■ 文|广东海洋大学 朱国萍 叶宁
湛江市国兴水产科技有限公司 林松
饵料营养是雌虾繁育的关键因素。雌虾需摄取大量的蛋白质、氨基酸、脂肪酸等营养成分以供性腺发育。目前,雌虾培育过程中多采用鲜活的沙蚕、冰冻的鱿鱼和牡蛎等天然饵料进行投喂,对雌虾的繁育均产生了较好的效果。投喂的沙蚕通常有天然双齿围沙蚕(俗称红虫,以下简称红虫)和养殖双齿围沙蚕(俗称青虫,以下简称青虫),在生产中已发现红虫对提高雌虾的繁育效果显著,但其价格昂贵,且近年红虫资源枯竭,使得企业在生产中更多使用青虫进行替代投喂以降低雌虾培育过程中的成本,并能降低雌虾培育过程中对处于资源枯竭状态的红虫的依赖。
为了提高雌虾的繁育效果,并降低饵料的成本,本研究通过比较天然双齿围沙蚕、养殖双齿围沙蚕和鱿鱼不同投喂次数对雌虾性腺成熟的影响,筛选合适的饵料配方。实验结果表明:每天投喂一次天然双齿围沙蚕、3次养殖双齿围沙蚕和2次鱿鱼的雌虾性腺成熟度最好,产卵量显著提高,再次性成熟周期显著缩短,幼体的孵化率没有显著差异,但幼体的质量明显提高。
1.沙蚕来源。红虫由渔民在海边泥滩上捕捉,消毒后再喂食,青虫购自遂溪县宝亨生物科技有限公司。鱿鱼购自湛江市东风市场。
2.凡纳滨对虾雌虾。由湛江市国兴水产科技有限公司提供,虾龄为15月龄。
在湛江市国兴水产科技有限公司徐闻省级对虾良种场进行,把试验用的雌虾分为三组,每组45尾雌虾,1组每天投喂1次红虫,3次青虫和2次鱿鱼、2组每天投喂4次青虫和2次鱿鱼,3组每天投喂3次青虫和3次鱿鱼,每组均有3个平行。设置3m×3m×1m的40目网箱9个,每个网箱放15尾体长20cm、体重40g左右、健壮无病、无伤残、体表光洁、反应灵敏、活力好的凡纳滨对虾雌虾。
釆用标准化养殖(共同环境养殖),把9个网箱共同放入1个200立方的水泥池,每个网箱的水环境、饵料投放和药物使用等管理措施保持一致,把每个网箱环境差异降到最低。
1.试验管理。(1)雌虾进行剪眼柄催熟。实验材料全部消毒,投喂时间分别为每天6∶00、10∶00、14∶00、18∶00、22∶00、02∶00,共6次投喂,日常投喂量占虾体重15%~20%,以一小时食完为准,投喂量视具体情况进行增减。(2)定时测定水温,保证水温恒定在28℃~29℃。池水24小时增氧,使溶解氧保持在5mg/L左右。试验全过程海水盐度为28‰ ~32‰,pH7.9~8.3,氨氮保持在0.1mg/L以下,亚硝酸盐保持在0.05mg/L以下,光照周期为12h。每日给雌虾池换水两次,上、下午各一次,每次换水20cm,并清理虾池残饵。
2.雌虾产卵及幼体孵化。性腺成熟的雌虾放入雄虾池子受精,受精后的雌虾移入标签好的产卵桶中产卵。桶中预先加入已消毒过滤的新鲜海水,并加入5ppm的EDTA-2Na用以铬合水中的重金属,同时加入0.5ppm的优乐碘用以抑杀水体中的病原微生物,保护受精卵不受水体环境的影响。水体的盐度保持在28‰ ~33‰,水温控制在29~30℃,并保持不间断微充气。雌虾产卵后,用孔径0.061mm(250目)的集卵筛绢网箱排水收集受精卵,并在2~3h内完成产卵量计数。
3.雌虾性腺再促熟。产卵后的雌虾放回网箱内继续促熟,并观察再次性成熟时间。
4.雌虾性腺指数的测定。雌虾准备入桶产卵前,从各组的三个平行组中随机抽取5条雌虾,称量雌虾的体质量,观察各条雌虾性腺的外观,并解剖取出性腺称重,计算其性腺指数。
性腺指数=性腺质量×100/雌虾体质量
5.无节幼体孵化率的测定。受精卵用浓度1~3g/m3的碘制剂消毒后,移入孵化桶内孵化,不间断微充气,每30分钟推卵1次,保证受精卵不下沉,约13~15h变成无节幼体。用孔径0.076mm(200目)筛绢网箱收集后,放入盆内静置1~2分钟,虹吸底部死卵、坏卵后,统计健康无节幼体数量,用显微镜镜检对虾无节幼体卵黄粒情况。
