拉莫三嗪治疗颅脑损伤后癫痫血药浓度与OCT1基因多态性的关系

周子健，陈红德

（1.广东省工伤康复医院药剂科，广东广州 510440；2.广州市白云区石井人民医院内科，广东广州 510430）

癫痫是一种慢性脑功能障碍性疾病，发病率较高，全球患者近7 000万，给患者的日常生活和工作造成明显消极影响[1]。癫痫是由大脑神经元异常放电导致，而颅脑损伤即容易造成大脑神经元异常从而导致癫痫[2]。拉莫三嗪（LTG）作为癫痫治疗的一线药物，在不同患者间的临床疗效存在较大差异，当药物含量低于血药治疗窗时可能会引起治疗无效，若高于血药治疗窗则有可能引起心血管、中枢神经等系统的不良反应[3-4]，威胁患者的健康，因此对LTG血药浓度及其影响因素的研究即成为癫痫临床治疗的研究重点。而有机阳离子转运蛋白（OCT）作为一种内摄转运蛋白，有研究发现有机阳离子转运蛋白1（OCT1）介导的转运过程与LTG的胞内浓度密切相关[5]。故本研究对LTG治疗颅脑损伤后癫痫患者体内血药浓度与OCT1基因多态性的关系进行了探讨，旨在为LTG的临床应用与癫痫治提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月至2019年12月广东省工伤康复医院收治的80例颅脑损伤后癫痫患者为研究对象进行回顾性分析，根据治疗效果的不同分为有效组（41例，显效+有效）和无效组（39例）。有效组患者中男性19例，女性22例；年龄22~37岁，平均年龄（28.43±3.87）岁；体质量45~59 kg，平均体质量（52.67±5.34）kg；病程5~42个月，平均病程（21.43±2.88）个月。无效组患者中男性18例，女性21例；年龄23~35岁，平均年龄（28.19±3.25）岁；体质量44~60 kg，平均体质量（52.38±5.17）kg；病程7~41个月，平均病程（21.68±3.04）个月。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），组间具有可比性。研究经广东省工伤康复医院医学伦理委员会同意。诊断标准：参照《神经外科与癫痫（第2版）》[6]中颅脑损伤后癫痫的诊断标准，并经计算机断层扫描及专科医师诊断，确诊为颅脑损伤后癫痫。纳入标准：①符合上述诊断标准；②年龄≥18岁；③患者治疗前均行OCT1 rs628031型基因检测。排除标准 ：①服用了可能影响LTG代谢的药物（如避孕药等）者；②已知对所使用药物过敏者；③妊娠或哺乳期妇女；④合并有心肝肾等其他系统严重疾病者；⑤患者依从性差，不能遵从医嘱；⑥随访失访者。

1.2 治疗方法 ①基因检测方法：抽取患者治疗前外周静脉血300 μL，并在国家生物技术信息中心数据库中检索人OCT1 rs628031序列，使用Primer 3.0进行引物设计，使用DNA纯化试剂盒（北京康为世纪生物科技有限公司，批号：CW0524）提取患者DNA并纯化，OCT1 rs628031基因型通过聚合酶链式反应扩增表达，以HYK-PSTAR-IIA型基因测序仪（深圳华因康基因科技有限公司，国械注准20143222171，型号：HYK-PSTAR-IIA）进行测序，完成后以GeneMapper 4.1进行分析。②给药方法：患者均使用LTG（三金集团湖南三金制药有限责任公司，国药准字H20143194，规格：50 mg/片）单药治疗，剂量随患者个体差异进行调整，持续6个月。

1.3 观察指标 ①临床疗效统计。结束治疗后随访1年对患者疗效进行评估，疗效标准参考《神经外科与癫痫（第2版）》[6]，具体标准为：显效：治疗结束后1年癫痫发作次数减少量≥85%；有效：治疗结束后1年50%≤癫痫发作次数减少量＜85%；无效：治疗结束后1年癫痫发作次数减少量＜50%。同时依据治疗效果将患者分为有效组（显效+有效）和无效组。②观察并比较两组患者OCT1基因多态性。③比较不同OCT1 rs628031基因型患者LTG剂量、LTG稳态血药浓度、LTG标准剂量血药浓度差异。血药浓度检测方法为：抽取癫痫患者单用LTG治疗至稳态谷浓度的清晨空腹外周静脉血2 mL，2 500 r/min离心15 min分离血清后使用乙二胺四乙酸抗凝后分离血浆，-80 ℃存储待检，使用反相高效液相色谱法测定LTG血药浓度。LTG标准剂量血药浓度=LTG稳态血药浓度/患者每日每千克体质量服药剂量。

1.4 统计学分析 采用SPSS 18.0软件进行数据处理，计数资料以[例(%)]表示，采用χ2检验；计量资料以（）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较行方差分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床疗效统计 结束治疗后随访1年，显效患者占比13.75%，有效患者占比37.50%，无效患者占比48.75%，依据治疗效果将患者分为无效组（39例）和有效组（41例）。

