陈舒 许先国 洪小珍 朱发明
红细胞血型不规则抗体是引起红细胞输血不良反应、血型鉴定困难和输注无效等的主要原因。精准快速的不规则抗体鉴定对于迫切需要输血治疗的患者至关重要,然而其前提是对不同疾病患者红细胞血型不规则抗体特征的了解。目前尚缺乏呼吸系统疾病患者红细胞血型不规则抗体特异性的相关数据。因此,本次研究拟对本实验室收集的呼吸系统疾病患者红细胞血型不规则抗体检测情况进行回顾性分析,现报道如下。
1.1 样本 收集2012 年11 月至2021 年6 月期间由临床医院送检的红细胞血型不规则抗体初筛阳性的呼吸系统疾病患者113 例,年龄1~96 岁。所有标本经知情同意采集送检。
1.2 肺炎和肺部肿瘤类定义 本次研究将肺炎、间质性肺炎、细菌性肺炎、吸入性肺炎、重症肺炎、社区获得性肺炎、肺部感染、肺部真菌感染等疾病纳入肺炎类。
1.3 试剂和仪器 抗体筛选细胞、抗球蛋白试剂购自上海血液生物医药有限责任公司;凝聚胺试剂购自珠海贝索生物技术有限公司;谱细胞分别购自上海血液生物医药有限责任公司、荷兰Sanquin 公司、美国Immucor 公司和匈牙利REAGENS Kft 公司;UltraCW 细胞洗涤离心机由美国HELMER 公司生产;微柱凝胶卡、孵育器、卡式离心机均由美国DiaMed公司生产。
1.4 方法 将患者血清和/或血浆与筛选红细胞、谱细胞以及患者自身红细胞分别按照《全国临床检验操作规程(第4 版)》进行盐水试验、凝聚胺试验、间接抗球蛋白试验。根据其与筛选红细胞、谱细胞和自身红细胞的反应格局判定抗体特异性。
1.5 统计学方法 采用SPSS 22.0 软件,计数资料采用连续性校正的χ2检验;非正态分布的计量资料采用Mann-WhitneyU检验。设P<0.05 为差异有统计学意义。
2.1 呼吸系统疾病患者分类和红细胞血型不规则抗体检测结果见表1
表1 113 例呼吸系统疾病患者的分类和红细胞血型不规则抗体检测情况/例
由表1 可见,113 例呼吸系统疾病患者中,以肺炎类和肺部肿瘤类患者多见,经确认红细胞血型不规则抗体阳性共86 例(76.11%)。
2.2 86 例红细胞血型不规则抗体的特异性分布见表2
表2 86 例红细胞血型不规则抗体的特异性分布
由表2 可见,86 例红细胞血型不规则抗体阳性患者中共检出15 种类型红细胞血型不规则抗体,同种抗体主要为抗-M 和抗-E,自身抗体主要为冷凝集素。
2.3 肺炎类和肺部肿瘤类患者红细胞血型不规则抗体情况 肺炎类和肺部肿瘤红细胞血型患者中位年龄分别为68.00 岁和63.00 岁,两组比较,差异无统计学意义(U=320.00,P>0.05)。肺炎类和肺部肿瘤类患者红细胞血型不规则抗体情况比较见表3。
由表3 可见,肺炎类患者抗-M 比例明显低于肺部肿瘤类患者(χ2=5.32,P<0.05);肺炎类患者抗-E、冷凝集素比例与肺部肿瘤类患者比较,差异无统计学意义(χ2分别=0.00、3.74,P均>0.05)。
表3 肺炎类和肺部肿瘤类患者红细胞血型不规则抗体比较
既往关于红细胞血型不规则抗体与疾病的关联性研究并不多见:郑皆炜等[1]比较了孕妇与其他患者的抗体特异性差异;许亚莉等[2]描述了不规则抗体阳性患者疾病分布情况;张秋会等[3]报告了不同临床科室患者的不规则抗体检出率。但这些数据缺乏针对呼吸系统疾病患者的分析。而李翠莹等[4]虽然提及呼吸系统疾病患者,但也仅报道了其同种抗体和自身抗体的阳性例数,并未涉及抗体特异性。为弥补这一空白,本研究对送检至本实验室的113 例呼吸系统疾病患者进行了回顾性分析。
为避免多种疾病混杂的影响,本文针对一种诊断的患者进行研究,并且为便于统计分析,对113 例呼吸系统疾病患者进行了归类,其中以肺炎类和肺部肿瘤类患者较多见。由于本实验室接收的是临床医院送检的红细胞血型不规则抗体初筛阳性的疑难样本,因此阳性率明显高于报道[5,6]。
本次研究显示,在检出的红细胞血型不规则抗体中,同种抗体以MNS 血型系统抗-M 和Rh 血型系统抗-E 多见,但抗-M 比例高于抗-E 则与报道[5,6]有所不同。究其原因可能为:①本实验室样本为临床医院送检,医院多采用微柱凝胶抗人球蛋白法,该法利于IgG 类抗体检出可减少抗-E 送检,但不利于抗-M 等IgM 类抗体鉴定,而本实验室常规采取的盐水试验能提高抗-M检出,因此可能导致本研究中抗-E 比例下降,抗-M 比例升高;②Rh 血型系统抗原匹配输注导致抗-E 比例下降;③可能与疾病相关。对占比最多的肺炎和肺部肿瘤类患者进一步分析显示,红细胞血型不规则抗体阳性的肺炎患者中抗-M比例明显低于肺部肿瘤患者,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌全基因患者关联研究指出肺癌与GYPA基因上某些SNP 位点相关[7,8],而M 抗原位于由GYPA基因编码的红细胞血型糖蛋白A 上,因此肺部肿瘤类患者抗-M比例高,是否与肺癌患者M 抗原表达有关值得探索。两类患者抗-E 比例无明显差异(P>0.05)则表明抗-E 与肺炎或肺部肿瘤关联性不强。
本次研究中检出的自身抗体以冷凝集素为主。与冷凝集素相关的主要有特发性冷凝集素病和继发性冷凝集素综合征。前者多为老年人原发性疾病,而后者常继发于感染(病毒、支原体)或恶性淋巴细胞增殖性疾病[9]。肺炎患者冷凝集素比例约为肺部肿瘤患者的6 倍,但由于两组患者年龄中位数及其分布不存在显著差异,可以排除年龄因素导致的冷凝集素比例升高,从而推测肺炎患者的肺部感染为导致两者比例不同的主要原因,这与众多文献[10~14]报道一致。然而本次研究发现,两类患者冷凝集素比例无明显差异(P>0.05),可能是由样本例数较少导致,今后应收集更多样本来进一步予以确定。正常成年人体内也存在冷凝集素,但是多为低效价(<1∶64)[15]。冷凝集素效价在1∶32 以下时一般不会引起假凝集现象,大于1∶64时可干扰血型的鉴定和交叉配血试验的结果[16]。本次研究中检出的冷凝集素均干扰了室温条件下ABO 血型反定型或产生了不规则抗体筛查阳性结果,可以预测其效价应高于64。
综上所述,呼吸系统疾病患者红细胞血型不规则同种抗体以抗-M 和抗-E 多见,自身抗体以冷凝集素多见,其中抗-M 在肺部肿瘤患者中相对多见。在临床血清学检测中利用这些特点可以快速制定有针对性的鉴定策略,进一步提高检测效率,提升输血安全性。