坝光湿地园野生鸟类疫源疫病监测的研究

王 凯

(深圳市自然保护区管理中心，广东 深圳 518000)

0 引言

深圳市地处广东省南部，位于北回归线之南，是我国重要的海滨城市，也是东半球国际候鸟的迁徙通道。每年冬季上万只候鸟会到达深圳进行停歇和越冬，坝光片区位于深圳市大鹏新区的东北角，坝光湿地园鸟类资源丰富，海岸线曲折，山峦环绕，植被葱郁，海岸线分布有古银叶树群落、红树林生态湿地园、水库、芦苇池塘等重要生态资源，由于鸟类分布的种类多、种群数量大，其鸟种数量的变化在某种程度上也反映了坝光湿地园生态资源的变化。野鸟可能带的病毒中对人威胁最大的便是高致病性禽流感病毒，例如H5、H7亚型禽流感病毒。根据野生动物疫情防控办法，需要对野生动物疫源疫病进行主动监测，设置前哨岗，做到主动监测，提前防范。

掌握该片区鸟类疫源疫病分布特征和及时发现外来疫病是监测的主要任务。为掌握该区域鸟类种类的变化情况，从2017年开始对坝光湿地园片区进行鸟类监测，进一步的掌握湿地园鸟类疫病状况、数量、种群、鸟种区域信息，建立鸟类疫源疫病数据库，调查鸟类数量、种群变化的规律，调查的结果为后续的鸟类监测和预测鸟类疫源疫病提供重要的参考依据。

1 监测基本情况

1.1 监测方法

疫源疫病监测方式分为被动监测和主动监测，主动监测是在疫情发生前对监测点进行定期监测，有利于早发现疫情，制定预防措施；被动监测是在疫情发生后，进行疫情的应急处理，往往比较被动，只能采取补救的措施，所以主动监测是符合国际通用惯例的，也是目前国内野生动物疫源疫病监测的发展趋势。掌握野生鸟类分布特征，有助于预防措施的制定，进行高致病性禽流感监测采样检测，可以提前发现疫病，及早采取预警措施，可以随时掌握鸟类疫情动态，起到前哨的作用，显著降低人和动物高致病性禽流感的发病率。

采用固定路线调查和固定地点直接计数法相结合的方式进行监测。根据坝光湿地园野生鸟类分布、活动、迁徙及生境特点确定具体的巡查路线，沿固定路线徒步监测，在野鸟重要栖息地、活动地点和历史野鸟分布记录点设置固定监测点，收集野鸟粪便样本，统计能够观察到范围内的所有鸟类。对于监测路线上常见鸟类进行就近观察；对滩涂，海域区域的监测根据潮汐规律，选取最佳潮位进行观察，尽可能利用调查设备拉近与鸟的距离，提高准确计数和鸟类的识别。根据禽流感在不同鸟类中发生的相对频率，将样品采集的对象偏向于水鸟。采集的主要是野鸟的粪便拭子样本，对于野鸟粪便样本的采集，只采集新鲜粪便样本，一般是采集早晨新鲜粪便，并将其放入含有抗菌素的禽流感病毒采样管里面，尽量使用非灭活型保存液，方便后续实验室检测。

1.2 监测时间

2020年1-12月对深圳市坝光湿地园片区鸟类进行鸟类监测，历时12个月。根据不同季节，结合鸟类迁徙的特点将一年调查时间分为，迁徙季(11-4月)和非迁徙季(5-10月)。迁徙季每个星期调查5次，每次采集粪便样本(3～6份)；非迁徙季每个星期调查1次，每次采集粪便样本(1～3份)，每次调查时间持续2～4 h。需要注意的是粪便样本的采集时间，主要是在早晨的7:00—8:00，因为这段时间是野鸟觅食的高峰期，是收集新鲜粪便的最佳时间。收集粪便时，尽量避免收集被太阳暴晒过的粪便，因为这样会降低检测的准确性。调查时间如表1所示。

表1 2020年坝光湿地园鸟类监测时间表

1.3 监测设备

使用的设备包括施华洛世奇单筒望远镜、双筒望远镜、GPS定位仪，计数器、禽流感快速检测试剂盒(通用性)、禽流感病毒采样管(非灭活型)、一次性手套口罩、密封袋、保温箱、记录本、手机。

1.4 监测点的选取

监测点的选取尤为重要，监测点的选择，决定着能看到鸟种的数量和类别以及鸟类粪便样本的收集度。根据历年湿地园鸟类集中分布区域，再结合现场实地勘察结果，将监测点分为5个，监测点的生境类型包括了滨海滩涂、芦苇水塘、林场和草地，具体表2所示。

