血清趋化因子CXCL12、CXCL17 与2 型糖尿病患者微血管病变的关系

左源渊 辛丽娟

随着人们饮食结构的变化，2 型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus，T2DM）发生率比以往有明显升高，威胁社会大众的健康［1-2］。微血管病变是T2DM 常见的一种并发症，以基底膜增厚为特征，其不易及时察觉，导致延误疾病诊治，可升高T2DM 患者的病死率［3-4］。因此，寻找可有效判断T2DM 是否并发微血管病变的指标，并及时干预，对改善T2DM 患者生存状况尤其重要。CXC 趋化因子配体12（CXC chemokine ligand 12，CXCL12）又名基质细胞衍生因子1（stromal cell-derived factor 1，SDF-1）在糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）中呈高水平，CXCL12 可能参与DN 发生发展［5］；CXC 趋化因子配体17（CXC chemokine ligand 17，CXCL17）在不稳定型心绞痛中水平较高，且CXCL17 具有辅助诊断不稳定型心绞 痛 的 潜 在 价 值［6］。但CXCL12、CXCL17 与T2DM 患者并发微血管病变的关系尚不明确，因此，本文通过测定CXCL12、CXCL17 在T2DM 中的水平，旨在探究二者与微血管病变的关系，并分析CXCL12、CXCL17 对T2DM 并发微血管病变的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2019 年12 月至2022 年3 月本院收治的90 例T2DM 并发微血管病变患者为微血管病变组，男45 例，女45 例；糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）患者61 例，DN 患者29 例。并选取同期92 例单纯T2DM 患者为单纯T2DM 组，男49 例，女43 例。此外，并纳入同期90 名健康体检者为对照组，男47 例，女43 例；不伴有T2DM、肝、肾、肺、心脏疾病，不伴有风湿免疫系统疾病。另外，收集三组受试者体重指数、总胆固醇（total cholesterol，TC）、空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）、舒张压（diastolic blood pressure，DBP）、甘油三酯（triacylglyceride，TG）、收缩压（systolicbloodpressure，SBP）、血肌酐（serum creatinine，Scr）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）等资料。纳入标准：①单纯T2DM 患者符合《2 型糖尿病基层诊疗指南（实践版·2019）》［7］中T2DM 诊断标准，不符合《中国糖尿病诊疗指南解读——糖尿病肾病》［8］中DN 的诊断标准、《我国糖尿病视网膜病变临床诊疗指南（2014 年）》［9］中DR 的诊断标准；②微血管病变患者符合T2DM 及DN 或DR 的诊断标准；③受试者对本研究知情同意，检查资料齐全。排除标准：①近3 个月内有感染、手术者；②有大血管病变、原发性肾脏病者；③患有1 型糖尿病者；④合并血液系统疾病、心力衰竭、免疫系统疾病、肝功能严重不全者；⑤妊娠/哺乳期女性；⑥合并肿瘤或有过敏性疾病史者。研究获得本院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 样本收集

收集T2DM 并发微血管病变患者、单纯T2DM患者确诊当天，健康体检者体检当日4～6 mL 外周血，静置约30 min，5 100 r/min 离心5 min（离心半径：10 cm）分离血清，存于-70℃冰箱。

1.2.2 酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）测定血清CXCL12、CXCL17水平

按人CXCL12 ELISA 试剂盒（70-EK1119-96，杭州联科生物技术股份有限公司）、人CXCL17 ELISA试剂盒（huayueyang3692，北京华越洋生物科技有限公司）说明书配制CXCL12、CXCL17 的标准品溶液，解冻血清样本，按照试剂盒和仪器说明书进行操作，使用酶标仪（德国BMG 公司，CLARIOstar Plus）测定CXCL12、CXCL17 标准品溶液及血清样本在450nm 处的吸光度，绘制CXCL12、CXCL17 的标准品回归曲线。根据CXCL12、CXCL17 的标准品回归曲线，计算血清CXCL12、CXCL17 水平。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 三组一般资料比较

与对照组相比，单纯T2DM 组、微血管病变组患者DBP、TC、TG、LDL-C、FBG、Scr、BUN 水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与单纯T2DM 组相比，微血管病变组患者DBP、TC、TG、LDL-C、FBG、Scr、BUN 水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；三组体重指数、SBP、男/女比、年龄、LDL-C水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 三组一般资料比较（±s）Table 1 Comparison of three groups of general data（±s）

表1 三组一般资料比较（±s）Table 1 Comparison of three groups of general data（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与单纯T2DM 组比较，bP＜0.05。

临床指标年龄（岁）男/女（例）体重指数（kg/m2）DBP（mmHg）SBP（mmHg）TC（mmol/L）HDL-C（mmol/L）TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）FBG（mmol/L）Scr（μmol/L）BUN（μmol/L）对照组（n=90）54.82±9.62 47/43 22.24±2.29 74.63±5.35 118.27±23.65 4.08±1.02 1.18±0.39 1.63±0.41 2.27±0.57 5.40±1.35 65.36±5.94 4.87±1.62单纯T2DM 组（n=92）56.64±9.96 49/43 21.90±2.22 83.69±6.02a 122.48±24.50a 4.92±1.23a 1.12±0.37 2.25±0.56a 2.62±0.66a 9.98±2.50a 77.39±7.04a 6.53±2.18a微血管病变组（n=90）55.75±9.83 45/45 21.87±2.19 93.57±6.73ab 125.94±25.19ab 5.85±1.46ab 1.06±0.35 2.75±0.69ab 2.93±0.73ab 11.87±2.97ab 89.55±8.14ab 8.86±2.95ab F/χ2值0.784 0.202 0.764 219.975 2.220 45.189 2.362 88.758 22.760 176.896 261.429 67.526 P 值0.458 0.904 0.467＜0.001 0.111＜0.001 0.096＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 三组血清CXCL12、CXCL17 水平比较

