2019—2020年新疆部分地区猪PCV2的抗体水平检测及分析

王紫阳 谢 静 欧亚妮 邱国斌屈勇刚 党瑞莹 高嘉豪

（1石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003；2动物疾病防控兵团重点实验室，新疆石河子 832003；3第四师畜牧兽医站，新疆可克达拉 831304）

猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2,PCV2）属于圆环病毒科圆环病毒属，是圆环病毒（porcine circovirus）4个血清型中对猪群危害最大的一种血清型[1]。PCV2为无包膜的单股负链环状闭合DNA病毒，是目前已知的在哺乳动物细胞内自行复制的最小DNA病毒[2]。PCV2于20世纪90年代在加拿大被首次分离报道，之后在很短的时间内，我国也分离到该病毒（2000年）[3]。PCV2宿主谱窄，猪是该病毒的天然宿主，主要侵害猪的免疫系统，继而降低猪群对其他疾病的抵抗力，病毒长期存在病猪和隐性感染猪的淋巴结与呼吸道中，既可水平传播又可垂直传播，是造成猪圆环病毒病广泛传播的主要原因[4]。各阶段猪群均易患猪圆环病毒病（Porcine Circovirus Disease,PCVD）：7日龄以内仔猪患病主要表现为先天性震颤（Congenital tremors,CT），仔猪出生几小时后，开始有规律的身体震颤，故称“抖抖病”，通过病原检测，可在仔猪神经系统中发现PCV2；断奶仔猪感染PCV2后，主要表现为猪断奶后多系统衰竭综合征（Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS），病猪生长缓慢，腹式呼吸，皮毛粗乱，病死率可达30%以上，耐过猪变为僵猪，饲料利用率变低[5]；育肥猪猪感染PCV2后，多表现为皮炎肾病综合征（Porcine dermatitis nephrotic syndrome,PDNS），病初猪体表见小红点，常误诊为蚊虫叮咬，但随着病程延长，红斑逐渐变大，形成丘疹，剖检病猪可见肾脏肿大；母猪感染PCV2后，主要表现为母猪久配不孕、流产，死胎、木乃伊胎增多，在流产胎儿体内可检测到PCV2，说明该病原可突破胎盘屏障，进行垂直传播。

目前，对于PCV2最好的预防手段就是进行疫苗免疫，疫苗免疫可有效提高猪群抗体水平，保护猪场的健康养殖。为评价新疆地区猪群PCV2的免疫效果，本试验采用ELISA抗体检测的方法对采集的475份猪血清进行抗体检测，以便更好指导该地区的健康养殖。

1 材料

1.1 样品

2019年1月至2020年12月期间从新疆石河子市、伊犁哈萨克自治州、阿克苏市、巴音郭楞蒙古自治州、奎屯市，按照地区、猪场及猪群类别的不同，随机采集了475份血样，分离血清后立即在石河子大学动物科技学院进行检测。其中血清样本包含哺乳仔猪92份、保育猪80份、育肥猪52份、后备猪104份、繁殖母猪117份、种公猪30份。

1.2 材料和仪器

猪圆环病毒2型（PCV2）抗体检测试剂盒购自北京爱德士元亨生物科技有限公司；兽用5 mL一次性采血器购自南昌市山力畜牧器械有限公司；自动酶标仪购自青岛智汇谷信息技术有限公司。

2 方法

2.1 样品及试剂准备

新鲜的、冷藏（2～8℃少于8 d）的、冷冻的血清都可用于检测；所有试剂需恢复至室温，轻微震荡混匀。

2.2 ELISA检测方法

检测方法严格按照各ELISA检测试剂盒使用说明书进行操作。

2.3 结果判定

OD450nm值≥临界值为阳性；OD450nm值＜临界值为阴性。

2.4 数据分析

使用SPSS软件对数据进行统计分析，计算各组数据的差异。

3 结果与分析

3.1 不同猪场PCV2抗体检测结果

5个规模化养殖场（用A～E表示）的475份血液样品中，根据统计结果可知，在475份样品中，有331份血清呈PCV2抗体阳性，平均阳性率为69.68%（331/475），S/P的平均值为1.56。