表2 坝光湿地园鸟类资源监测点

2 监测采样的工作细节

2.1 采样原则

野鸟在确定的监测范围及监测点内，所能监测到的鸟类90%都是国家或省级重点保护野生动物，应保护动物，以活动区域环境样品、粪便排泄物拭子的方式为主，这些样本也是最容易获得的，且不会对野生鸟类造成伤害；如出现鸟类意外死亡，疑似疫情情况下进行野鸟组织、咽肛拭子、脏器等采样监测的需严格按照《广东省突发重大陆生野生动物疫情应急预案》(2010年6月26日广东省林业厅发布实施)LY/T 2359-2014 陆生野生动物疫源疫病监测技术规范进行采样。

2.2 采样种类

野鸟粪便样本:采集野鸟粪便样本时，一定要掌握粪便采集的几个要点，一个是采集的粪便一定要新鲜，没有被太阳直射过的；二是采粪便样本时，不可直接将整个粪便样本放进采样管，仅采集粪便上面的透明黏液即可。

野鸟尸体及组织样本:当监测发现死鸟，需要对野鸟尸体进行组织采样时，可以先观察野鸟尸体是否已经腐烂，只对死亡时间在24 h内的野生鸟类进行采样，因为超过24 h的鸟类尸体腐烂严重会影响检测结果，所采组织样本尽量取典型病变部位。

动物样本:对于一些无法进行现场采样的，疑似疫病野鸟尸体，可以直接将野鸟尸体进行密封保存，冻存后，立即送实验室进行检查。

2.3 采集样品的保存

样品密封于塑料袋或病毒采样管中。能在24 h送到实验室的样品在2℃～6℃环境下运输，否则进行冷冻后再行运输；不能及时送检的样品，应冷冻-70℃或液氮长期保存，并防止反复冻融。

2.4 采集样品的包装

样品应密封包装，采用的是非灭活型的病毒采样管，管外标注样品名，采样日期，与采样记录本中的信息一一对应，当样品中含有疑似高致病性病原体时，标注警示语或提示用语。

2.5 采集样品的检测

现场采集的野鸟粪便样本，首先需要进行现场快速检测，使用的是韩国安捷Anigen禽流感抗原检测试剂盒(通用性)，因为抗原检测试剂检测速度快，现场几分钟就可以出结果，能够在疫情发生早期检测出野鸟体内是否含有病毒，从而给疫源疫病检测提供前期帮助。在监测区域内采集的每一份样本都会进行快速检测，对于一些疑似疫源的样本则委托深圳市动物疫病预防控制中心采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法进行再次检测。RT-PCR检测对比现场快速检测，准确率会更高，但缺点也会很明显，时间也会更久，所以进行野鸟粪便样本检测还是以现场快速检测为主。

2.6 采样防护措施

采样之前先根据采样的样品种类以及周围环境条件，提前做好预防措施。在野外对疑似禽流感疫病死亡动物采样，采样时应穿戴好防护服、护目镜、N95或医用外科口罩、橡胶手套和胶靴等；每次取样后，应洗手消毒；并对采样现场进行消毒处理。进行常规野鸟粪便采样时，也需要佩戴一次性医用外科口罩和一次性手套，建议使用一次性加厚的乳胶手套。在采样和现场快速检测完成后，需将现场检测和采样垃圾密封带走，带回实验室，进行专门回收销毁处理，不可随意丢弃。

3 监测结果

一年时间共计监测鸟类67种，隶属9目29科，其中佛法僧目鸟类2种，占鸟类种数的2.99%；鸽形目鸟类2种，占鸟类种数的2.99%；鹳形目鸟类6种，占鸟类种数的8.96%；鹤形目鸟类1种，占鸟类种数的1.49%。鸻形目鸟类4种，占鸟类种数的5.97%；鹃形目鸟类6种，占鸟类种数的8.96%；雀形目鸟类42种，占鸟类种数的62.69%；隼形目鸟类3种，占鸟类种数的4.48%；雨燕目鸟类1种，占鸟类种数的1.49%。从野鸟种类组成上看，以雀形目鸟类种数为最多，由于监测采样是以雁鸭类和鸻鹬类等水鸟为主，所以把采样重点还是放在了滨海滩涂和芦苇水塘区域，总计采集野鸟粪便样本406份其中委托深圳市动物疫病预防控制中心采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测56份，自行采用禽流感抗原速测卡胶体金快速法检测406份，野鸟H5、H7亚型禽流感病毒检测结果均为阴性。处理野鸟死亡1例，即2020年2月7日，在坝光湿地园滩涂发现1只小白鹭死亡，立即对现场进行封锁、勘察、消毒处理，并对死体进行禽流感快速检测，检测结果为阴性，后在现场再次对死体进行采样保存、消毒后进行深埋作无害化处理，最终实验室RT-PCR监测结果也为阴性。

