临床标本中马红球菌的抗生素敏感性与临床疗效相关

李 静

(南阳医学高等专科学校第一附属医院 检验科，河南 南阳 473000)

马红球菌(Rhodococcusequi,R.equi)属红球菌属，是一种人畜共患的机会致病菌，约1/3的马红球菌会引起败血症、肺炎、扁桃体炎、脑膜炎、尿道炎、肾炎和心内膜炎等[1]。现将其分离鉴定方法、抗生素敏感性及临床疗效的结果进行总结和分析。

1 材料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 标本：标本来源于2019年4月至2020年4月临床科室送检的痰、尿、脑脊液、血培养等标本。对其进行培养，并从中选取17例经分离鉴定确定携带马红球菌的患者为治疗组(抗生素敏感性联合用药)，另选取17例同期分离鉴定确定携带马红球菌的患者为对照组(经验用药治疗)，比较两组治疗效果。

1.1.2 试剂：血平板由郑州安图生物有限公司提供，麦康培养基为实验室自配。

1.2 方法

1.2.1 菌株的培养与分离：按照《全国临床检验操作规程》操作[2]，鉴定根据《实用临床微生物学检验与图谱》[3]， 将各标本接种于郑州安图有限公司提供的血琼脂、麦康、沙氏培养基上严格无菌操作， 置CO2培养箱进行培养。将血平皿37 ℃培养24 h后，血平板上长出细小、无色或乳黄色的小菌落，48 h后菌落增大为红黄色(图1A)，分离出单个菌落，与金黄色葡萄球菌ATCC25P23标准菌株垂直划线于血平板上形成类CAMP样反应(B族链球菌能产生一种CAMP因子，使葡萄球菌β溶血素产生的溶血带增大)[4]。

1.2.2 菌落形态与染色：菌落形态；细小、直径为0.5 mm左右，黏液状、表面光滑、湿润、边缘整齐，大部分菌落产生桔红色或橙红色色素，革兰染色涂片镜检(图1B)，此菌为革兰阳性球杆菌，抗酸染色呈弱阳性(图1C)。

1.2.3 细菌生理、生化特征及鉴定：根据菌落形态及生化反应进行鉴定，生理、生化反应如下(表1)。

上述生化反应与马红球菌一致，故鉴定为马红球菌。

1.2.4 药物敏感性试验方法：用MIC(minimum inhibitory concentraction)法，用接种环挑取3～5菌落置于稀释液瓶内，先配置成0.5个麦氏单位的菌悬液，经MH肉汤1 000倍稀释后，依次加入药敏检测孔内，向每孔中加100 μL，密封后置35 ℃普通空气孵育箱中，孵育16～20 h后，用美华MH-120鉴定仪进行药敏检测。结果判断，以在小孔内完全抑制细菌增殖的最低药物浓度为MIC。

1.2.5 临床疗效观察方法：根据马红球菌的抗生素药物敏感性结果联合用药，以提高临床疗效。临床疗效根据《抗菌药物临床研究指导原则》分为显效、有效、无效3级。显效：症状较治疗前明显减轻；有效：症状有所减轻；无效：治疗前后临床症状无改善。

1.3 统计学分析

A.colony of 48 hours; B.gram dyeing; C.weak acid fast dyeing图1 马红球菌菌落形态Fig 1 Colony morphology of R.equi

表1 17株马红球菌的生理、生化特征

2 结果

2.1 抗生素敏感性试验

马红球菌对红霉素、利福平、万古霉素、氨基糖苷类和糖肽类敏感，对青霉素G、苯唑西林耐药。其中万古霉素、阿米卡星、利福平、环丙沙星、红霉素等药物对马红球菌敏感性最高(表2)。

2.2 临床疗效比较

治疗组临床效果明显高于对照组(χ2=4.497，P<0.05)(表3)。

表2 17株马红球菌的抗生素敏感性试验结果Table 2 Antibiotic sensitivity test results of 17 strains of R.equi

表3 17例马红球菌联合用药临床疗效比较Table 3 Clinical efficacy comparison of 17 cases of R.equi

3 讨论

近年来马红球菌感染的报道逐渐增多，常发生于细胞免疫受损的患者，尤其是一些艾滋病(AIDS)患者、免疫功能低下的患者重要的机会性感染病源菌之一[5]。最近发现可从AIDS等患者血液、脑脊液、呼吸道及尸检解剖标本分离出马红球菌[6]。马红球菌致人类感染以呼吸道感染最为常见，其临床送检标本大部分以痰液为主[7]。由于痰液标本有时杂菌较多，且该菌增殖缓慢，培养18～24 h后菌落较小，产生色素不明显，容易漏检，应将平板放置48～72 h后再观察，以提高检出率。

一旦确诊为马红球菌，应根据抗生素敏感性结果选择联合用药，据观察联合用药治疗马红球菌感染者，临床疗效显著[8]，但对中枢神经感染治疗的患者，因受血脑屏障的影响，应强调继续使用一种体外抗生素敏感的药物(如红霉素、环丙沙星)[9]，以提高治愈率而降低病死率。