除B场和D场抗体水平达到国家规定的70%以上标准外，A、C、E场的抗体水平均未达到群体免疫的抗体水平和免疫标准，其中A场的阳性率最低仅为48.65%。在A～E猪场中，A场与B场、D场、E场间均存在显著差异（P＜0.05），B场与C、D、E场间存在显著差异（P＜0.05），C场与D场间存在显著差异（P＜0.05），A场与C场这2个场差异不显著（P＞0.05）。试验结果见表1。

表1 不同猪场PCV2抗体检测结果

3.2 不同类别猪群PCV2抗体检测结果

各类别猪群中，哺乳仔猪、保育猪、育肥猪、后备猪、繁殖母猪、种公猪阳性率分别为51.09%（47/92）、42.50% （34/80） 、 75.00% （39/52） 、 80.77%（84/104）、86.32%（101/117）、86.67%（26/30）；其中种公猪群的抗体阳性率最高，为86.67%，保育猪的平均阻断率最低，为42.50%；哺乳仔猪群、保育猪群平均阻断率与育肥猪群、后备猪群、繁殖母猪群、种公猪群存在显著差异（P＜0.05）；哺乳猪群的平均阳性率与保育猪群差异不显著（P＞0.05）；育肥猪群的平均阳性率与后备猪群、繁殖母猪群、种公猪群差异不显著（P＞0.05）。结果见表2。

表2 不同类别猪群PCV2抗体检测结果

4 讨论

4.1 各猪场PCV2免疫效果评价

通过对新疆地区5个规模化养殖场475份血清样品进行猪圆环病毒抗体ELISA检测得知，有331份血清样品检测呈阳性，平均抗体阳性率仅为69.68%，未达到国家规定的70%抗体水平标准。其中B场抗体合格率达90%以上，达到了规模化养殖场控制PCV2疫情的水准[6]。与2019年张家瑞等[7]检测到新疆部分地区猪场PCV2平均抗体阳性率70.71%相比，抗体阳性率出现下降，且有3个场都未能达到国家规定的免疫标准。这一检测结果应该引起这几个场管理人员的重视，可能是由于猪场技术人员在PCV2免疫计划的制定上存在一定的问题，存在免疫空白期以及免疫的密度不能达到100%，应根据抗体检测结果对猪群已有的免疫程序进行优化，及时找出抗体阳性率不高的内在原因，及时止损。

4.2 不同类别猪群PCV2免疫抗体的差异

通过对不同类别猪群PCV2抗体检测结果分析得知，各类别猪群的抗体水平存在一定差异。各猪群整体的抗体阳性率仅为69.68%。种公猪的抗体阳性率最高，达86.67%；保育猪群的抗体阳性率最低，低至42.50%，保育猪群作为场区的“经济命脉”，做好疫苗免疫以及抗体水平的监测至关重要，保育猪群的优劣，也直接关系到该场的效益，只有确保保育猪群的健康，才能为下一阶段的育肥提供可靠的保障。该猪群抗体阳性率不高的原因可能是由于从哺乳仔猪到保育阶段存在较长的免疫空白期，在此期间猪只体内的抗体消耗殆尽，而又未及时得到补充，因此应对现推行的免疫时间进行适当调整，确保猪群能够及时得到免疫，降低猪群在该阶段的感染风险，为猪群的健康打下坚实基础[8]。

5 小结

综上所述，从近年来本实验室对新疆部分地区规模化猪场猪圆环病毒2型感染状况的调查来看，新疆地区的大多数猪场都存在不同程度的PCV2感染，有些猪场的感染率甚至达到80%以上。虽然由猪圆环病毒2型本身引发的疾病很少发生，但该病毒感染后可造成感染猪的免疫细胞和免疫器官受损，使得猪的免疫力低下，容易继发其他病原的感染。因此，在规模化猪场一般都要对猪群注射猪圆环病毒疫苗，防患于未然。从本次检测的结果来看，免疫的效果不是特别理想，各场应根据实际情况，对猪群的抗体水平进行检测，及时发现问题，并对现有的免疫程序进行优化，探索出适合本场的圆环病毒2型的防控方案，降低损失，确保猪场的长久稳定发展。