3.1 监测区域内鸟类的组成和分布状况

2020年在坝光湿地园监测到的67种鸟类中，有国家重点保护鸟类7种，属于国家二级保护鸟类的有凤头鹰、红隼、蛇雕、白胸翡翠、画眉、褐翅鸦鹃、小鸦鹃。集群分布的种类有白鹭、大白鹭、苍鹭、青脚鹬、金眶鸻、白头鹎、红耳鹎、黑脸噪鹛、暗绿绣眼鸟，最大统计数量为白鹭971只，少见和偶尔见到的鸟种有海南蓝仙鹟、凤头鹰、白腹凤鹛、蛇雕、赤红山椒鸟。

从鸟类的生境分布来看，滨海滩涂区分布的鸟类主要有青脚鹬、金眶鸻、苍鹭、白鹭、大白鹭等，该区是水鸟主要觅食地，也是观察水鸟最佳的监测点，总计监测到苍鹭473只、大白鹭442只、金眶鸻288只，该区域受潮汐的影响，涨潮为水，退潮为滩，因此该区的鸟类活动与潮汐有关。涨潮后，鸟类多到高处滩涂或者周边的红树林区域栖息，也有部分鸟类到池塘区域休息；退潮后，则前往该区域进行觅食活动。芦苇池塘区域也分为浅水区和深水区，这里是大部分水鸟类的觅食地，也是多种涉禽的栖息地，主要分布的鸟类有普通翠鸟、白胸翡翠、黑水鸡、黄尾鳽、暗绿绣眼鸟、长尾缝叶莺等，深水区主要是白胸翡翠、黑水鸡的主要要栖息地，其中黑水鸡有112只、白胸翡翠有134只。林场和草地则是雀形目鸟类的重要觅食地，栖息的鸟种多达42种，主要有白鹡鸰、黑脸噪鹛、褐翅鸦鹃、红耳鹎、鹊鸲、喜鹊、珠颈斑鸠、乌鸫、黑领椋鸟、灰椋鸟、山斑鸠、大嘴乌鸦、白头鹎等。鸟类监测种类分布统计如表3所示。

表3 2020年坝光湿地园鸟类监测种类统计表

续表3

3.2 鸟类种类和数量的动态变化

鸟类种类和数量的变化，在鸟类迁徙季不管是鸟类种类和数量都会达到监测的最高峰，整个监测期间，在坝光监测次数达到了144次，统计鸟种数量最多为59种，出现在4月，统计到最少鸟种为35种，出现在7月份。详细鸟类种类和数量变化如图1所示。

图1 2020年坝光湿地园鸟类监测种类和数量变化图

从图1能够看出，整年度除了4月份，其他月份鸟种变化幅度很小，最多47种，最少35种，但鸟种数量上的变化就比较大了，其实主要变化阶段，就是迁徙季和非迁徙季的相差较大，最多1 184只，最少264只，表明在迁徙季，鸟类不管是数量还是种类都是高于非迁徙季的，那么监测的重点放在鸟类迁徙季也是非常正确的。

4 结语

通过监测，掌握了坝光湿地园区域鸟类种类、种群数量动态变化情况，也明确知道鸟种的区域分布，知道了监测采样的具体地点，可以很明确在哪可以很快地采集到水鸟、林鸟粪便。通过监测也能看到，迁徙季和非迁徙季其实鸟种数量变化并不大，所以这一项数据可以看出，迁徙季大部分鸟类并不会到坝光湿地园进行停歇和觅食，绝大部分都是常住鸟类。而且通过2020年监测信息与往年历史记录相比较监测到鸟种较少，可能与人为活动相关，对鸟种数量变化应予以重视和长期监测。鸟类资源调查对坝光湿地园生态系统的完整性，对候鸟和留鸟的保护，尤其对保护海岸线古银叶树群落、红树林生态湿地园等重要生态资源十分重要，应予以长期重点监测。并且所有的监测信息和数据的收集，预示着鸟类疫源疫病数据库的初步建立，监测的结果也能为后续的监测和预测鸟类疫源疫病提供重要的参考依据。

从一年的监测工作的实践来看，也确实存在着一些问题，一是监测的时间段比较单一，只集中在早晨，这样会影响鸟类监测和统计的结果，统计到的鸟类种数和数量少于实践分布的数量，后面会增加傍晚的监测时间段，这样就含括了鸟类活动和觅食的主要时间段，减少统计误差。二是鸟类粪便样本采集数量较少，且粪便种类分辨较难，按照监测到的鸟种数量来对比，样本采集数量相对较少，并没有含括到监测区域内的全部鸟种。因此在今后的监测工作中，需要积累采样经验，通过粪便辨别出野鸟的种类加大采样数量和种类。