甘草多糖对哺乳仔猪健康状况和血清抗氧化能力的影响

张 才，陈文彬，邵 琦，赵艳辉，赵鹏力，王雪莹，刘 艳，赵婉莉

(1 河南科技大学 动物科技学院，河南 洛阳 471023；2 河南省动物福利与健康养殖国际联合实验室，河南 洛阳，471000；3 牧原食品股份有限公司，河南 南阳 473000)

植物多糖具有抗氧化[1]、抗病毒[2]、抗肿瘤[3]等生理功能,特别是在免疫调节方面，植物多糖能够增强机体免疫力，协助抵御各种疾病和改善动物产品质量[4-5]。因此，植物多糖作为饲料添加剂的可行性研究已成为热点[6-8]。甘草(GlycyrrhizauralensisFisch)是多年生豆科草本植物，又名甜草、国老、甜根子。甘草的根及根状茎是一种补益中草药，是我国四大药材之一，有“中药之王”的美誉[9]。甘草有祛痰止咳、健脾补气、清热解毒等功效，在中药方剂中广泛应用。甘草多糖(glyeynhiza polysaeeharide，GCP)是从甘草中提取的、具有多种生物活性的高分子水溶性多糖，其具有提高机体生长性能[10]、调节免疫[11]、抗肿瘤[12]、抗氧化[13]、抗病毒[14]等功能。衣蕾等[15]研究发现，肌肉注射甘草多糖可显著增加蛋鸡体质量，同时显著提高蛋鸡的抗氧化能力。马璐等[16]研究表明，在饲粮中添加甘草多糖可以促进肉鸡免疫器官的发育，提高机体免疫功能。还有研究表明，将甘草多糖作为饲料添加剂或经注射给药供给肉仔鸡，均能够显著提高肉仔鸡的体质量，降低料重比，改善其生长性能[17-18]。可见，甘草多糖可以改善动物的健康状况和抗氧化能力。

在“禁抗”成定局、非洲猪瘟成新常态的当下，寻找既能提高仔猪生长性能，又能维护其健康且有效、可持续的非抗生素类生长促进剂势在必行。因此，本试验通过在仔猪基础饲粮中添加不同剂量的甘草多糖，检测其对试验仔猪健康状况、血清抗氧化能力及血清生化指标的影响，旨在为甘草多糖在仔猪饲粮中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

5日龄“杜×长×大”三元杂交仔猪180头，体质量约1.5 kg/只，由郑州市某规模化养猪场提供。甘草多糖(多糖含量23.0%)，由洛阳蓝斯利科技有限公司提供。

1.2 主要试剂与仪器

1.2.1 主要试剂 乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测定试剂盒，均购于北京索莱宝科技有限公司。

1.2.2 主要仪器 Sigma 2-16KL型离心机，购自德国希格玛公司；UV-6300双光束紫外可见分光光度计，购自上海美谱达仪器有限公司；MultiskanTMF酶标仪，购自赛默飞世尔科技有限公司；ZS-320型全自动生化分析仪，购自中生(苏州)医疗仪器有限公司；SE-9000+HPC全自动血细胞分析仪，购自日本东亚SYSMEX(希森美康)公司。

1.3 试验设计

采用单因子多重水平试验，在产房随机选择24窝共180头5日龄“杜×长×大”三元杂交仔猪，分为3组，分别为对照组、1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组，每组8个重复，每个重复7～8头仔猪。采取常规饲喂模式，对照组饲喂基础饲粮，1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组分别在基础饲料中添加质量分数1.0%和2.5%甘草多糖，饲喂30 d。试验期间各组仔猪采取产房常规饲养，饮水、消毒及免疫程序严格按照猪场管理方案进行，试验过程中要求严格控制喂料时间、温度、通风等。

1.4 样品采集与处理

试验结束后第2天早晨空腹采血。各组分别随机选择10头仔猪，每头前腔静脉采血10 mL。采集的血液分两管收集，其中一管加入抗凝剂并混匀，用于血常规测定；另一管离心分离制备血清，置于-20 ℃保存，用于生化指标及抗氧化指标的测定。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能 试验开始前称量仔猪的初始质量，试验结束时再称量其末质量，计算仔猪的平均日增质量(平均日增质量=(末质量-初始质量)/30)。统计各组仔猪试验期间的耗料量，计算料重比；试验期间记录各组仔猪的采食量，计算平均日采食量。

