富血小板血浆在组织修复中的应用

张书琴

摘要： 组织修复和创面愈合是外科传统并且重要的研究课题。组织创口愈合是一系列复杂的生物学过程，需要多种生长因子的协同合作，但生长因子制剂目前在临床使用仍然受到局限性。富血小板血浆（PRP）是第一代血小板浓缩物，通过血浆中不同成分沉降比的差异，离心后使各成分得以分离，使得血小板浓度为正常人血浆血小板浓度的4-7倍。通过激活血小板释放大量生长因子发挥生物活性和抗菌活性，有助于促进细胞增殖，胶原合成，上皮再生等。本文旨在围绕PRP在慢性创面修复，损容性皮肤病的应用进行综述。

关键词：富血小板血浆; 创面修复;痤疮瘢痕;雄激素性脱发

【中图分类号】 R558 【文献标识码】 A      【文章编号】2107-2306（2022）05--01

1.PRP的作用机制及制作：

组织创伤愈合是一系列不同类型的细胞蛋白，结构蛋白，生长因子和蛋白激酶等形成网络式交互作用的复杂的生物过程。生长因子是一种内源性的信号分子，是修复的启动和关闭的重要的信号分子，而其主要存在于血浆和血小板中，能够诱导多种细胞的增殖和分化，提高基质的产生，刺激血管的生成和趋化作用等。富血小板血浆（PRP）是自体全血离心后得到的高度浓缩的血小板血浆。血小板是包含α颗粒，致密颗粒，溶酶体颗粒的无核的最小的血细胞，在离心的过程中血小板被激活后释放出多种生长因子，如血小板衍生生长因子（PDGF），转化生长因子-β（TFG-β），表皮生长因子（EGF）和血管内皮生长因子（VEGF）等。生长因子通过细胞膜发挥生物学效应，并不进入到细胞内或者细胞核中，故富血小板血浆（PRP）没有致突变性，不会诱导肿瘤等不良组织的形成，且能够促进组织损伤修复的愈合，临床应用具有安全性[1]。PRP应用于组织损伤修复的治疗，具有体内实验和体外实验的基础研究表明。体内实验，有学者[2]研究自体富血小板血浆与脂肪干细胞载体复合物在体内构建血管化组织工程脂肪，进一步探究PRP预构血管化组织工程在组织工程技术的作用，将PRP联合脂肪干细胞移植物移入体内，结果表明8周移植物取出后实验组细胞存活数和新生微血管数明显大于对照组。可见，PRP能够促进新生细胞雪血管化过程，加速血运构建，促进种子细胞成活。体外实验研究表明，PRP促进成纤维细胞的增殖，胶原增生以及基质重塑蛋白的表达，促进骨髓间充质干细胞的增殖和胶原的产生[3]，激活后的血小板具有抗菌特性，能够释放7种抗菌肽，进而起到杀菌和抑菌作用[4] 。

目前国际上PRP的制备方式并没有统一的标准，按照离心的次数不同可以分为一次离心法，二次离心法和三次离心法。二次离心法中根据离心时间和速度的不同，又分为Petrungaro法，Landesberg法 和Aghaloo法[5]。有实验证实Landesberg法 和Aghaloo法均可制备有效浓度的PRP，Aghaloo法比Landesberg法制作的血小板浓度及活性高[6]。经典的PRP制备使用含有抗凝剂的采血器采血，采用二次离心法，首次采用缓慢的离心首先将红细胞与血浆分离，白细胞层处于分界处。吸取上层的清液以及少许邻近中层的红细胞，进行二次离心，白细胞移除后，即获得富血小板血浆[7]。

2.PRP的临床应用

2.1PRP在慢性难愈性创面修复中的应用   难愈性创面是指在各种内外因的作用下，创面不能通过正常的愈合过程而达到愈合，出现病理性的炎性反应，导致创面经久不愈[8]。Prabhu[9]等评价了PRP治療104例慢性溃疡患者的疗效，结果表明经过PRP治疗的患者有81.73%痊愈，经植皮愈合的患者有12.5%，故PRP可以提高慢性溃疡的愈合率。研究发现[10]，经60例缺血性糖尿病足患者分为实验组和对照组，实验组使用自体富血小板血浆外敷创面7日换药，对照组将表皮生长因子凝胶涂于伤口表面每日换药，治疗14日后，实验组的皮肤缺损程度明显低于对照组。目前临床上有学者将PRP应用于深度烧伤创面的治疗。Singer[11]通过测定局部厚度的猪深II烧伤模型应用PRP的效果，将PRP制成凝胶覆盖创面进行包扎后，测定PRP组与抗生素组的四种促进伤口愈合的重要生长因子血管内皮生长因子，转化生长因子-β1，血小板衍生生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的含量，以及疤痕深度的测量，结果表明生长因子比普通全血增加了1.5-8倍，但是其释放并没有时间的差异，经过14天的治疗发现PRP并没有促进愈合和减少疤痕。与之相反的是Roose[12]等人通过对52名深度皮肤烧伤患者进行随机对照实验，采用PRP和皮片移植治疗或者单纯皮片移植治疗，观察其上皮形成和吸收速率，结果表明PRP治疗的伤口区域在第5-7天显示更好或相等的上皮形成和吸收速率。

