前列腺特异性膜抗原在前列腺癌组织中的表达与临床病理特征的关系及预后价值

季金涛 康波 苏燕胜

近年来，我国男性前列腺癌的发病率逐年上升，大多数病人就诊时已属中晚期，总体预后较差，5年生存率仅为69.2%，远低于发达国家[1-3]。前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen，PSMA)是一种Ⅱ型跨膜糖蛋白。PSMA在原发性前列腺肿瘤组织及远处转移病灶中的表达高于正常前列腺组织，且与肿瘤分级和分期密切相关[4-5]。肿瘤组织中PSMA蛋白的高表达与病人生化复发相关，提示PSMA可能与前列腺癌病人的预后紧密相关。Perner等[4]、Ross等[5]研究发现，在对临床病理参数如肿瘤分期、分级和术前前列腺特异性抗原(PSA)水平进行多变量调整后，PSMA的高表达可以预测病人的生化复发，可作为独立危险因素。然而，Minner等[6]在调整了临床病理特征后，其结果表明，PSMA不是病人生化复发的独立危险因素。PSMA能否作为病人生化无复发生存的独立预后因子仍存在争议。我们通过免疫组织化学染色方法检测PSMA在前列腺癌组织和前列腺增生组织中的表达情况，分析其与病人临床病理特征的关系及其预后价值。

对象与方法

一、对象

2015年1月～2018年9月我院行手术治疗的前列腺癌病人280例，前列腺增生病人40例。均行腹腔镜下前列腺癌根治术，术后对于高危病人行辅助内分泌治疗(2～3年)。纳入标准：(1)经影像学及病理检查确诊为前列腺癌；(2)术前未行放化疗及抗雄激素等内分泌治疗；(3)可获得相应的石蜡切片标本。(4)术前无骨转移。病人及家属已签署知情同意书。

二、方法

1.PSMA检测：采用免疫组化方法。在低倍镜下观察免疫组织化学染色结果，对于具有阳性染色的切片，以高放大倍数确定在每个选定视野中显示高和低染色的肿瘤细胞的染色强度和比例。强度类别等级：0(蓝紫色)，1(淡黄色)，2(棕黄色)和3(棕褐色)。着色比例等级：0(<1%)，1(1%～5%)，2(5%～25%)、3(25%～50%)和4(50%以上)。将强度类别等级与比例类别等级相乘得到最终得分，范围从0～12。<5为阴性表达，≥5为阳性表达。

2.随访：术后2年内，每3～6个月进行1次复查，2年后1年1次随访，直至病人出现生化复发(血清中PSA水平>0.2 ng/ml或出现2次连续的PSA水平升高)或死亡。

三、统计学分析

应用SPSS 26.0软件分析数据，通过χ2检验分析PSMA的表达情况和病人临床病理特征间的相关性。通过Kaplan-Meier方法比较PSMA阴性表达与阳性表达两组病人的生化复发时间差异。采用COX比例风险回归模型分析影响前列腺癌病人生化复发的独立预后因子。P<0.05为差异有统计学意义。

结果

1.PSMA在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达情况：在280例前列腺癌组织中，共216例(77.1%)PSMA表达阳性；40例前列腺增生组织中，共17例(42.5%)PSMA表达阳性，阳性率低于前列腺癌组(P<0.001)，免疫组化见图1。

A.典型染色区域之一(免疫组织化学染色SP法×20，细胞浆及细胞膜均呈现棕褐色强染色)。B.A的局部放大图片

2.PSMA与前列腺癌病人临床病理特征的关系：不同病人年龄、T分期、术前PSA水平的PSMA表达差异无统计学意义(χ2=0.416、5.524、0.116；P=0.519、0.063、0.944)。存在淋巴结转移、Gleason评分>7分的病人PSMA阳性表达率较无淋巴结转移、Gleason评分≤7分高，差异具有统计学意义(χ2=7.335、10.421；P=0.007、0.001)。见表1。

