能力验证过程中出现的问题及解决方法

张艳丽　刘宏伟　宋保军　刘小丽　王丽娟　王风英　张斌

能力验证是通过实验室间的比对结果来确定实验室检测能力的活动。通过能力验证，可使实验室了解分析项目的整体水平和自己所处的位置，进一步提高自身技术能力和管理水平。笔者将近10年的能力验证分享如下：

一、标液不出峰

（一）问题

2008年9月27日，检测15号样品，标液浓度2.0 μg·mL-1，稀释成0.2 μg·mL-1，发现久效磷不出峰，其他峰也较之前峰面积减小，判断可能有漏气地方。

（二）解决方法

检查进样垫、衬管上的“O”型圈、检查色谱柱两端的石墨垫，发现接检测器的石墨垫有松动，重新拧紧，进样后久效磷出峰。

二、标液重合

（一）有机磷标液重合问题

2012年2月21日，检测10号样品，标液进样后，发现二嗪农与氧化乐果完全重合，用DB1701色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）。

（二）解决方法

10号样品中出峰时间与标液中的二嗪农或氧化乐果重合，改变程序升温后，仍不分离，更换相同型号的VF1701色谱柱，二嗪农与氧化乐果分离，判断出10号样品中添加的是二嗪农。

三、标液定性

要求使用未失效新打开的标液。如果标液稀释后放的时间较长，可能会降解。如果出现多峰，定性成了问题。

（一）丙溴磷出2个峰

2020年10月8日，115号样品，准备过程中先进标液确定保留时间，丙溴磷标液是3个月前打开的，进气相色谱仪后，出现2个峰，但是用新买的丙溴磷标液打开后，只出1个峰。

（二）解决方法

将新买的2支丙溴磷标液都打开，进行稀释进样，只出1个峰，同时盲样样品中也只出1个峰，确定旧丙溴磷降解，不能使用。标液最好现用现买，放的时间长了会降解。

（三）三唑酮、三氯杀螨醇的定性

气相色谱仪以保留时间定性，当2种农药完全重合时无法判断，这时要更换柱子或用气质联用仪或液质联用仪进行判断。

（四）解决方法

如果想让它们分离，要换不同极性的色谱柱，比如要用DB1701色谱柱，还可以用气质联用仪，用MRM方法扫描，用4个离子对来判断。

四、标液重现性

仪器稳定，标液重现性较好时，才能准确计算样品的结果。

（一）峰面积越来越小

2012年2月21日，做10号能力验证样品，配甲拌磷与二嗪农混合标液0.2 μg·mL-1，在第1天早上、晚上及第2天早上分别进样，甲拌磷标液的峰面积越来越小，但二嗪农标液的峰面积稳定。

（二）解决方法

配混合标液进样，如果两种标液峰面积同时增大或减小，与仪器有关，可能与进样垫、衬管、色谱柱等漏气或污染有关。但一种标液正常，另外一种标液峰面积不断减小，可能与标液质量有关。打开另外1支新的甲拌磷，还是同样的问题，可能是这一批次的标液都有问题。购买其他批次的甲拌磷，稀释后进样，2天内峰面积稳定。

（三）峰面积越来越大

配制敌敌畏、甲基对硫磷的标液0.5 μg·mL-1，随着进样次数的增加，峰面积逐渐增大。

（四）解决方法

峰面积逐渐增大，与衬管污染、色谱柱污染有关，色谱柱要老化，切柱头，需要关机再开机，时间太长。因此，可以先换衬管，使用新的高惰性衬管，再次进样，峰面积稳定。

五、平行样品不平行

（一）前处理问题

2012年的能力验证，10号样品，按照NY/T 761-2008标准要求进行前处理，2个平行样品的结果相差近一半，相对偏差较大。

（二）解决方法

先排查仪器的问题，认为问题出在前处理上，取空白样品，在样品中做加标试验，氮吹时在同一根氮吹针上完成，2个平行样品结果相近，取盲样所剩的乙腈液体，在这根氮吹针上重新做前处理，得出的数据与原样品平行。原因是不同的氮吹针上调节的气流不同，氮吹近干环节没有把握好，导致平行样品不平行。

（三）样品问题

2018年能力验证时，一盒笋瓜样品、一盒苹果样品，从每盒里取3个平行样品进行检测，得出的结果不平行。

（四）解决方法

当能力验证样品是1个空白样和1个盲样，需要一次性解冻所有样品，用玻璃棒充分搅匀，再进行超声，混匀器上混匀后，把所有盲样同时分装成三等份样品。取1份先进行检测，即定性实验和初步定量实验，需要通过对比盲样与空白样确认出添加的农药和各自的添加水平，在定性实验和初步定量实验结果确定后，再拿出另外2个盲样做正式实验，同时进行与加标浓度同一水平的加标实验，计算不同农药的回收率。这样处理是为了避免样品多次解冻、多次称量造成的误差。

六、回收率低

能力验证时，除了做盲样，同时要做加标回收，确保前处理过程及仪器没问题。

（一）加标回收率低问题

甲胺磷、敌敌畏、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯等都出现过回收率低的问题。有机磷回收率低大都出现在氮吹环节，有机氯及菊酯类大都出现在氮吹、用弗罗里矽柱净化等环节。

（二）解决方法

有机磷类在氮吹时，氮吹近干的状态是烧杯里面有一滴时，取出，用吸耳球吹一下，烧杯底下潮湿即可。如果烧杯底完全干了，则回收率低。有机氯及菊酯类在氮吹时要注意，用弗罗里矽柱净化时，要先淋洗弗罗里矽柱，再倒入样品液，弗罗里矽柱不能干。洗脱过程要自然流下，不要用外力挤压，容易造成样品不平行。

七、基质效应

（一）农残检测基质效应问题

2014年能力验证时，做14号样品，用丙酮配制混标，同时做加标回收，发现水胺硫磷的回收率高达140%，其他组分的回收率也较高。

（二）解决方法

用笋瓜基质配混合标液，使用高惰性衬管进样减少目标物的吸附，农药加标回收率正常。用标液的峰面积来计算盲样，得出最终结果。

八、重现性不好

（一）问题

重现性不好，多是漏气、衬管污染、色谱柱污染、进样针堵塞等引起的。2020年6月8日能力验证时，样品峰面积，连进2针，重现性相差21%。

（二）解决方法

检查进样口与色谱柱等都未发现问题。检查进样针，进样针无折断，卸下清洗时，发现针芯有一段变黑，可能是磨损所致，更换新的进样针，重新进2针，重现性在3%以内，问题解决。

九、出平头峰

（一）问题

2020年6月8日能力验证时，三唑酮标液配制0.1μg·mL-1时出现平头峰，盲样进样后，三唑酮也出现平头峰。

（二）解决方法

出现平头峰，可能是浓度超载后峰面积不准确。解決平头峰有两种方法：一是稀释样品，标液也同样进行稀释，稀释时要注意计算准确，得出准确的稀释倍数。二是调节仪器的灵敏度，GC450气相色谱仪上ECD检测器有1与10两种灵敏度，数字越大，响应值越大，峰面积越大，两者相差10倍，调节成1的灵敏度后，不再出平头峰，峰高且尖锐，准确计算出样品含量。

为顺利通过能力验证，必须要加强培训与练习，对能力验证出现的问题进行总结，对关键点进行严格把控，组织人员进行加标回收、质控样等试验，对出现的问题及时解决。