与对照组比较，单纯T2DM 组、微血管病变组患者血清CXCL12、CXCL17 水平均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与单纯T2DM 组相比，微血管病变组患者血清CXCL12、CXCL17 水平均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 三组血清CXCL12、CXCL17 水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum CXCL12 and CXCL17 levels in three groups（±s）

表2 三组血清CXCL12、CXCL17 水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum CXCL12 and CXCL17 levels in three groups（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与单纯T2DM 组比较，bP＜0.05

组别对照组单纯T2DM 组微血管病变组F 值P 值n 90 92 90 CXCL12（ng/mL）3.68±1.23 7.74±2.58a 13.16±4.39ab 223.052＜0.001 CXCL17（pg/mL）121.06±40.35 229.27±76.42a 440.98±147.07ab 246.560＜0.001

2.3 多因素Logistic 回归分析T2DM 并发微血管病变的影响因素

以年龄、男/女比、体重指数、DBP、SBP、TC、HDL-C、TG、LDL-C、FBG、Scr、BUN、CXCL12、CXCL17 为自变量，以T2DM 是否并发微血管病变为因变量（发生=1，不发生=0），行多因素Logistic回归分析，结果显示，TC、FBG、Scr、CXCL17、CXCL12 是T2DM 并发微血管病变的危险因素（P＜0.05）。见表3。

表3 影响T2DM 并发微血管病变的多因素Logistic 回归分析Table 3 Multifactor Logistic Regression Analysis of T2DM Complicated with Microangiopathy

2.4 血清CXCL12、CXCL17 对T2DM 并发微血管病变的预测价值

ROC 曲线显示CXCL12、CXCL17 二者联合预测T2DM 并发微血管病变的AUC 为0.949（95%CI：0.921～0.977），灵 敏 度、特 异 度 分 别 为0.933、0.852，约登指数为0.785。见图1。

图1 ROC 曲线图Figure 1 ROC curve

3 讨论

T2DM 起病隐匿，早期症状并不明显，多数T2DM 患者就诊时多已出现微血管病变［10］。DN、DR 是T2DM 并发微血管病变的主要形式，与高血糖、炎症反应、血管生成、氧化应激等有关［11］。另外，肾穿是诊断DN 的金标准，但其可造成机械性损伤，影响受试者预后，而DR 多利用眼底血管荧光造影诊断，但造影剂有副作用［12］。因此，寻找经济、副作用少、创伤小且可有效诊断T2DM 并发微血管病变的方法，对降低患者致残率、病死率甚是关键。

CXCL12 是CXC 家族的一员，其可与CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor 4，CXCR4）相结合，进而影响血管生成，参与中枢神经系统、胚胎发育，介导免疫反应，调节炎症反应，与急性脑梗死（acute cerebral infarction，ACI）、DN 等病理发展相关［13-14］。研究发现，CXCL12 在ACI 中呈高水平，与ACI 严重程度呈正相关，CXCL12 有望成为评估ACI 患者预后的标志物［15］；另外，CXCL12在心力衰竭中水平较高，且CXCL12 有望成为评估心力衰竭患者预后的潜在指标［16］。本研究中微血管病变组血清CXCL12 水平较高，提示CXCL12可能与T2DM 发生及其并发微血管病变过程有关，推测，高水平CXCL12 通过与CXCR4 结合，进而影响内皮功能，造成血管损伤，影响血管新生，从而影响T2DM 并发微血管病变过程［15-16］。此外，本文经ROC 曲线分析发现，CXCL12 可能对T2DM 并发微血管病变有一定预测价值，且CXCL12 有望成为预测T2DM 并发微血管病变的有效指标。

CXCL17 同样是CXC 家族的成员之一，其可被血管内皮细胞、树突状细胞分泌到细胞外，其不仅可维持黏膜无菌性，还可激活免疫反应，促进血管生成，调节炎症反应，与哮喘、肾脏疾病有关［17-18］。研究发现，CXCL17 在慢性肾脏病中呈高水平，其可能通过促进上皮间质转化进而引发肾纤维化，促使细胞外基质积累，CXCL17 可作为诊断晚期慢性肾脏病的标志物［19］；另外，CXCL17 在急性脑出血中水平升高，检测血清CXCL17 水平有助于评估脑出血患者病情［20］。本研究结果提示CXCL17可能影响T2DM 并发微血管病变进程，分析可能原因，高水平CXCL17 通过影响血管生成，影响炎症反应，进而在T2DM 并发微血管病变过程中发挥促进作用。另外，本研究表明，测定血清CXCL17 水平有助于临床判定T2DM 患者是否并发微血管病变。进一步研究发现，CXCL12、CXCL17 联合可更好地预测T2DM 并发微血管病变，这为临床判断T2DM 并发微血管病变提供较为简单、有效的方法。此外，本研究表明，血清CXCL17、CXCL12、TC、FBG、Scr 水平升高均可能会增加T2DM 患者并发微血管病变的风险，及时监控CXCL12、CXCL17 等指标水平可能有利于临床防治T2DM 患者并发微血管病变。

综上，T2DM并发微血管病变患者血清CXCL12、CXCL17 水平较高，且血清CXCL12、CXCL17 联合可较好地判断T2DM 患者是否并发微血管病变，为临床诊治T2DM 并发微血管病变提供新的参考方案。但由于样本较少，本研究未深入探讨CXCL12、CXCL17 与不同微血管病变DR、DN 的关系，后期将扩大样本就此展开研究。