输血前Rh血型抗原与不规则抗体的检测

赵学礼 杜 喆

ABO血型系统是输血领域最广泛也是最重要的血型系统，Rh血型系统次之，但Rh血型系统却是最复杂的血型系统，具有抗原多态性和免疫原性[1-2]。Rh血型系统有50个抗原，目前研究发现与输血密切相关的主要有5种，分别是D、C、c、E、e等抗原，这5种抗原组合成18种不同的Rh血型分型。国家标准严格规定Rh系统的D抗原作为输血前常规检查，基本避免了Rh（D）阴性的患者输Rh（D）阳性的血，因为D抗原同型输血原则，所以近年来关于抗体D的报道逐渐减少[3]。由于Rh血型系统的C、c、E、e等抗原目前大多数采取随机输血原则，导致抗C、抗c、抗E、抗e等抗体产生的报道时有发生，因此临床输血Rh血型抗原的检测和同型输注应该引起重视以保证输血安全。为了解Rh血型抗原检测在输血中的重要性，选择3200例输血和备血的住院患者进行Rh抗原检测，另外对45例不规则抗体筛查试验阳性的输血患者进行不规则抗体鉴定。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集本医院2018年1月-2019年10月期间输血和备血的住院患者3200例，进行Rh抗原D、C、c、E、e的检测，年龄3～82岁，平均年龄（43.56±11.5）岁。另外收集本医院2018年1月-2020年7月不规则抗体筛查阳性的输血患者45例，进行不规则抗体鉴定，年龄4～78岁，平均年龄（46.7±12.3）岁。

1.2 纳入和排除标准 ①纳入标准：患者经检查确诊，均需要备血或具有临床输血治疗的指征；患者临床资料完整；患者精神状态正常，能够配合本研究；患者知情同意并签署知情同意书。②排除标准：门诊患者或患者临床资料不完整；患者2周内服用免疫抑制剂、激素类药物影响检查结果的判断；凝血功能障碍及伴发其他血液系统疾病的患者；严重心、肝、肾功能不全患者及恶性肿瘤患者。

1.3 试剂与仪器 本研究使用试剂和仪器包括不规则抗体鉴定细胞（上海血液生物医药责任有限公司），Rh血型分型微柱凝胶卡（江阴力博生物技术有限公司），抗人球蛋白检测卡（长春博讯生物技术有限公司），TD—3A型血型血清学用离心机（长春博研科学仪器有限责任公司），FYQ型免疫微柱孵育器（长春博研科学仪器有限责任公司）等。

1.4 方法

1.4.1 Rh抗原检测 ①红细胞悬液的制备：将待检者的血液样本按3000 rpm、2 min离心制备成红细胞样本，用加样枪在压积红细胞中层量取10 μL压积红细胞加入至1 mL生理盐水中，配置成0.8%～1%浓度的红细胞悬液，②取Rh血型分型检测卡（柱凝集法）一卡，进行标记，1～6孔中加入待检者0.8%～1%红细胞悬液50 μL，将微柱凝胶卡垂直竖立，轻敲混匀加样槽中的红细胞悬液。③即刻使用专用血清学离心机离心5 min。④离心结束后，取出观察判定结果，登记结果。

1.4.2 不规则抗体鉴定 将谱细胞（10套鉴定细胞）分别配置成浓度为0.8%～1%的红细胞悬液；抗人球蛋白检测卡的十个凝胶微管标号，每个微管用加样枪加50 μL配置的红细胞悬液，再将分离好的待检者血浆加入1到10孔微管，每孔50 μL；微柱凝胶卡放入免疫微柱孵育器孵育15 min，即刻使用专用血清学离心机离心5 min，读结果，对照红细胞血型抗体鉴定细胞反应格局表判定抗体。

1.5 统计学方法 应用SPSS 19.0统计学软件处理数据，所得计数资料[率（%）]做统计描述。

2 结 果

2.1 Rh血型系统D、C、c、E、e抗原表型分布情况分析 用血清学方法对3200例样本进行Rh血型系统D、C、c、E、e抗原检测。Rh血型CcEe抗原阳性率：C抗原阳性率90.00%，c抗原阳性率55.19%，E抗原阳性率46.19%，e抗原阳性率93%。见表1。

表1 3200例样本Rh血型系统抗原分布 例(%)

2.2 不规则抗体鉴定结果分析 对45例不规则抗体阳性的患者进行不规则抗体鉴定，Rh血型系统抗体检出率分别为：抗E（35.56%），抗D（8.89%），抗c（4.44%），抗Ec（8.89%），抗e（2.22%），其中抗E检出率最高。初步解释为人群Rh（E）血型抗原阴性率较高，随机输入含Rh（E）血型抗原的血可能性大容易产生抗体。结果见表2。

