布地奈德福莫特罗、甲泼尼龙联合治疗对COPD急性加重期患者25(OH)D3、8-iso-PGF2α的影响

周根伟, 邹菖

丽水市中心医院呼吸与危重症医学科(浙江丽水 323000)

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以气流受限为特征的肺部疾病，气流的限制并不是完全的，肺功能进行性下降可严重影响患者的劳动力和生活质量[1]。研究认为COPD发生后可损害气道上皮细胞和纤毛运动，破坏肺弹性纤维，诱发肺气肿的形成[2]。目前随着临床上对COPD的不断深入研究发现，此病的发生多伴随着细胞因子网络异常表现，研究发现[3]，COPD发生后患者机体均存在不同程度的局部炎性浸润和免疫抑制表现，25-羟基维生素D3[25(OH)D3]参与上述过程，在COPD急性加重期促进疾病进展中具有重要的意义。另外研究发现[4]，COPD发生后机体氧化失衡，8前列腺异素F2α(8-iso-PGF2α)可经刺激血内皮素的产生诱发机体氧化失衡，最终导致COPD的发生。临床上关于COPD急性加重期的治疗无统一的手段，且部分患者经临床常规治疗后预后不良，死亡风险增加，基于上述背景，在本研究中将布地奈德福莫特罗、甲泼尼龙联合应用于COPD急性加重期患者的治疗中，并分析联合治疗对25(OH)D3、8-iso-PGF2α表达的影响，明确两者是否可经改善COPD急性加重期患者机体局部炎症反应、氧化失衡而发挥作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年11月至2020年11月在我院接受治疗的COPD患者122例，分为甲泼尼龙组和联合治疗组各61例。甲泼尼龙组：男39例，女22例，年龄55～75岁，平均(65.08±6.17)岁；联合治疗组：男34例，女27例，年龄56～79岁，平均(68.40±6.65)岁。两组患者在上述资料中对比，差异无统计学意义(P>0.05)，有可比性。两组患者及家属对本研究知情，签署知情同意书，经我院伦理委员会批准[科研伦审(2020)第(411)号]。

纳入标准：所有患者均符合《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2013年修订版)》[5]中关于COPD的诊断标准，处于急性加重期。

排除标准：患有急性脑血管病、严重的肝肾功能衰竭、恶性肿瘤；有明显出血倾向；有精神异常、躁狂、幻觉者；合并哮喘、支气管扩张等疾病者。

药物来源：甲泼尼龙(比利时Pfizer Manufacturing Belhium NV，进口药品注册证号：H20170197)规格：40 mg。布地奈德福莫特罗(AstraZeneca AB，进口药品注册证号：H20160447)规格320 μg/9 μg/吸。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 两组患者均进行常规治疗纠正电解质紊乱，给予抗感染、平喘、解痉、氧疗、化痰等治疗。甲泼尼龙组在常规治疗的基础上采用甲泼尼龙治疗，静脉滴注40 mg/次,1次/d。联合治疗组在甲泼尼龙组的基础上给予布地奈德福莫特罗治疗。布地奈德福莫特罗粉吸入剂60吸/支，1吸/次，2次/d。两组均连续治疗5～7 d。

1.2.2 氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)水平检测 抽血前停吸氧20 min以上，然后取患者治疗前、治疗疗程结束后1周5 mL动脉血，取血后隔绝空气快速送检。取下针头，将动脉血标本充分肝素化。送至检验科检测，等候结果。

1.2.3 1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)、FEV1水平检测 两组患者治疗疗程结束后1周采用德国耶格公司，Masterscreen Pneumo 肺功能仪检测肺功能指标FEV1、FEV1/FVC水平。

1.2.4 25(OH)D3、8-iso-PGF2α、白细胞介素-32(IL-32)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏肌酸激酶同工酶(CK-MB) 采取所有患者治疗前、治疗疗程结束后1周空腹外周静脉血5 mL,3 000 r/min离心15 min,取上层血清,采用酶联免疫吸附法检测，将血清样本置于室温后，取出试剂盒，标记酶标板，制作标准品，以1∶2的稀释液稀释样品；在反应孔上依次加入稀释好的待测血清及标准品100 μL/孔，放置37℃恒温孵育箱中湿育2 h；用专用洗涤液将反应板清洗3次后，加入抗体工作液(1∶100倍稀释后)100 μL/孔，置于37℃恒温孵育箱中湿育45 min；继续清洗反应板4次后，在反应孔内加入TMB溶液100 μL/孔，置于37℃恒温孵育箱中湿育45 min后在反应孔内加入终止液100 μL/孔以终止反应，在450 nm波长(参考波长570～630 nm)测定吸光度，颜色反应深浅与25(OH)D3、8-iso-PGF2α、IL-32、TNF-α、CK-MB水平成正比，经绘制标准曲线计算25(OH)D3、8-iso-PGF2α、IL-32、TNF-α、CK-MB水平。25(OH)D3ELISA试剂盒购自北京冬歌博业生物科技有限公司，8-iso-PGF2αELISA试剂盒购自武汉益普生物科技有限公司，IL-32 ELISA试剂盒购自上海恒斐生物科技有限公司，TNF-α ELISA试剂盒购自艾美捷科技有限公司，CK-MB ELISA试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司。