2.2 两组患者OCT1 rs628031基因多态性比较 无效组患者OCT1 rs628031 GG、AG基因型占比显著高于有效组，AA基因型占比显著低于有效组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者OCT1 rs628031基因多态性比较 [例(%)]

2.3 OCT1基因多态性与LTG剂量的相关性分析 OCT1 rs628031 GG、AG基因型携带者LTG剂量显著低于OCT1 rs628031 AA基因型携带者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 OCT1基因多态性与LTG剂量的相关性分析（ ）

表2 OCT1基因多态性与LTG剂量的相关性分析（ ）

注：与AA型基因比较，aP＜0.05。OCT1 rs628031：OCT1为有机阳离子转运体1，rs628031为其基因多态性类别；GG、AG、AA为OCT1 rs628031基因的3个具体分型。

OCT1 rs628031基因型 例数 LTG剂量（μg/mL）GG 30 2.03±0.18a AG 28 1.98±0.13a AA 22 4.02±0.31 F值 730.095 P值 0.000

2.4 OCT1基因多态性与LTG稳态血药浓度、标准剂量血药浓度的相关性分析 不同OCT1 rs628031基因型携带者的稳态血药浓度比较，差异无统计学意义（P＞0.05），OCT1 rs628031 GG、AG基因型携带者LTG标准剂量血药浓度显著低于OCT1 rs628031 AA基因型携带者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 OCT1基因多态性与LTG稳态血药浓度、标准剂量血药浓度的相关性分析（ ）

表3 OCT1基因多态性与LTG稳态血药浓度、标准剂量血药浓度的相关性分析（ ）

注：与AA型基因比较，aP＜0.05。OCT1 rs628031：OCT1为有机阳离子转运体1，rs628031为其基因多态性类别；GG、AG、AA为OCT1 rs628031基因的3个具体分型。

标准剂量血药浓度[（μg/mL）/（mg/kg）]GG 30 2.37±0.29 1.09±0.16a AG 28 2.22±0.35 1.12±0.14a AA 22 2.26±0.64 2.02±0.18 F值 1.469 263.936 P值 0.237 0.000 OCT1 rs628031基因型 例数 稳态血药浓度（μg/mL）

3 讨论

颅脑损伤是在暴力击打、碰撞等外力间接或直接作用于头部后产生的颅脑组织损伤，若患者在受伤后昏迷≥6 h或发生再度昏迷的情况，则被视为重症颅脑损伤，此类患者便极易在手术后出现创伤性癫痫并发症[7-9]。颅脑损伤合并癫痫对患者的健康甚至生命安全都有极大威胁，尤其晚期患者的预后较差，死亡率较高[10]。因此在患者围手术期使用抗癫痫药物已成为临床治疗时的重要手段，LTG为应用最广泛的药物之一。

LTG作为一种广谱抗癫痫药物，近年来在全面性或部分性癫痫的临床治疗中应用时，取得了相对较好的治疗效果，但治疗过程中也发现一定问题，其中临床最为关注的问题之一即LTG在不同患者体内的稳态血药浓度有显著差别[11-12]，主要是因为血药浓度的差异和LTG的治疗效果与安全性有密切联系。因此众多临床医师开始对其差异加以关注并对引起这种差异的原因进行了持续研究，以期优化LTG的应用以增强疗效和用药安全性。既往研究发现药物代谢转运蛋白的基因多态性对抗癫痫药物的生物利用度、药代动力学等方面有明显影响[13]，譬如乳腺癌耐药蛋白、p-糖蛋白、多药耐药相关蛋白-2等转运蛋白，当其发生异常时，就会对LTG的血药浓度造成影响，导致患者间疗效产生差别[14]。

本研究在OCT1基因多态性与LTG疗效、剂量相关性的观察中发现OCT1 rs628031 GG、AG、AA基因型携带者之间的LTG疗效和剂量水平有明显差异；在OCT1基因多态性与LTG稳态血药浓度、标准剂量血药浓度相关性的观察中，发现OCT1 rs628031 GG、AG、AA基因型携带者之间的稳态血药浓度差异不大，但LTG剂量、LTG标准剂量血药浓度有明显差异。提示OCT1 rs628031基因多态性与LTG疗效及标准剂量血药浓度关系密切。由于有机阳离子通道转运体能够转运内源性、外源性物质，与非带电化合物和阳离子药物的聚集与排泄密切相关[15]，也有研究提出脑血管内皮细胞内部LTG有可能是OCT1底物[16]。因此OCT1的基因多态性亦有可能与LTG的疗效、药代动力学等存在联系。但目前临床关于OCT1的基因多态性的研究较少，对于OCT1的基因多态性与LTG治疗颅脑损伤后癫痫间的关系仍不清晰，因此在后续的研究中仍期待开展更多的研究，以探讨OCT1的基因多态性影响LTG治疗效果的可能机制，以期寻找到LTG浓度、疗效等的影响因素，从而更好地对颅脑损伤后癫痫患者进行临床治疗。

综上，本研究发现颅脑损伤后癫痫患者在使用LTG治疗时，药物疗效、剂量和标准剂量血药浓度在OCT1不同基因类型携带者之间差异有统计学意义。