表2 不规则抗体鉴定分布情况分析 例(%)

3 讨 论

随着社会的迅猛发展，医疗技术的不断提升，输血技术在临床疾病治疗方面获得了广泛的应用和发展，尤其在急重症患者的急救和治疗方面发挥了极大的作用。血型抗体分天然抗体和免疫抗体，免疫抗体产生的特点是首次受到外界抗原刺激产生少量抗体，当再次碰到以往接触过的同种抗原时，机体针对该抗原产生比初次更为强烈和迅速的免疫反应，并产生大量的抗体[4-5]。Rh血型系统抗体属于免疫抗体，其主要通过输血或者妊娠刺激产生[6]，临床上此系统抗体较容易引起输血反应或新生儿溶血病。目前越来越多的患者不规则抗体阳性引起交叉配血不合，说明输血前只常规进行ABO和RhD检测是不够的，还应对患者进行Rh血型抗原CcEe检测，施行Rh血型抗原相合输血原则。

本研究中，3200例住院患者Rh血型抗原阳性率分布如下：D抗原阳性率（99.56%），C抗原阳性率90.00%，c抗原阳性率55.19%，E抗原阳性率46.19%，e抗原阳性率93%。E、e、C、c四种抗原中E抗原阳性率最低为46.19%，c抗原阳性率略高于E抗原阳性率，为55.19%，这与阳志勇等[3]报道的基本一致。目前，D抗原已经是输血前常规检查，Rh（D）阴性患者基本都实行同型输注或自体输血，特别是反复输血的RhD阴性患者和需要输血的RhD阴性女性更重视RhD同型输注。E、e、C、c等抗原的阳性率明显低于D抗原阳性率，随机输血时更容易产生抗体，如果输血前只进行D抗原检测，那么终将会给输血带来困扰。目前，国内大多数医院对E抗原和c抗原都是采用随机输血原则，不对E和c等抗原进行特别甄别。本院统计的E抗原、c抗原阳性率大概都在50%左右，E抗原和c抗原阴性的患者随机输血时输入含有对应抗原的概率较大，邱芳等[7]报道E抗原和/或C抗原阴性患者随机输血输入对应抗原阳性血液概率是45.82%；文献报道[8]，Rh血型系统中，抗原的强弱顺序依次为D、E、c等，可知E、c抗原阴性患者采用随机输血的方式时产生抗E和抗c的可能性很高[9]，这与Gupta K P等[9]和阳志勇等[3]的报道一致。e抗原阳性率（93%）和C抗原阳性率（90%）都比E和c的阳性率高很多，关于其抗体的报道就比后者少。由此可得患者输血前应进行E、e、C、c等抗原检测，尤其是Rh（E），Rh（c）的同型输血更值得被关注。

本研究中45例患者不规则抗体鉴定结果中Rh系统的抗体有27例，占60%。这些患者主要分布在频繁输血的科室，由此可以初步判定多次随机输血的患者更容易产生Rh血型系统抗体。45例抗体中抗E占比最高，为35.56%，这证明患者随机输血时容易产生抗E抗体。如遇到Rh系统抗体阳性输血患者，配血的困难在于：①库存量需要足够大才有可能筛选出合适的血液，耗时、耗材、耗人力。②有些患者不规则抗体较弱交叉配血被遗漏，输血有风险。③对于紧急输血患者在没有提前告知的情况下将耽误输血时机。因为本市血站近几年血液供应持续紧张，输血科库存量少，盲目配血更不可取，所以输血前对患者和献血者进行Rh血型抗原检测，输血时Rh血型抗原相匹配输注，从源头上减少输血患者Rh血型系统抗体的产生显得更为重要。

综上分析，输血前进行Rh血型抗原检测具有重要意义。调查显示，目前已经有少数医院和血站把Rh血型抗原E、e、C、c等作为常规检测，由于经济和医疗水平限制，全面开展E、e、C、c抗原检测还需要些时间。抗E和抗c是引起输血溶血反应的重要原因，如果把E抗原和c抗原作为患者血型的常规检查，让Rh（E）、Rh（c）同型输血，将会减少抗E或抗c的产生，这在输血中也具有重大意义。随着医疗和经济水平发展，精准输血越来越被重视，Rh血型抗原检测会在更多的医院和血站开展，最终实现更科学、更安全的输血。