1.5.2 死亡情况 试验期间每天观察试验仔猪生长状况，记录各组仔猪的死亡数量，计算死亡率。死亡率=死亡头数/总头数×100%。

1.5.3 皮毛发育状况 试验结束时，由2名研究人员通过双盲法，按拟定的评分标准独立为各组仔猪的皮毛及光滑程度进行测评。为方便统计，采取1～5分的测评方式。仔猪皮毛非常光滑并且非常有光泽，评为5分；仔猪皮毛光滑并且有光泽，评为4分；仔猪的皮毛相对较为光滑，并稍有光泽，评为3分；仔猪皮毛粗糙杂乱且不光滑，评为2分；仔猪皮毛非常粗糙且杂乱，评为1分。

1.5.4 血常规指标 将加入抗凝剂的血液在4 h内采用全自动血细胞分析仪测定血常规参数，包括白细胞数、红细胞数、血红蛋白质量浓度、血小板数。

1.5.5 血清生化指标 将血清样品采用全自动生化分析仪测定，共测定9项血清生化指标，包括总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、血清总胆固醇(TC)含量及白球比(A/G)和谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性。

1.5.6 血清抗氧化能力 血清GSH-Px和LDH活性以及丙二醛(MDA)含量的测定，依据相应测定试剂盒说明书进行。

1.6 数据统计与分析

试验数据采用 Excel 2010软件进行统计。试验数据以“平均值±标准差”表示。采用SPSS 17.0软件进行单因子方差分析(one-way ANOVA,LSD)，采用Duncan’s法进行多重比较检验，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 甘草多糖对仔猪健康状况的影响

2.1.1 生长性能 甘草多糖对仔猪生长性能的影响如表1所示。

表1 甘草多糖对仔猪生长性能的影响Table 1 Effects of glycyrrhiza polysaccharide on growth performance of piglets

由表1可知，与对照组相比，1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组仔猪的末质量和平均日增质量均有所提高，其中1.0%甘草多糖组仔猪的末质量和平均日增质量均显著高于对照组(P<0.05)；2.5%甘草多糖组仔猪的末质量和平均日增质量虽高于对照组，但与对照差异不显著。与对照组相比，1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组仔猪的平均日采食量(ADFI)和料重比均显著高于对照组(P<0.05)。

2.1.2 死亡情况 如表2所示，各组试验仔猪数均为60头，其中，试验期内对照组仔猪死亡6头，死亡率为10%；1.0%干草多糖组仔猪死亡2头，死亡率为3.33%；2.5%干草多糖组仔猪试死亡1头，死亡率为1.67%。1.0%干草多糖组和2.5%干草多糖组仔猪死亡率均显著低于对照组(P<0.05)。

表2 甘草多糖对仔猪死亡情况的影响Table 2 Effects of glycyrrhiza polysaccharide on death of piglets

2.1.3 皮毛发育状况 由表3可知，与对照组相比，1.0%甘草多糖组仔猪皮毛发育状况评为5分(皮毛非常光滑并有光泽)的比例显著升高，评为1分(仔猪皮毛非常粗糙且杂乱)的比例显著降低；2.5%甘草多糖组仔猪皮毛发育状况评为5分(皮毛非常光滑并有光泽)的比例也有所升高，但与对照组差异不显著(P>0.05)，而该组仔猪皮毛发育状况评为1分(仔猪皮毛非常粗糙且杂乱)的比例显著低于对照组。

表3 甘草多糖对仔猪皮毛发育状况的影响 Table 3 Effects of glycyrrhiza polysaccharide on fur performance of piglets

2.2 甘草多糖对仔猪血常规指标的影响

由表4可知，试验组(1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组)仔猪血液中白细胞数、红细胞数、血小板数和血红蛋白质量浓度均高于对照组，其中2.5%甘草多糖组仔猪血液中的白细胞数、红细胞数和血小板数均最多，与对照组相比均具有显著差异(P<0.05)；1.0%甘草多糖组仔猪血液中的白细胞数、红细胞数和血小板数均高于对照组，但与对照组差异不显著。

表4 甘草多糖对仔猪血常规指标的影响Table 4 Effects of glycyrrhiza polysaccharide on routine blood indexes of piglets

2.3 甘草多糖对仔猪血清生化指标的影响

由表5可知，与对照组相比，试验组(1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组)仔猪血清中甘油三酯、葡萄糖、总蛋白和总胆固醇含量均有提高，且其甘油三酯和葡萄糖含量与对照组差异显著(P<0.05)。试验组(1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组)仔猪血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性和总胆固醇、总蛋白、白蛋白、球蛋白含量及白球比等生化指标与对照组均无显著差异(P>0.05)。