1.2.5 CAT评分 在患者治疗前、治疗疗程结束后1周采用CAT评估COPD患者健康和日常生活，共有8个条目包括咳嗽情况,咳痰情况,胸闷程度,活动耐力,活动受限程度,外出的信心情况,睡眠状况,精力情况,轻微：0～10分；中度：11～20分；严重：21～30分；非常严重：31～40分，得分越高病情越严重。

1.2.6 Borg评分 在患者治疗前、治疗疗程结束后1周采用Borg疲劳量表评定患者呼吸困难程度，0分：完全没有；0.5分：刚刚感觉到；1分：非常轻微；2分：轻微；3分：中等；4分：稍微严重；5分：严重；6分：5～7之间；7分：非常严重；8分：7～9之间；9分非常非常严重；10分：极其强烈，评分越高表示呼吸越困难。

1.2.7 临床疗效评价 在患者治疗疗程结束后1周评价临床疗效，将临床疗效分为4个等级：显效、有效、无效、死亡，显效：患者临床体征大部分消失，生活正常。有效：患者临床体征好转，可以进行日常工作。无效：与治疗前相比，患者临床体征没有改善，甚至有加重，生活无法自理。总有效率=(显效数+有效数)/总例数。

1.2.8 不良反应发生情况统计 对两组患者治疗过程中肺炎加重、胃肠道异常、血糖升高、睡眠障碍不良反应发生情况进行统计。

2 结果

2.1 治疗前后血气、肺功能水平比较 治疗前血气、肺功能水平，两组差异无统计学意义(P>0.05)；两组治疗前后PaO2对比，差异无统计学意义(P>0.05)；与治疗前相比，两组治疗后PaCO2水平明显下降，且与甲泼尼龙组相比，联合治疗组PaCO2水平较低，差异有统计学意义(P<0.05)。与FEV1治疗前预计值、FEV1/FVC正常值相比，联合治疗组治疗后FEV1、FEV1/FVC改善更为显著，高于甲泼尼龙组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 治疗前后血气、肺功能水平比较

2.2 治疗前后25(OH)D3、8-iso-PGF2α、IL-32、CK-MB、TNF-α水平比较 两组治疗前后IL-32、CK-MB水平对比，差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗前25(OH)D3、8-iso-PGF2α、TNF-α水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；两组与治疗前相比，治疗后25(OH)D3水平明显升高，8-iso-PGF2α、TNF-α水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与甲泼尼龙组相比，联合治疗组25(OH)D3水平明显升高，8-iso-PGF2α、TNF-α水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 治疗前后25(OH)D3、8-iso-PGF2α、IL-32、CK-MB、TNF-α水平比较

2.3 治疗前后CAT、Borg评分比较 治疗前CAT、Borg评分比较，两组差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后CAT、Borg评分明显降低，且与甲泼尼龙组相比，联合治疗组CAT、Borg评分明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后CAT、Borg评分比较

2.4 两组总有效率比较 联合治疗组总有效率高于甲泼尼龙组，差异有统计学意义(2=6.974，P=0.008)。见表4。

表4 两组总有效率比较 例(%)

2.5 不良反应发生情况比较 两组总不良反应差异无统计学意义(2=0.533，P=0.465)。见表5。

表5 不良反应发生情况比较 例(%)

3 讨论

COPD以气流受限、呼吸道症状为主要特征，主要表现在气道和肺泡的异常，近年来，由于大气污染、肺部感染、吸烟等因素导致COPD逐渐增加，发病率呈上升趋势[6-7]。若不能对COPD进行及时有效的治疗，则会促使疾病发展为复杂的多器官结构和功能障碍，严重威胁着患者的生命安全[8]。基于上述背景，在本研究中将布地奈德福莫特罗联合甲泼尼龙应用于COPD患者的治疗中，以分析其成效，为临床上此病的治疗提供参考。

