分子病理技术在临床诊疗中的应用进展

邓俊辉

【摘要】本次研究主要分析分子病理技术在临床诊疗中的应用现状，在于准确把握该项技术在临床中的应用价值，使其成为推动临床诊疗水平增长的重要技术，准确把握分子病理技术的应用优势，从而在临床诊疗中进行充分利用，这将成为我国临床医疗水平发展不可或缺的支撑。

【关键词】分子病理诊断;精准医学;个体化医疗

在科学技术不断发展的今天，精准医疗理念逐渐兴起，关于精准医疗的概念理解是指在基因组测序、生物信息、大数据科学等多学科交叉应用，确保为患者提供的醫疗服务具有个性化，且更加精准和精细。可以说，精准医疗的出现，对于病理学的发展带来了一定的挑战，同时也是良好的发展机遇。该学科的主要内容是借助分子以及遗传学方法，实施肿瘤的分子病理诊断和分类，从而设计或者是验证得出能够针对疾病发生进行预测或者是反应的生物标志物，属于临床疾病诊断中不可或缺的患者个体化资料支持，是保证个体化综合治疗具有针对性的关键，符合精准医疗的发展需求。

1 分子病理技术

将分子病理技术用于感染标本的病原微生物DNA或者RNA的提取，借助高通量测序，完成生物信息比对以及大数据科学分析，从而获得关于病原微生物的各种属性信息，将其用于感染的快速，精准预防和治疗，为临床抗生素的合理使用提供可靠的数据支持。可以使用分子病理技术实现感染源的测定，相较于传统的培养或者是血清学以及组织学检测，不仅表现出更高的灵敏度，并且在特异性和准确性方面也更胜一筹。现阶段在感染性疾病诊断以及疗效判断中，关于分子病理技术的应用效果良好，常用的技术手段包括采用原位杂交检测EB病毒编码的小RNA，PCR和反向点杂交法检测乳头状瘤病毒DNA，荧光定量PCR技术检测各型肝炎病毒DNA和RNA、人类单纯疱疹病毒DNA、结核杆菌DNA、肺SARS病毒RNA等，这些检测取得了很好的效果。

2在遗传性疾病上的应用

目前在遗传性疾病的临床治疗过程中，涉及到的分子病理技术应用也越发的常见，例如，使用原位杂交对染色体和DNA的水平实施病理诊断检测能够达到组织定位的效果，由此支持临床病理医生通过研究患者染色体以及基因检测的方式，完成遗传病的筛查和诊断，在预防家族遗传病发生方面，有着极大的应用价值。另外一方面，分子病理学在辅助生殖领域也得到了不错的应用，例如在胚胎植入之前，使用分子病理技术实现遗传学的诊断和筛查，对胚胎的染色体正常情况进行判断十分关键，保证速移植的胚胎的健康，相应的工作流程如下：①取3～5个发育第3天的卵裂球单细胞或发育第5天的囊胚滋养层细胞进行DNA提取与单细胞扩增;②对质检达到标准的扩增产物进行文库制备后再进行高通量测序;③生物信息学对结果进行分析和判读，判断胚胎是否正常，为胚胎移植提供参考。目前国内遗传性疾病的检测中，所使用到的分子病理技术主要有高通量测序仪、荧光定量PCR技术、染色体核型分析、免疫组织化学技术、荧光原位杂交技术等，能够针对胚胎移植前和产前遗传性疾病进行有效筛查，覆盖范围涉及神经系统、遗传性耳聋基因、生殖系统等多个领域。可以说，现阶段的分子病理技术，在遗传性疾病领域的应用十分成熟，伴随着该项技术的不断发展，必然能够发现更多新的致病基因以及遗传病类别，甚至逐渐应用于产前诊断以及基因治疗中。但是不可否认的是，受到现实条件的限制，大多数先进的分子病理技术只停留在实验室领域，想要在临床中进行大范围的应用仍然有很长的路要走。

3在肿瘤诊断与精准治疗中的应用

将分子病理学技术应用于恶性肿瘤的靶向基因检测中效果显著。现阶段常用的基因靶向检测技术类别主要包含以下三种：荧光原位杂交方法、实时荧光定量PCR方法和测序法。其中ARMS实时荧光定量PCR，又称等位基因特异性PCR，采用突变扩增阻滞系统，与双环探针和特异引物两种技术结合，从而对含有突变基因的DNA样品进行检测。石蜡包埋组织标本提取的DNA大部分被片段化，导致检测结果缺乏准确性，ARMS法在设计上能够最大限度地缩短目标产物的长度，从而解决了这一难点。考虑到可能出现的扩增产物污染情况，在实践中通常会运用实时PCR平台与ARMS结合，做到扩增的闭馆操作效果，就不需要产物的后续处理环节，整体操作更为简便。由于靶向基因检测在肿瘤病理诊断中的占比重大，且意义深远，这是因为其定位准确，有着较强的特异性，包括极高的敏感性及形态与功能结合等特点。

分子标志物在肿瘤病理诊断中的应用主要有以下几点：（1）提高病理诊断的准确性;（2）有助于确定肿瘤分期及判断患者预后;（3）有助于发现微小转移灶;（4）有助于指导肿瘤患者的治疗;（5）有助于遗传性肿瘤易感家族的辅助诊断;（6）有助于肿瘤相关致病性微生物的发现。肿瘤的诊断与治疗是分子病理在临床应用上最为广泛的领域，分子病理技术可以检测基因表达和基因突变，从而评价个体患肿瘤风险，筛选出易感人群，实现肿瘤的早期预防、早期诊断、判断预后及指导治疗，还可对疑难肿瘤进行诊断和分类、个体化诊治和预后评估等[14]。ARMS是依据不同的已知突变来设计出对应的引物，进而检测出有突变基因。根据分子病理诊断技术检测出某种基因的表达，了解肿瘤是否存在该基因的分子异常，以选择和确定合适的分子靶向治疗，肿瘤基因检测在一定程度上对临床诊疗方案的选择具有极其重要的决定性以及指导作用，医生依据每个肺癌患者肿瘤的个体特征进行个体化治疗。准确的病理诊断是正确靶向治疗的前提，基于分子病理的肿瘤多基因检测的临床应用，可以辅助医生靶向用药并判断疗效。

综上所述，在精准医疗快速发展的背景之下，基于分子水平视角，对疾病的病变性质和生物学特性进行探究，并融入基因视角展开关于疾病的发生，发展以及转归的高特异和敏感性分子病理诊断必然是今后临床关于疾病诊断的主流发展趋势，分子病理技术部的优势在于能够实现分子分型，对于疾病的危险因素探索更加全面，无论是在肿瘤的早期预防，精准诊断，或者是靶向治疗，包括预后判断方面，都有着良好的应用优势，是提高临床治疗个体化的重要动力。

参考文献：

[1] 刘智贤，刘汉忠. 精准医学时代下临床病理发展趋势[J]. 科技经济导刊，2018，26（13）：127.

[2] 张波. 病理学在精准医疗时代的发展[J]. 精准医学杂志，2018，33（2）：98-101.