2.4 甘草多糖对仔猪血清抗氧化能力的影响

由表6可知，试验组(1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组)仔猪血清中乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性均高于对照组，其中1.0%甘草多糖组仔猪血清中乳酸脱氢酶活性显著高于对照组(P<0.05)，2.5%甘草多糖组仔猪血清中谷胱甘肽过氧化酶活性显著高于对照组(P<0.05)。1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组仔猪血清中的丙二醛(MDA)含量均低于对照组，且1.0%甘草多糖组仔猪血清中的MDA含量与对照组差异显著(P<0.05)。

表6 甘草多糖对仔猪血清抗氧化能力的影响Table 6 Effects of Glycyrrhiza polysaccharide on serum antioxidant ability of piglets

3 讨 论

哺乳仔猪是指出生至断奶期的仔猪。由于自身各个器官尚未发育完全，哺乳仔猪不能很好地调节体温，消化能力不强，免疫力较低，易受病原体侵袭，所以这一阶段的仔猪饲养成本较高，死亡率也较高[19]。同时，哺乳仔猪的健康状况会对其发育以及最终屠宰性能产生极大影响[20]。若此阶段的仔猪体质量过轻，后期则不易管理，肠道易受感染，死亡率较高[21]。由于环境、食物形态的改变、失去母源抗体保护等因素的影响，断奶仔猪常常发生断奶应激，导致厌食，生长受损，健康问题或肠道结构受损，腹泻甚至死亡[22]。因此，哺乳仔猪的饲养是养猪生产的关键。

植物多糖能够改善动物的健康状况。一方面，植物多糖可以刺激机体的免疫系统，提高仔猪的免疫力，从而提高其抵抗疾病的能力[23-24]。据报道，甘草多糖可以激活免疫细胞，对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有促进作用[25]，可以从细胞因子、抗体水平和免疫细胞活性等多方面提高机体的免疫能力[26]。另一方面，植物多糖具有抗菌和抗病毒能力。研究表明甘草多糖对多种细菌和病毒具有明显的抑制和灭活作用，可用于预防和治疗细菌或病毒感染[27-28]。本研究中，试验组(1.0%甘草多糖组和2.5%甘草多糖组)仔猪死亡率较低，末质量、平均日增质量和平均日采食量均得到改善，皮毛发育状况评为5分的比例明显高于对照组。这表明甘草多糖可以通过调节机体免疫系统，提高动物的抗病和抗应激能力，改善机体的健康状况，对仔猪具有保护作用。

仔猪血液指标的变化与其健康状况息息相关[29]。仔猪体内红细胞和白细胞数目增高，可以在一定程度上提高其免疫力及生长性能。甘油三酯和葡萄糖含量的提高表示仔猪的营养物质代谢得到了一定的促进。本研究中，试验组仔猪血清中的白细胞数、红细胞数、血小板数、甘油三酯和葡萄糖含量等均有明显提高，表明甘草多糖可以促进仔猪脂肪代谢和蛋白质的合成，调节机体血糖水平，从而提高仔猪的健康状况。另外，也有研究表明，作为饲料添加剂，甘草多糖还可以通过改善肠道微生物群落，促进小肠绒毛发育，加强机体对营养物质的消化吸收，从而改善生长性能，促进机体健康[30]。

机体抗氧化能力与其健康状况密切相关。当仔猪断奶时会发生应激，机体的抗氧化酶活性显著下降，仔猪生长性能下降，免疫力降低[31]。增强仔猪抗氧化能力可以提升机体清除自由基的能力，减少脂质过氧化反应和脂质过氧化物的生成，保护细胞膜结构和功能的完整[32]。因此，提高仔猪抗氧化能力对于减少仔猪断奶时的应激反应，确保其健康生长具有重要意义。本研究中，2.5%甘草多糖组仔猪血清中谷胱甘肽过氧化酶活性显著高于对照组；1.0%甘草多糖组仔猪血清中的乳酸脱氢酶活性显著高于对照组，但其丙二醛含量显著低于对照组，说明甘草多糖能够有效增强仔猪血清抗氧化能力，但过量的甘草多糖并不能进一步改善哺乳仔猪血清抗氧化酶的活性。据报道，在饲粮中加入甘草多糖后，小鼠血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、GSH-Px活性和总抗氧化能力(T-AOC)明显升高，说明甘草多糖可以通过提高体内抗氧化酶的活性来清除过多的自由基和活性氧，从而增强机体的抗氧化能力[13]，这与本试验结果相似。甘草多糖对机体抗氧化能力的增强，可能是通过改善机体能量代谢和提高机体细胞免疫等综合作用的结果。

4 结 论

在饲料中添加甘草多糖可以明显改善哺乳仔猪的皮毛发育，提高血清抗氧化能力，改善其健康状况，减少疾病的发生。在本试验条件下，以在哺乳仔猪基础饲粮中添加1.0%的甘草多糖效果更佳。