不同消毒剂对乙肝病毒污染胃镜病毒灭活率的影响

刘 淇，范亚硕，潘 静

(郑州大学附属南阳市中心医院 河南南阳473000)

据不完全统计，全世界范围内乙型肝炎病毒(HBV)感染人数约为20亿且呈不断上升趋势，已成为广泛流行的感染疾病之一[1]。由于HBV是一种嗜肝病毒，故乙肝患者肝脏可能存在不同程度的损伤，严重影响其身心健康和生活质量[2]。消化内镜多内腔狭窄且结构复杂，其诊疗过程中难以避免地与患者血液、体液接触，继而发生污染造成院内感染，HBV作为肠外传播性肝炎，很可能通过消化道内镜传播[3]。因此，对消化内镜及其附件的清洗和消毒成为该仪器使用后的关键环节，也是各类病原体在院内发生交叉感染的有效预防途径[4]。但目前，关于消毒剂和消毒方法的选择标准尚未统一，寻找一种快速简单、效果良好的消毒液并加以推广迫在眉睫[5]。基于此，本研究选择700条被HBV感染患者污染的胃镜作为研究对象，分别给予酸性氧化电位水、戊二醛、邻苯二甲醛三种消毒剂进行消毒，旨在比较三种消毒剂对HBV病毒的灭活率。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2018年1月1日～2020年12月31日700例感染HBV且接受胃镜检查的患者为研究对象。纳入标准：①患者经检查血清HBV表面抗原阳性；②患者均接受胃镜检查；③患者或家属知晓本研究目的及内容，签署知情同意。排除标准：①合并重度肺炎、艾滋病、丙型病毒肝炎者；②不愿配合本研究者。收集700条胃镜，按照随机数字表法分为A组233条、B组233条、C组234条。三组一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 试剂及仪器 ①清洗剂：进口全效多酶清洗剂。②消毒剂：A组-含500 mg/L氯化钠软化水点解后生成的酸性氧化电位水(pH值2.4～2.7，氯有效含量40～50 mg/L)；B组-邻苯二甲醛消毒液(浓度5500 mg/L)；C组-戊二醛消毒液(浓度20 g/L)。③中和剂：甘氨酸溶液，浓度10 g/L；硫代硫酸钠磷酸盐缓冲液，浓度5000 mg/L。④乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)试剂盒、PCR扩增仪及其配套的ABI7500荧光定量扩增仪；乙型肝炎病毒核酸阳性血清由该医院临床提供，含量106～107 IU/ml。

1.2.2 清洗及消毒方法 ①初洗：将活送气送水按钮、吸引器按钮及检入口阀门取下，使内镜置于清洗槽，并以流动水冲洗后采用纱布擦拭镜身，纱布为医用一次性纱布；用胃镜清洗刷对吸引器管道及活检孔道进行一次刷洗，两端均可看到刷头，保证刷头污物洗净，清洗刷使用一次消毒一次；将全管道灌流器与其连接，采用压水枪冲洗活检管道与送气送水管道，保持清洗时间2.5 min。②酶洗：采用多酶清洗液(35～40 ℃)浸泡内镜，通过注射器使多酶冲洗液对活检管道与送气送水管道进行冲洗；浸泡2 min后采用高压水枪对各管道进行有效冲洗，以流动水中采用纱布对内镜表面冲洗，并冲气至各管道，使管道水分排出，酶洗时间3 min。③消毒：取消毒液浸没胃镜，采用注射器将消毒液灌满，戊二醛、邻苯二甲醛、酸性氧化电位水分别为10 min、5 min、5 min。④漂洗：将内镜放入冲洗槽，采用注射器将空气注入各管腔，将内腔消毒液去除，操作中应戴无菌手套；采用碱水纱布将外表擦拭干净，通过注射器抽吸碱水冲净残留消毒液；内镜置于其他消毒液浸泡，通过纱布清洗内镜外表，保持高压水枪多次冲洗各孔道，保护时间2 min。⑤干燥：准备干燥台，将内镜置于其中，用无菌纱布擦拭表面，并通过高压气枪吹干各孔道水分，保持时间1 min，共3组消毒液。

1.3 观察指标 ①标本采集：分别在清洗前、清洗后、消毒后对表面与内腔标本进行收集。外表面标本采集时用无菌棉签蘸湿生理盐水多次涂刷镜身前端，将棉签放进生理盐水试管中，充分混匀后取洗脱液进行无菌检查。内腔标本采集时将活检孔道中注入生理盐水或中和剂5 ml，将冲洗液收集放进无菌试管中检查。清洗前后通过无菌生理盐水取样，消毒后则为中和剂。②病毒检测：在全部标本采集后有效时间内采用荧光定量PCR法进行检测，检测步骤严格按照PCR扩增仪、HBV-DNA试剂盒执行。比较三组清洗前后HBV-DNA平均含量、清洗后胃镜病毒清除率、消毒前后胃镜表面病毒灭活率及胃镜内腔病毒灭活率。