布地奈德福莫特罗是由糖皮质激素和长效β2受体激动剂两种药物成分组成的复方制剂，研究认为其具有抗过敏、抗炎、降低气道分泌物及气道高反应等作用，在呼吸道发挥的抗炎、平喘作用明显优于普通激素[9-10]。甲泼尼龙是一种糖皮质激素，具有很强的抗炎作用，钠潴留作用较弱，没有排钾的不良反应，抗炎作用为可的松的7倍，能抑制炎症介质释放、分泌，在短时间内显著缓解患者呼吸道的不适，具有很强的抗炎、改善机体免疫力[11]。目前已有研究分别证实上述药物用于COPD效果理想，但并未有上述药物联合治疗COPD的研究，本研究将其联合应用于此病的治疗，结果显示，采用两药联合治疗的患者肺功能显著恢复，此结果提示着，两者联合具有修复COPD患者肺功能损伤的作用，表现为FEV1、FEV1/FVC接近于正常值。

临床研究显示[12]，COPD肺部氧合、血红蛋白携带能力明显异于健康人，临床上多采用PaO2、PaCO2血气指标评估上述变化，其中PaO2指血液中的氧分子所产生的张力，动脉血氧分压的高低，主要取决于吸入气体的氧分压和外呼吸的功能状态,PaCO2又称动脉血二氧化碳分压，指物理溶解的二氧化碳所产生的张力,衡量肺泡通气情况，反映酸碱平衡中呼吸因素的重要指标。鉴于此，在本研究中采用PaO2、PaCO2血气指标评估患者肺部氧合、血红蛋白携带能力，结果发现，联合应用布地奈德福莫特罗、甲泼尼龙治疗的患者上述指标明显改善，此结果提示着两者联合可明显改善患者肺部氧合、血红蛋白携带能力。

目前随着临床上对COPD的逐渐深入研究发现，此病发生后患者血清25(OH)D3含量明显降低，且已有研究证实，25(OH)D3含量降低往往标志着患者肺功能出现损伤，且随着患者肺功能损伤的不断加深，其含量降低更为加剧[13-14]。另外有研究显示，COPD患者机体存在不同程度的氧化损伤和炎症级联反应，8-iso-PGF2α与氧化损伤相关，其在患者疾病发生后会过量分泌，在患者疾病恢复后其含量降低[15-16]。而TNF-α是一种多向性的促炎性细胞因子，它属于TNF超家族的配体，通过TNFR1和TNFR2两种受体传递信号。TNF-α对大范围肿瘤细胞具有细胞毒性，是介导细菌感染免疫应答的重要因素[17-18]。张茜等[19]研究发现TNF-α可刺激黏附分子表达、激活内皮细胞凝血系统、诱导炎症介质释放等，在肺损伤的发生发展中起到重要作用。本研究结果发现，联合应用布地奈德福莫特罗和甲泼尼龙治疗COPD患者上述指标明显改善，分析其原因可能与两者联合修复患者肺损伤，抑制氧化损伤和炎症级联反应相关，表现为25(OH)D3水平升高，8-iso-PGF2α、TNF-α水平降低。

IL-32是在对IL-18诱导基因的微阵列研究中发现的一种分泌蛋白，在先天性和获得性免疫应答中发挥重要作用，参与慢性炎症、感染性和自身免疫性疾病的病理过程[20]。CK-MB已被证明是可以评价心肌受损的敏感性、特异性的指标，当COPD患者因肺部炎症引起的不同程度的心肌缺氧时，心肌功能会受到不同程度的损害，CK-MB浓度会升高[21]。另外本研究进一步分析IL-32与CK-MB在患者治疗前后的改变，结果显示，两者无明显变化，提示着，布地奈德福莫特罗联合甲泼尼龙虽然能够修复患者损伤肺功能，但对患者免疫应答和心肌损伤的修复作用较弱，因此本研究结果还需后续研究进一步分析两者对患者免疫应答和心肌损伤的作用，以期望造福于更多的患者。

综上所述，采用布地奈德福莫特罗联合甲泼尼龙治疗COPD患者可显著改善肺功能，有效升高25(OH)D3水平，降低8-iso-PGF2α水平效果显著。

利益相关声明：两位作者均声明不存在任何利益冲突。

作者贡献说明：周根伟：提出研究思路、设计研究方案、实施研究过程、分析试验数据、论文撰写、论文修改、论文审核；邹菖：资料收集整理、进行统计学分析、论文修改、论文审核。