数。

3 结果

3.1 PCV2抗体检测结果

由表1可知，在2018—2020年中，新疆地区保育猪整体PCV2抗体阳性率为41.96%（60/143），其中2018年、2019年、2020年的PCV2抗体阳性率分别是63.33%（19/30）、26.56%（17/64）、48.98%（24/49）。在平均OD450值中，2019年的最低，为0.62；2018年最高，为0.73。

表1 不同年份的保育猪PCV2抗体检测结果

3.2 PRV-gB抗体检测结果

在2018—2020年中，新疆地区保育猪整体PRV-gB抗体阳性率为84.03%（100/119），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gB抗体阳性率分别是92.00%（46/50）、75.00%（33/44）、84.00%（21/25）。结果见表2。

表2 不同年份的保育猪PRV-gB抗体检测结果

3.3 PRV-gE抗体检测结果

在2018—2020年中，新疆地区保育猪整体PRV-gE抗体阳性率为28.21%（44/156），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gE抗体阳性率分别是12.00%（6/50）、20.45%（9/44）、46.77%（29/62）。结果见表3。

表3 不同年份的保育猪PRV-gE抗体检测结果

3.4 PRRSV抗体检测结果

由表4可知，在2018—2020年中，新疆地区保育猪整体PRRSV抗体阳性率为85.20%（259/304），其中2018年、2019年、2020年的PRRSV抗体阳性率分别是72.50%（29/40）、86.40%（108/125）、87.77%（122/139）。在平均S/P值中，2018年的最低，为1.17；2019年最高，为1.91。

表4 不同年份的保育猪PRRSV抗体检测结果

3.5 CSFV抗体检测结果

在2018—2020年中，新疆地区保育猪整体CSFV抗体阳性率为65.22%（135/207），其中2018年、2019年、2020年的CSFV抗体阳性率分别是60.00%（45/75）、65.31%（32/49）、69.88%（58/83）。结果见表5。

表5 不同年份的保育猪CSFV抗体检测结果

4 讨论与分析

疫苗免疫是生产中预防病毒性传染病必不可少的环节，注射疫苗可有效减少保育猪的死亡率和患病率，有效保证了养猪健康生产。但由于疫苗质量不合格、免疫途径不对、剂量太少、免疫程序不合理、技术人员操作不规范、免疫抑制性疾病的存在等因素，导致猪群免疫失败，耗时耗力，浪费钱财。在对2018—2020年新疆地区的保育猪进行PCV2、PRV-gB、PRV-gE、PRRSV、CSFV的抗体检测后发现，PCV2（41.96%）、CSFV（65.22%）的抗体阳性率均低于国家规定的70%[8]。当猪场存在PCV2后，猪易发流行性腹泻、细小病毒病、PRRS[9]。杨渗等[10]检测得出江苏省淮安市的保育猪PCV2抗体阳性率为46.32%（44/95）；程淑琴等[11]检测得出河北省部分地区的保育猪PCV2抗体阳性率为93.94%（62/66），均高于本次检测结果，造成这种结果的原因可能是各地免疫程序及饲养管理技术不同等。可通过检测哺乳仔猪的母源抗体水平，选择合适时间免疫PCV2疫苗，不给病毒可乘之机。

为防止哺乳阶段免疫次数过多，出现相互干扰情况，针对CSFV抗体阳性率低的情况，可在母猪产前加强免疫一次猪瘟疫苗，通过提高母源抗体的水平来保护保育猪免受CSFV感染，也可在转群应激过后及时进行疫苗免疫。PRV-gE抗体出现阳性率则提示保育猪群存在伪狂犬病阳性病例，由于PRV可垂直传播，建议对种猪群进行PRV-gE抗体检测，对抗体阳性猪只，再次进行PCR抗原检测，及时淘汰阳性猪才能保证猪场的健康生产[12]。PRRSV的抗体阳性率为85.20%（259/304），是本次检测中最高值，且高于国家规定的70%，继续保持即可。

除疫苗免疫外，保育猪的健康也离不开好的饲养环境、优质的饮水和饲料。在转入保育圈舍前，需对保育舍进行全面彻底消毒，保育床最好离地50 cm，方便粪便尿液漏下，减少有毒有害气体对仔猪呼吸系统的危害。根据断奶仔猪的体重、健康程度分圈舍，减少争斗。除供给高营养饲料外，还可在饲粮中添加中草药及益生菌，来提高断奶仔猪的抵抗力。只有全方位管理到位，才能保证保育猪达到最佳生长性能。