1.不同饵料对雌虾产卵量的影响。从图1可见,1组雌虾的产卵量最多,达18×104粒,与2组及3组的产卵量均呈显著性差异(P<0.001),2组与3组产卵量接近,不呈显著性差异(P>0.05)。每天投喂1次红虫,3次青虫和2次鱿鱼的雌虾产卵量最高。
图1 不同饵料对雌虾产卵量的影响
2.不同饵料对雌虾性腺指数的影响。从图2可见,1组雌虾的性腺指数最大,与2组及3组的性腺指数均呈显著性差异(P<0.001),2组与3组性腺指数接近,不呈显著性差异(P>0.05),与雌虾的性腺指数结果相一致,1组雌虾的性腺外观可见明显的橙黄色,性腺内藏的卵子饱满、结实;而2组与3组的性腺外观仅可见淡淡的黄色,性腺内藏的卵子稀疏、软塌。每天投喂1次红虫,3次青虫和2次鱿鱼的雌虾性腺成熟度最好,性腺指数最高。
图2 不同饵料对雌虾性腺指数的影响
3.不同饵料对雌虾性腺再成熟时间的影响。从图3可见,不同饵料投喂的雌虾性腺再成熟时间呈现不同的周期,1组的性腺再成熟时间显著低于2组和3组(P<0.001),而2组和3组的性腺再成熟时间接近,差异性不大(P>0.05)。每天投喂1次红虫,3次青虫和2次鱿鱼的雌虾性腺再成熟时间最快。
图3 不同饵料对雌虾性腺再成熟时间的影响
4.不同饵料对幼体孵化率及质量的影响。从图4可见,投喂不同饵料的雌虾其幼体孵化率接近(P>0.05)。尽管1组的幼体量高于2组和3组,但由于1组的雌虾产卵量也高于2组和3组,使得1组的幼体孵化率仅轻微高于2组和3组,但不呈显著性差异;1组的幼体划动有力,趋光性强,体表干净,附肢刚毛整齐无畸形,卵黄粒颜色呈现明亮的黄色,达到凡纳滨对虾养殖技术规范幼体培育技术(DB44/T228-2005)中描述的优质幼体标准,而2组和3组幼体卵黄粒的颜色偏淡,活动能力一般,只属于一般质量幼体标准。
图4 不同饵料对幼体孵化率的影响
营养是决定对虾性腺发育和繁殖性状的关键因素之一,在对虾性腺发育期间如果营养供应不足,对虾性腺会停止发育。投喂雌虾的饵料中脂类、蛋白质、氨基酸、维生素、类固醇激素等营养成分均是影响对虾性腺发育的重要营养因子,影响雌虾卵巢发育和正常的性成熟。研究发现n-3、n-6系列脂肪酸,特别是DHA、EPA对卵巢和幼体的发育非常重要,通过对成熟卵巢与未成熟卵巢中多种不饱和脂肪酸的含量的比较,可发现成熟卵巢中的多种不饱和脂肪酸显著增高,这些多不饱和脂肪酸还可能转化成前列腺素,以促进对虾成熟与产卵。对虾性腺发育过程中需提高蛋白质的供给,以满足卵黄蛋白的积累和相关激素及酶类物质的合成,研究已发现雌虾肝胰腺中的蛋白质含量显著降低,而卵巢中的蛋白质含量显著增加,表明雌虾在性腺成熟过程中肝胰腺中的蛋白质被转移到性腺加以利用。
沙蚕、鱿鱼等传统生物饵料对雌虾的繁殖有较理想的效果,在雌虾繁殖培育过程中已得到广泛的认可和应用。沙蚕富含蛋白质、多不饱和脂肪酸,Vc的含量也很多,鱿鱼蛋白质含量高,且富含胆固醇,利用沙蚕与鱿鱼配合投喂雌虾对促进雌虾性腺发育,提高雌虾产卵量均能起到十分重要的作用。在本研究中,利用天然红虫、养殖青虫和鱿鱼配合投喂雌虾探究不同饵料配合对雌虾繁殖期性腺的影响,从图1至图4可以看出,利用投喂1次红虫、3次青虫和2次鱿鱼的雌虾性腺成熟度最好,产卵量显著提高,性腺再成熟周期显著缩短,幼体孵化率差异不大但质量明显提高,表明天然红虫对促进雌虾性性腺发育起到至关重要的作用,这可能是天然红虫的营养成分更适宜雌虾的摄取利用。天然红虫生活在自然海区,摄食营养全面丰富。胡园等人对天然沙蚕和养殖沙蚕的营养成分进行比较,发现天然沙蚕所含的蛋白质高达66.22%、必需氨基酸达37.48%、EPA+DHA的含量达21.2μg/kg,且其n-3/n-6多不饱和脂肪的比例高达4.02,均远高于养殖沙蚕,这可能也是饵料中包含天然红虫会使雌虾的产卵量、性腺发育等各指标更好的原因。