2.2PRP在损容性皮肤中的应用   萎缩性痤疮瘢痕是痤疮在愈合的过程中导致皮肤全层遭到破坏，进而导致组织的缺损。Nofal[13]首次将PRP应用于萎缩性痤疮瘢痕的治疗，按照全球瘢痕分级系统结果进行评价，实验结果表明患者的治疗效果显著，且有较高的安全性。一组随机对照实验研究[14]，超脉冲CO2激光联合PRP治疗对比单纯超脉冲CO2激光痤疮瘢痕效果，对比两组炎症渗出时间，愈合时间以及停工期，结果表明联合组的组织修复和再生更快，恢复效果好，恢复期和停工期短。除此之外，在临床上有通过微针疗法联合PRP治疗萎缩性痤疮瘢痕[15]，实验者将治疗患者分为微针联合PRP的实验组，单纯微针治疗组，以及单纯PRP治疗组，PRP通过局部涂抹的方式治疗，实验结果表明，实验组患者面部萎缩性痤疮瘢痕得到了明显的改善，并随着治疗次数的增加，总有效率越高。

雄激素性脱发的具体发病机制有待探讨，目前主要认为是一种雄激素依赖性的具有遗传倾向疾病。谢君强[16]等研究富血小板血浆联合点阵疗法治疗雄激素源性脱发，90例患者随机分为联合组，PRP组，非那雄胺组，联合组同时采用点阵疗法+PRP外用+口服非那雄胺，PRP组采用PRP外用和口服非那雄胺，非那雄胺单纯口服，观察受试者治疗前后脱发及头皮症状改善情况，结果表明联合组的有效率为93.33%，PRP组76.67%，非那雄胺组66.67%，PRP联合点阵疗法对性激素源性脱发患者效果显著[19]。Cervelli[17]等的一项随机，双盲，安慰剂，半头对照实验，通过对10例患者注射自体PRP至脱发处，以1月为周期进行三个月的治疗，组织病理学结果显示，注射处表皮厚度，毛囊数量，小血管较基线水平有所增加。

3.总结

PRP因其良好的生物学活性和抗菌活性在组织修复中的应用越来越广泛，在慢性创面修复，损容性皮肤病均取得了良好的临床效果，为临床治疗提供了一种思路。但PRP应用于组织修复的，虽有不少临床实验表明了其可行性，但具体的作用机制仍然缺少基础研究证明，是日后研究方向。

参考文献：

[1]Schmitz JP， Hollinger JO.The biology of platelet-rich plasma.J Oral Maxill of a cSu rg.2001：59：1119-1121.

[2]黎洪棉，柳大烈，赵培冉，梁双武.脂肪干细胞与自体富血小板血浆载体复合物体内构建血管化组织工程脂肪[J].中国组织工程研究，2012，16（45）：8424-8429.

[3]徐翔，银和平.富血小板血浆促进骨髓间充质干细胞的增殖[J].中国组织工程研究，2015，19（14）：2144-2148..

[4]Tang YQ， Yeaman MR， Selsted ME. Antimicrobial peptides from human platelets. Infect Immun. 2002;70（12）：6524-6533. doi：10.1128/IAI.70.12.6524-6533.2002

[5]袁霆，张长青.骨组织及软组织修复作用中富血小板血浆的制作及其原理[J].中国临床康复，2004（35）：7939-7941.

[6]王鹏飞，时长江，王玉亮，姜文学.兔富血小板血浆制备及其活性分析[J].中国组织工程研究，2013，17（08）：1411-1417.

[7]Dhurat R，Sukesh M.Principles and Methods of Preparation of Platelet-Rich Plasma：A Review and Author’s Perspecitive[J].J Cutan AesthetSurg，2014，7（4）：189-197

[8]Bjarnsholt Thomas et al. Why chronic wounds will not heal： a novel hypothesis.[J]. Wound repair and regeneration2008， 16（1） ： 2-10.

[9]Prabhu R，Vijayakumar C，Bosco Chandra A A，et al.Efficacy of homologous， platelet-rich plasma dressing in chronic nonhealing ulcers： an observational study[J].Cure us，2018，10（2）：e2145.DOI：10.7759/cure us.2145.

[10]杨也，瞿刚波，杨家福，袁毅，罗兵.富血小板血浆对缺血型糖尿病足的临床疗效观察[J].世界最新医学信息文摘，2019，19（71）：24-25

[11]Singer AJet al.The effects of Platelet-rich Plasma on healing of partial thickness burns in a porcine model.[J].Annals of burns and fire disasters，2018， 31（4）：298-305.

[12]Marck RE， Gardien KL. The application of platelet-rich plasma in the treatment of deep dermal burns： A randomized， double-blind intrapatient controlled study. Wound Repair Regen. 2016 Jul;24（4）：712-20.

[13]Nofal E， Helmy A，Nofal A，et al. Platelet -rich plasma versus CROSS technique with 100% trich l oro acetic acid versus combined skin needling and platelet rich plasma in the treatment of a troph ic acne scars：a comparative study[J].Dermatol Surg ，2014，40（8）：864-873.

[14]徐旻，呂君，陈尚周，张洋，周发琼.超脉冲CO_2点阵激光联合PRP治疗面部痤疮凹陷性瘢痕疗效分析[J].中国美容医学，2020，29（05）：41-44.

[15]崔晓美，丁晓东，陈晓明，姚晓东，许攀，朱文艳.微针疗法联合PRP治疗痤疮凹陷性瘢痕疗效分析[J].中国美容医学，2018，27（10）：27-30..

[16]谢君强，谢君，吴剑波.富血小板血浆（PRP）联合点阵疗法治疗雄激素源性脱发的临床观察[J].中国医疗容，2020，10（04）：53-57.DOI：10.19593/j.issn.2095-0721.2020.04.015.

[17]Cervelli V， Garcovich S.The effect of autologous activated platelet rich plasma（AA-PR P）injection on pattern hair loss： clinical and histomorphometric evaluation[J]l.Biomed ResInt，2014，2014：760709.