HELLS在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况及其与临床病理的相关性研究

食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)是常见的恶性肿瘤之一，其发病率及死亡率在全球仍居前5位

，但该病早期多无典型临床表现，约50%患者就诊时已为晚期，导致目前ESCC预后差。因此，探索其发生发展机制以期早诊早治具有重要临床意义。

淋巴特异性解旋酶(helicase lymphoid-specific，HELLS)是一种ATP依赖的染色质重塑因子，属于SNF2家族

，主要参与细胞增殖过程中DNA甲基化调控，也有研究

发现，HELLS参与细胞糖代谢。HELLS在肿瘤中相关研究表明，其在胰腺癌、结肠癌、肾癌等多种肿瘤中发挥促癌作用

，但确切的促癌机制目前尚不明确。此外，HELLS高表达与肿瘤预后不良

及化疗耐药性相关

。但其在ESCC中尚无相关研究数据。

《诗志》大多数地方属于纯粹文学批评，喜好以后世的诗歌与《诗》相比较，相对其他文学性解经书籍更为鲜明成熟。如牛氏评点《诗经·汉广》说“汉广不可泳，江永不可方，言游女有二汉之隔，婷婷独立，可望而不可即也。正与‘盈盈一水间，脉脉不得语’相似”[19]。评点《诗经·柏舟》说：“忧极不能自遣，算到奋飞一着，真烦骚无聊之至。‘愿为双黄鹄，奋翅起高飞’，古之忧患人于此踌躇多少。”[19]用后世诗句与《诗》对照阐发，注重的是《诗》作为文学的神理气味，读者自行比较不同诗句，则诗歌的妙味不言而自然领悟。这明显不同于汉人注解《诗经》的方式，以考据训诂追求字词确义。

本研究通过在ESCC组织芯片中采用免疫组化检测ESCC及癌旁组织中HELLS表达情况，初步明确其与ESCC临床病理特点的相关性。

功夫不负有心人。慢慢地，我在太平路小学变得小有名气了。领导感觉这个年轻人有天赋、有激情，于是开始让我尝试在学校做教学研究课。有一次，五一小学的王副校长到太平路小学听课，正好听了我的一节《葡萄沟》，听后王校长对我大加赞赏。这似乎是我和“五一”人的第一次接触。

1 资料与方法

(1)微波抗原修复，常规脱蜡水化；(2)3% H

O

封闭内源性过氧化物酶活性，随后再用山羊血清封闭；(3)孵育HELLS一抗；(4)加入通用型二抗；(5)DAB 显色；(6)苏木精复染，脱水透明，中性树胶封片；(7)显微镜下观察。

龙斌的目光离开了电脑屏幕凝视着竹韵清秀的脸庞，伸手为她理了一下掉在额头手头发，然后紧紧地握住她柔软的小手久久不肯松开。

400倍光镜随机选5个高倍镜实验，每视野数100个细胞，HELLS阳性结果：胞核出现棕黄色染色为阳性，阳性细胞占肿瘤细胞的百分比>10%。

进入虚拟漫游培训场景后，可以通过手柄摇杆控制场景中的漫游动作。将场景中的主摄像机Main Camera替换为MojingMain预设摄像头，添加脚本组件MojingWalk挂在MojingMain上，实例代码如下：

选取47例ESCC组织，其中23例有配对癌旁组织，所有ESCC组织和癌旁组织均来源于组织芯片(上海芯超生物科技有限公司，货号HEso-Squ127Lym-01)。肿瘤分期根据国际抗癌联盟食管鳞癌临床病理分期标准(第7版)

确定。

小鼠HELLS单克隆抗体(货号：sc-46665)购自美国 Santa Cruz公司。通用型试剂盒(小鼠/兔聚合物法检测系统)(编号：PV-6000)购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

免疫组化结果显示，HELLS在ESCC及癌旁组织中均有表达，阳性表达主要定位于细胞核，表现为黄褐色染色(见图1)。在47例癌组织中28例(59.57%)呈阳性表达，23例癌旁组织中2例(8.70%)呈阳性表达，与癌旁组织相比，HELLS在癌组织中的表达率明显升高(

<0.001)(见表1)。

2 结果

本研究进一步分析了HELLS表达与ESCC患者临床病理参数的关系，结果发现，HELLS高表达与ESCC患者肿瘤大小(

=0.04)有相关性，而与性别、年龄、肿瘤分级及N分期无相关性(

>0.05)(见表2)。

3 讨论

HELLS在维持基因甲基化及染色质重塑过程中发挥重要作用

，在肿瘤领域的研究越来越广泛。目前研究表明，在肝癌、胰腺癌、胃癌及肾透明细胞癌等多种肿瘤中呈高表达，且其高表达与肿瘤进展及生存期缩短相关

。本研究结果也发现，HELLS在ESCC组织中呈高表达。进一步分析其表达与临床病理参数的关系表明，HELLS表达与肿瘤大小相关。此外由于本研究所用芯片组织T分期数据缺失，且均未发生远处转移，因此，需要通过扩大样本量及样本种类进一步验证HELLS与临床参数的关系。

关于HELLS作用机制目前尚未明确，目前研究结果提示其可能通过3种途径发挥作用。首先，HELLS可通过改变组蛋白与DNA间的相互作用，改变核小体位置以暴露DNA

，使得转录调控因子与裸露的DNA结合进而调控下游基因的表达发挥作用。在肝癌细胞中，HELLS通过增加转录起始点核小体占位阻止无核小体区域形成，进而抑制抑癌基因E-cadherin、FBP1、IGFBP3、XAF1及CREB3L3的表达发挥作用

。其次，HELLS可与特定的转录因子相互作用调控靶基因转录。在视网膜母细胞瘤的研究中发现，HELLS是RB/E2F通路中关键的下游蛋白，可能作为E2F3的转录共激活因子调控下游细胞周期蛋白的表达，影响细胞增殖

，在胶质母细胞瘤中的研究也表明，HELLS通过与转录因子E2F3及MYC相互作用影响细胞周期发挥促癌作用

。在肝癌中HELLS可激活着丝粒蛋白F(centromere protein F, CENPF)的转录而影响细胞周期发挥促癌作用

。最后，HELLS参与调控细胞代谢。研究表明，HELLS参与胃癌细胞有氧糖酵解

，在肺癌中通过抑制铁死亡发挥促癌作用

。关于HELLS在食管癌中的作用机制目前尚无相关研究。

总之，本研究发现HELLS在ESCC中呈高表达，其高表达与患者预后不良相关。本研究结果表明，HELLS表达水平与肿瘤大小相关，但与浸润深度、淋巴结转移等病理特征的相关性需进一步开展大样本量的临床研究。此外，目前研究结果均提示HELLS在肿瘤靶向治疗中有很大机制，因此，还需进行HELLS在ESCC中的机制研究，为后续实现临床转化提供研究基础。

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