表1 PSMA与前列腺癌病人临床病理特征的关系

3.PSMA的表达与病人预后的关系：通过COX单因素及多因素模型分析影响病人无生化复发生存率(biochemical relapse-free survival，BRFS)的因素。结果显示，淋巴结转移状态、PSMA表达情况是BRFS的独立预后因子(P<0.05)。见表2。相较PSMA阴性表达病人，PSMA阳性组的BRFS明显降低，PSMA阳性组的中位BRFS为27个月，而PSMA阴性组的中位BRFS未达到，但在随访期内高于80个月(图2)。

表2 前列腺癌病人BRFS的COX回归单因素及多因素分析

图2 不同PSMA表达的生存分析

讨论

本研究结果表明，前列腺癌组织中PSMA阳性表达率高于前列腺增生组织，且在前列腺癌组织中，存在淋巴结转移、Gleason评分>7分的病人PSMA阳性表达率较无淋巴结转移、Gleason评分≤7分高。表明PSMA在良恶性前列腺组织中均有不同程度的表达，但在前列腺癌组织中的表达明显升高，且PSMA在前列腺癌组织中的表达与淋巴结转移状态、肿瘤分化程度密切相关，提示PSMA在前列腺癌的发生发展过程中可能发挥作用。Colombatti等[7]通过体外和体内实验表明，PSMA的高表达可以激活MAPK信号通路，从而促进肿瘤细胞存活和增殖。张庆皎[8]采用免疫组化法检测45例前列腺癌和15例前列腺增生组织标本，前列腺癌中的PSMA阳性表达率为71.1%，前列腺增生组织中的PSMA阳性表达率为46.7%，且发现前列腺癌的分化程度与淋巴结转移状态与PSMA阳性表达率相关，中低分化、有淋巴结转移组明显高于高分化、无淋巴结转移组。黄文斌等[9]研究结果也表明，前列腺癌组织中PSMA表达水平高于前列腺增生组织，且PSMA染色强度和Gleason评分密切相关。任加强等[10]研究表明，PSMA在分化差的前列腺癌组织中的表达，与Gleason评分存在相关性。本研究结果与以上研究结果一致，证实淋巴结转移、肿瘤分化程度与PSMA表达水平密切相关。

Gleason评分是预测前列腺癌疾病进展的重要指标之一，但Catalona等[11]、Ross等[12]的研究表明，单独使用Gleason评分很难预测疾病结局。Cowen等[13]通过Gleason评分结合术前血清PSA水平和临床分期构建列线图，也无法识别所有发生生化复发风险的病人。

本研究通过COX单因素及多因素回归分析发现，PSMA阳性表达、淋巴结转移是影响前列腺癌病人BRFS的独立预后因子。与我们的研究结果相一致的是，Ross研究发现前列腺癌组织中PSMA高表达与肿瘤分级和病理分期显著相关，且PSMA高表达肿瘤的病人与PSMA低表达肿瘤的病人相比，其生化复发率显著增加；更进一步的多因素回归分析显示，肿瘤的病理分期和PSMA表达情况可作为生化复发的独立预后因子。Perner等[4]分析了93例前列腺癌病人的PSMA表达情况与病人预后相关性，发现PSMA表达和盆腔淋巴结转移与生化复发时间显著相关。Kasperzyk等[14]研究了902例前列腺肿瘤组织中PSMA蛋白的高表达是否与肿瘤特异性死亡和肿瘤进展生物标志物相关，结果发现，在平均13年的随访中，较高的PSMA表达与肿瘤特异性死亡显著相关，且PSMA高表达与Gleason评分和术前PSA水平密切相关。以上研究均表明PSMA在原发性前列腺癌中过表达与病人不良预后相关，并可独立预测病人预后。

总之，前列腺癌组织中PSMA呈现高表达，其表达阳性率与淋巴结转移情况、Gleason评分密切相关，可以作为影响病人无生化复发生存的独立预后因子。