1.4 统计学方法 双人双次采用SPSS 23.0统计学软件分析数据。计数资料以百分比表示，采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组清洗前后HBV-DNA平均含量比较 见表1。

表1 三组清洗前后HBV-DNA平均含量比较(IU/ml)

2.2 三组清洗后胃镜病毒清除率比较 A组胃镜表面病毒清除率99.64%，胃镜内腔病毒清除率99.99%；B组胃镜表面病毒清除率99.31%，胃镜内腔病毒清除率99.99%；C组胃镜表面病毒清除率99.58%，胃镜内腔病毒清除率99.99%。三组清洗前后HBV-DNA清除率均高于99.00%，且比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3 三组消毒前后胃镜表面病毒灭活率比较 见表2。

表2 三组消毒前后胃镜表面病毒灭活率比较

2.4 三组消毒前后胃镜内腔病毒灭活率比较 见表3。

表3 三组消毒前后胃镜内腔病毒灭活率比较

3 讨论

胃镜在消化道疾病诊断中发挥较大作用，具有高准确性、高成效等优势，但胃镜属于侵入性诊疗手段，会造成病原微生物以内镜为传播路径影响患者健康[6]。目前，国内构建标准化机制监测内镜检测检查，但由于病原体潜伏期较长，关于内镜检查造成交叉感染的研究较少。杨阳等[7]研究指出，国内医院消化道内镜检查后消毒合格利率较低，为70%左右，最常见的病原菌为金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌等。国内消化道内镜清洗消毒情况有待提高，应规划科学的清洗消毒方案，并使用有效的消毒制剂[8]。肝脏是机体重要的代谢器官，承担葡萄糖的分解、贮存与血糖调节的作用[9]。采用HBV-DNA检测判断HBV的复制水平，评估病毒处于活动或复制期。HBV属于嗜肝病毒，在活动期状态下，增强机体病毒感染时的炎症反应应答，促进IN-2、IL-10等炎性因子分泌，造成炎性反应，引发炎性细胞过度浸润及肝细胞坏死，导致肝细胞功能受损[10]。同时，HBV复制活跃状态下会消减糖原合成酶的合成，阻碍摄取、利用葡萄糖。HBV感染可能造成胰腺细胞受损，因HBV感染导致胰腺分泌细胞损害，引发胰岛素分泌水平降低及抵抗增强，最终血糖值变高[11]。

本研究采用标准手工清洗流程处理污染后的消化内镜，可有效减少外表与内腔残留病毒，其中内腔与表面病毒清除率分别超过99.99%与99.00%。胃镜管腔为细长狭小状，长期使用可能由于消毒剂腐蚀及细菌生物膜覆盖，造成内腔凹凸不平，导致乙肝病毒附着，若未完善清洗消毒，在胃镜诊疗中会造成其他患者感染，形成交叉感染。影响胃镜清洗消毒效果的因素较多，包括人员因素、清洗消毒剂与清洗用具的选择等[12]。临床工作需要根据规章标准操作，在清洗内腔时需选择适宜用具，如在手工清洗软镜时需反复刷洗，并采用高压水枪持续冲洗[13]。本研究清洗后胃镜外表病毒残留较内腔多，因此工作人员在操作中应加强清洗外表面，可使用一次性医用无菌纱布或结合实际情况使用海绵刷等。

目前，多数医疗机构采用全效多酶清洗剂，对于大多医疗器械均达到较好的清洗效果，但内镜与人体消化系统接触，选用消化酶清洗剂能否达到有效清洗的目的，仍有待证实。选择酶液清洗时需遵循一镜一换的原则，采用浸泡式进行清洗[14]。清洗乙肝患者的胃镜时应使用单独的用具与清洗槽，在清洗前、消毒后均单独放置，并对清洗用具有效清洗消毒。本研究三组采取不同消毒剂处理的胃镜消毒后，胃镜内腔病毒灭活率均达到100.00%(P>0.05)，酸性氧化电位水、邻苯二甲醛对胃镜表面病毒灭活率分别为92.08%、93.15%，均高于戊二醛(P<0.05)，但酸性氧化电位水、邻苯二甲醛两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)，提示胃镜内腔消毒时上述三种消毒液均可选择，但选择酸性氧化电位水和邻苯二甲醛消毒胃镜表面效果更佳。此外，戊二醛、邻苯二甲醛同属于以醛基聚合形式存在的醛类化合物，二者同浓度条件下邻苯二甲醛自由基数量更多，故其效果优于戊二醛，临床正逐渐替代戊二醛。

综上所述，邻苯二甲醛灭活乙肝病毒污染胃镜表面病毒效果最佳，其次为酸性氧化电位水，戊二醛效果最差，三种消毒对胃镜内腔病毒均有显著灭活效果，在乙肝病毒污染的胃镜清洗及消毒过程中，表面和内腔均不可忽视。